發(fā)布時間：2017-09-22 19:49

  本文關(guān)鍵詞：氫氣對氧化損傷腸上皮細胞的保護作用及機制的研究

  更多相關(guān)文章： 氫氣 Nrf2-ARE信號通路 氧化應(yīng)激反應(yīng) 抗氧化 新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎

【摘要】：目的探討氫氣對氧化損傷腸上皮細胞的保護作用及其分子機制,旨為臨床上新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎(NEC)的防治提供可能的治療靶點。方法以人和大鼠腸上皮細胞Caco-2細胞株與IEC-6細胞株為研究對象,根據(jù)是否采用抗霉素A和氫氣處理,將上述細胞分為3組:抗霉素A(-)/H2(-);抗霉素A(+)/H2(-);抗霉素A(+)/H2(+),分別為對照組(antimycin A 0μg/ml,H2 0mM)、抗霉素A組(antimycinA 30μg/ml,H2 0mM)及氫氣組(antimycinA 30μg/ml,H2 0.6mM)。利用Western Blot、Real-time PCR、流式細胞儀、酶聯(lián)免疫吸附法實驗(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)等研究方法檢測各組以下指標:(1)氧自由基(O2-?、H2O2和?OH)水平;(2)線粒體膜電位;(3)氧化代謝產(chǎn)物丙二醛(MDA)和8-羥基鳥嘌呤(8-OH-G);(4)細胞凋亡率和乳酸脫氫酶(LDH)活性;(5)促炎癥因子(IL-6、TNF-α、IL-1β)、抗炎癥因子(IL-10)、轉(zhuǎn)錄因子核因子-E2相關(guān)因子2(Nrf2)及其下游靶基因(HO-1、SOD、Cat、GPx)表達;(6)磷酸化Nrf2蛋白表達。結(jié)果與抗霉素A組比較,氫氣可以顯著降低由抗霉素A誘導(dǎo)的氧化損傷,表現(xiàn)為降低細胞內(nèi)氧自由基水平(O2-?、H2O2和?OH分別為抗霉素A組的0.236倍、0.456倍和0.124倍),使線粒體膜電位升高,顯著降低細胞內(nèi)氧化代謝產(chǎn)物的含量,而且降低細胞的凋亡率(對照組、抗霉素A組、氫氣組細胞凋亡率分別為5.8%、60.1±5.89%、23.7±3.48%)及乳酸脫氫酶(LDH)活性。另外,氫氣處理可以降低甲萘醌和Fenton反應(yīng)誘導(dǎo)的腸上皮細胞的凋亡率及乳酸脫氫酶活性。最后,氫氣處理可以增加轉(zhuǎn)錄因子Nrf2磷酸化水平,并且氫氣組中炎癥因子的含量較抗霉素A組顯著下降。在抗霉素A組中,Nrf2下游基因HO-1,SOD,Cat,GPx的表達都有所升高,而氫氣的處理使轉(zhuǎn)錄因子Nrf2下游靶基因表達顯著增強。結(jié)論氫氣能夠降低抗霉素A誘導(dǎo)的腸上皮細胞的氧化損傷,表現(xiàn)為降低了細胞內(nèi)活性自由基含量,修復(fù)線粒體膜電位,降低氧化代謝產(chǎn)物,抑制細胞凋亡并降低細胞內(nèi)乳酸脫氫酶活性。氫氣的這一保護作用可能是通過調(diào)控Nrf2-ARE信號通路實現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：氫氣 Nrf2-ARE信號通路 氧化應(yīng)激反應(yīng) 抗氧化 新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R722.1
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 全文縮略語中英文對照10-11
• 第一部分 氫氣對腸上皮細胞受氧化應(yīng)激后生成氧化代謝產(chǎn)物的影響以及對細胞凋亡和活性的作用11-28
• 前言11-13
• 實驗材料與方法13-17
• 實驗結(jié)果17-27
• 結(jié)論27-28
• 第二部分 氫氣對腸上皮細胞內(nèi)Nrf2-ARE信號通路的調(diào)控28-47
• 前言28-30
• 實驗材料和方法30-39
• 實驗結(jié)果39-46
• 結(jié)論46-47
• 第三部分 討論47-50
• 參考文獻50-54
• 附錄：綜述54-64
• 參考文獻59-64
• 致謝64-66
• 在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文66

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉力,莊志雄,馬澗泉;DNA氧化損傷的修復(fù)及其與致癌的關(guān)系[J];中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志;1999年03期

2 楊冬梅,于濤,陶恒沂;細胞外超氧化物歧化酶在有關(guān)氧化損傷疾病中的作用[J];中華航海醫(yī)學(xué)與高氣壓醫(yī)學(xué)雜志;2005年03期

3 農(nóng)清清;藍勇波;竹內(nèi)亨;張志勇;何敏;;不同方法檢測微囊藻毒素-LR致DNA氧化損傷[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2008年09期

4 葛一蒙;;淺談幾種中藥對肝氧化損傷的保護作用[J];黑龍江科技信息;2013年02期

5 黃碧霞;阮迪云;林淑欽;陳樹喻;施麗君;;鉛致氧化損傷中的鋅代謝變化[J];微量元素;1991年01期

6 鐘進義,孫豐運,張燕濱;硒對DNA氧化損傷的防護作用研究[J];中國公共衛(wèi)生;1997年09期

7 宮蕓蕓;氧化損傷與癌癥的發(fā)生和預(yù)防[J];國外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊);2000年01期

8 朱茂祥,楊陟華,龔詒芬,陸穎,曹珍山;輻射誘發(fā)細胞內(nèi)活性氧增高與DNA氧化損傷研究[J];輻射研究與輻射工藝學(xué)報;2001年04期

9 井軍虎;李立宇;;氧化損傷在慢性阻塞性肺疾病中的作用機制研究進展[J];實用心腦肺血管病雜志;2010年12期

10 柳虎軍;王曉輝;羅石猛;;線粒體與氧化損傷[J];疾病監(jiān)測與控制;2013年11期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳芝蘭;呂美玲;莊國強;汪海林;;對氧化損傷敏感的細菌傳感器的研究[A];中國化學(xué)會第27屆學(xué)術(shù)年會第02分會場摘要集[C];2010年

2 李蕓;羅云敬;王云海;鐘儒剛;;過亞硝酸根對DNA氧化損傷及其抑制作用研究[A];第二屆全國環(huán)境化學(xué)學(xué)術(shù)報告會論文集[C];2004年

3 孫鮮策;樸豐源;劉爽;;抗壞血酸對染砷小鼠肝臟氧化損傷拮抗作用[A];中國環(huán)境誘變劑學(xué)會第14屆學(xué)術(shù)交流會議論文集[C];2009年

4 黃琰霞;牛膺筠;吳松兆;宋麗莉;尤怡;魏曉月;王永淑;;人視網(wǎng)膜色素上皮細胞氧化損傷線粒體機制的探討[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2007年

5 倪文慶;黃越;王宵玲;張競文;吳庫生;;電子垃圾拆解區(qū)新生兒多種重金屬暴露及其DNA氧化損傷[A];中國毒理學(xué)會第六屆全國毒理學(xué)大會論文摘要[C];2013年

6 陳昊;吳雄飛;;缺氧、氧化損傷后培養(yǎng)人腎小管上皮細胞能量代謝及細胞骨架改變的實驗研究[A];“中華醫(yī)學(xué)會腎臟病學(xué)分會2004年年會”暨“第二屆全國中青年腎臟病學(xué)術(shù)會議”論文匯編[C];2004年

7 楊捚;洪峰;張愛華;;燃煤氟污染與砷對暴露人群肝功能及氧化損傷交互作用[A];中國毒理學(xué)會第六屆全國毒理學(xué)大會論文摘要[C];2013年

8 霍艷英;段瑞峰;茍巧;胡迎春;李剛;吳德昌;周平坤;;抑癌基因PTEN對細胞內(nèi)氧化損傷防御體系的影響及機制[A];中國毒理學(xué)會第二屆全國中青年學(xué)者科技論壇會議論文集[C];2007年

9 廖偉棠;劉偉;紀e，

本文編號：902737