本文關(guān)鍵詞：手足口病RT-PCR和FQ-PCR檢測(cè)方法比較及亳州市流行特征研究

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【摘要】：目的：手足口病(Hand-foot-mouth Disease，HFMD)是由多種腸道病毒感染引起的常見(jiàn)感染病，多于發(fā)嬰幼兒。其中最常見(jiàn)的是腸道病毒71型（EV71)和柯薩奇病毒A16(CA16)，可出現(xiàn)發(fā)熱和手、足皮膚皰疹，口腔咽峽黏膜潰瘍。手足口病為自限性疾病，多數(shù)患者感染后預(yù)后良好，少數(shù)患者可引起心肌炎、肺水腫、無(wú)菌性腦膜腦炎等較嚴(yán)重病變，有的患者甚至?xí)劳觥?近年來(lái)，世界各地均不斷有手足口病暴發(fā)流行的報(bào)道，引起嚴(yán)重并發(fā)癥，甚至死亡，已成為全球性的公共衛(wèi)生問(wèn)題。2008年，中國(guó)多個(gè)地區(qū)暴發(fā)手足口病疫情，全國(guó)累計(jì)報(bào)告手足口病近25000例，其中34名兒童死亡。2009年4月初，僅山東省就有累計(jì)報(bào)告手足口病例11489例，重癥病例260余例，死亡病例15例，疫情仍在不斷發(fā)展。2010年，全國(guó)手足口發(fā)病官方報(bào)道數(shù)字就達(dá)到177萬(wàn)多。 亳州是皖北也是全國(guó)手足口的多發(fā)地，因此對(duì)該地區(qū)2011年度手足口病流行特征的研究及如何早期、快速、準(zhǔn)確地檢出病原，在以后對(duì)手足口病的預(yù)防，檢測(cè)及治療過(guò)程中具有重要意義。如何在發(fā)病早期評(píng)價(jià)其發(fā)生重癥事件的危險(xiǎn)性并及時(shí)給予正確干預(yù)，對(duì)改善疾病預(yù)后、提高患者的生存率至關(guān)重要。本研究對(duì)2011年1~12月兒童手足口病流行期間的手足口病患兒進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，以了解亳州市腸道病毒的感染情況，，并研究如何早期、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出病原，為手足口病的綜合防治和腸道病毒的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)提供依據(jù)和手段。 方法：選擇2011年1~12月在亳州市CDC轄屬區(qū)上報(bào)的手足口病例193例，采集咽拭子188份，對(duì)亳州市人民醫(yī)院臨床診斷為手足口病的患兒同時(shí)采集糞便、皰疹液及腦脊液標(biāo)本64份，用熒光定量PCR(FQ-PCR)方法對(duì)上述252臨床標(biāo)本進(jìn)行EV、EV71和CA16病毒特異性核酸片段檢測(cè)；對(duì)193例臨床診斷病例采集的252份不同種類的標(biāo)本的陽(yáng)性率分別進(jìn)行比較，并判斷不同標(biāo)本檢出率是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，以尋找方便易得、患者依從性好的實(shí)驗(yàn)室臨床診斷標(biāo)本；對(duì)188份中的124份咽拭子用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR)進(jìn)行檢測(cè)，比較兩種方法陽(yáng)性檢出率的差異，同時(shí)對(duì)兩種方法檢測(cè)相異的結(jié)果送至北京華肽先鋒生物有限公司做測(cè)序；收集HFMD患兒的臨床流行病學(xué)資料，利用SPSS13.0軟件錄入檢驗(yàn)結(jié)果后進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，兩樣本率的比較用四格表/配對(duì)卡方檢驗(yàn)，多個(gè)樣本率的比較用行乘列表卡方檢驗(yàn)。 結(jié)果： 1.193例患兒共采集252份標(biāo)本，其中咽拭子188份、糞便53份、皰疹液7份、腦脊液4份，標(biāo)本采集的平均時(shí)間為患病后3.5d;咽拭子標(biāo)本病毒檢出率為75.00%(106/188)，糞便檢出率為81.13%(43/53)，皰疹液標(biāo)本檢出率85.71%(6/7)，腦脊液的檢出率25%(1/4)，本研究表明皰疹液標(biāo)本的病毒檢出率較高。 2.252份臨床診斷的手足口標(biāo)本中，191份為腸道通用病毒陽(yáng)性,其中106份EV71陽(yáng)性，25份CA16陽(yáng)性，60份EV71、CoxA16同時(shí)陽(yáng)性，EV71的陽(yáng)性檢出率顯著高于CA16和混合感染的陽(yáng)性檢出率（x2=63.369，P=0.0000.05)，且CA16單獨(dú)感染較少見(jiàn)，往往伴隨EV71的流行。 3.本研究中對(duì)53份臨床診斷病例進(jìn)行聯(lián)合采樣，咽拭子、糞便、皰疹液和腦脊液不同種組合方式的陽(yáng)性率也有所不同，聯(lián)合采樣的陽(yáng)性率有所提高。 4.本研究中FQ-PCR和RT-PCR兩種方法對(duì)EV71和CA16陽(yáng)性檢出率比較,差異均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2分別為99.2、101.98，P均等于0.0000.05)。 5.本研究中有141份標(biāo)本EV71呈陽(yáng)性或CA16呈陽(yáng)性或他們同時(shí)陽(yáng)性(總的陽(yáng)性檢出率為75.00%)，但病毒核酸的陽(yáng)性檢出率在不同時(shí)間階段的差異，顯示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 1.EV71和CA16是2011年度本地區(qū)HFMD流行的主要致病病毒。 2.亳州地區(qū)2011年手足口感染以EV71為主，且CA16的感染往往伴隨EV71的流行。 3.本次手足口病流行，EV71陽(yáng)性患兒和CA16陽(yáng)性患兒的癥狀均較輕，臨床表現(xiàn)相似，臨床難以區(qū)別。 4.所采集的HFMD患者的臨床標(biāo)本中，皰疹液標(biāo)本的病毒檢出率較高，糞便、咽拭子標(biāo)本次之，腦脊液最低，但檢出率的比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=6.888，P=0.0760.05)。 5.本研究中RT-PCR和FQ-PCR兩種方法的陽(yáng)性檢出率比較，有顯著性差異。FQ-PCR檢測(cè)靈敏度較高，且能檢測(cè)到病毒具體的拷貝數(shù)，可用于本HFMD病原的早期診斷，而RT-PCR更適用于疫區(qū)大規(guī)模的早期常規(guī)檢查。
【關(guān)鍵詞】：手足口病 腸道病毒71 柯薩奇病毒16 RT-PCR 熒光定量PCR
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R725.1
【目錄】：

• 中文摘要7-10
• Abstract10-14
• 前言14-17
• 材料與方法17-26
• 結(jié)果26-30
• 討論30-37
• 結(jié)論37-38
• 結(jié)束語(yǔ)38-39
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 附錄44-45
• 致謝45-46
• 綜述46-62
• 參考文獻(xiàn)56-62

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 周世力,楊帆,金奇;腸道病毒71型的研究進(jìn)展[J];病毒學(xué)報(bào);2003年03期

2 齊斌;趙靜靜;高雷;朱平;;基于RSCU方法的EV71病毒VP1核酸序列的同義密碼子的偏好性分析[J];病毒學(xué)報(bào);2009年06期

3 李華;邵聰文;潘s

本文編號(hào)：922275