本文關(guān)鍵詞：可注射型骺板細胞外基質(zhì)源性骺板軟骨水凝膠的制作及特性研究

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【摘要】：兒童骺板損傷是臨床常見疾病之一，常引起患兒肢體短縮及內(nèi)翻或外翻畸形。目前，，臨床上通過骨橋切除、自體脂肪填塞等方法治療兒童骺板小于35%的損傷面積獲得一定療效，但對于超過50%的大面積損傷，由于植入物僅起到填塞作用，沒有生長能力，療效欠佳。近年來，骺軟骨組織工程為兒童骺板損傷的修復(fù)帶來了新的希望，但迄今為止，組織工程材料如膠原凝膠、明膠海綿、瓊脂糖、殼聚糖、脫鈣骨基質(zhì)等盡管能為種子細胞提供三維空間環(huán)境，卻無法提供類似細胞外基質(zhì)的微環(huán)境，使種子細胞的生長及增殖受到影響，分泌Ⅱ型膠原和糖胺聚糖等細胞外基質(zhì)的能力明顯下降。而支架材料當中，可注射性支架材料因其創(chuàng)傷小、可塑性強而逐漸顯示出其獨特的優(yōu)越性。但通常使用的凝膠類可注射性支架材料，細胞外軟骨基質(zhì)成分有限，不能充分滿足骺板軟骨特有的生理要求，而且與固態(tài)支架相比，缺乏良好的細胞貼附條件。本實驗正是以此為出發(fā)點，選取藻酸鈣(ALG)和骺板軟骨細胞外基質(zhì)(CACECM)以及葡萄糖酸鈣復(fù)合物作為可注射型水凝膠，將CACECM三維支架的充分貼附性以及藻酸鈣凝膠的良好可塑性兩大優(yōu)勢相結(jié)合，然后與骺板軟骨細胞混合后行體外培養(yǎng)，達到修復(fù)骺板軟骨損傷的目的。 目的分離提取天然骺板細胞外基質(zhì)，應(yīng)用脫細胞骺軟骨細胞外基質(zhì)與藻酸鈣結(jié)合作為可注射型水凝膠材料，構(gòu)建良好可塑性和生物特性的組織工程化骺軟骨，并對其理化性質(zhì)及生物相容性進行檢測。 方法(1)提取天然胎牛脛骨近端及股骨遠端的骺板軟骨組織并用超濕法進行碎粉；通過有機溶劑及差速離心等方法獲得骺板軟骨細胞外基質(zhì)（CACECM），復(fù)合藻酸鈣（加10%葡萄糖酸鈣）制備成可注射性水凝膠材料，行DNA及GAG定量檢測。（2）再與體外擴增的2周齡新西蘭白兔第二代骺軟骨細胞復(fù)合后進行體外培養(yǎng)后行組織學(xué)檢測，觀察細胞的生長增殖情況。并植于實驗兔背部脊柱兩旁皮下，8周后取材進行形態(tài)學(xué)觀察及組織學(xué)檢測，觀察可注射性水凝膠材料生物相容性和降解性。 結(jié)果（1）獲得的骺板細胞外基質(zhì)微絲中含有大量Ⅱ型膠原及糖胺聚糖等細胞外基質(zhì)成份。制備的可注射型水凝膠材料有較好的生物性能。（2）培養(yǎng)出的組織工程化骺軟骨組織細胞生長良好，具有分泌軟骨基質(zhì)功能；可注射性水凝膠材料具有良好的生物相容性和可降解性。 結(jié)論本實驗將異體脫細胞骺軟骨細胞外基質(zhì)與藻酸鈣及葡萄糖酸鈣結(jié)合，可以作為良好的可注射型水凝膠材料應(yīng)用于組織工程化骺軟骨的構(gòu)建。
【關(guān)鍵詞】：細胞外基質(zhì)（ECM） 骺板細胞 藻酸鈣 可注射型骺軟骨水凝膠
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R726.8
【目錄】：

• 目錄4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-13
• 參考文獻11-13
• 實驗一 可注射型骺板軟骨水凝膠的制作及及性能評估13-19
• 材料及方法13-16
• 實驗結(jié)果16
• 討論16-18
• 結(jié)論18-19
• 實驗二 可注射型的骺板軟骨水凝膠的生物相容性研究19-26
• 材料及方法19-22
• 實驗結(jié)果22-24
• 討論24-25
• 結(jié)論25-26
• 參考文獻26-32
• 文獻綜述32-40
• 參考文獻36-40
• 附圖40-52
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章52-53
• 致謝53-55

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 黃靖香,張文濤,周勇剛,陸寧,孫明學(xué),趙斌,盧世璧;種子細胞庫的建立及應(yīng)用[J];骨與關(guān)節(jié)損傷雜志;2003年04期

本文編號：912129