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柯薩奇B3病毒對(duì)心臟發(fā)育特異性轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5、GATA-4、TBX5的影響及葉酸對(duì)其的保護(hù)作用

發(fā)布時(shí)間:2017-09-19 05:07

  本文關(guān)鍵詞:柯薩奇B3病毒對(duì)心臟發(fā)育特異性轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5、GATA-4、TBX5的影響及葉酸對(duì)其的保護(hù)作用


  更多相關(guān)文章: CVB3 葉酸 NKx2.5 GATA-4 TBX5 先天性心臟病


【摘要】:目的:研究孕期感染柯薩奇B3病毒對(duì)子代心臟發(fā)育及發(fā)育過程中特異性轉(zhuǎn)錄因子NKx2.5、GATA-4、TBX5基因與蛋白表達(dá)的影響,并在此基礎(chǔ)上討論葉酸干預(yù)對(duì)CVB3感染的子代心臟是否有保護(hù)作用。方法:將清潔級(jí)健康的SD雌鼠按隨機(jī)數(shù)字法分為4組:對(duì)照組、葉酸組、柯薩奇B3病毒組及葉酸+柯薩奇B3病毒組。孕前2周葉酸組、葉酸+柯薩奇B3病毒組予以葉酸灌胃,當(dāng)雌鼠懷孕第7d時(shí)柯薩奇B3病毒組、葉酸+柯薩奇B3病毒組給予腹腔注射CVB3,連續(xù)5d。自然分娩后取新生鼠心臟組織,病理切片HE染色觀察新生鼠心臟組織形態(tài)學(xué)變化;用蛋白免疫印跡法(Westernblot)及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測(cè)新生鼠心臟組織中NKx2.5、GATA-4、TBX5因子蛋白及基因表達(dá)。結(jié)果:1.病理切片HE染色顯示與正常對(duì)照組相比,柯薩奇B3病毒組的新生鼠心肌損傷明顯,心肌細(xì)胞排列紊亂,心肌纖維斷裂,葉酸干預(yù)后感染柯薩奇B3病毒的新生鼠心肌損傷狀態(tài)改善。2.柯薩奇B3病毒組的新生鼠心臟組織中NKX2.5、GATA-4、TBX5蛋白表達(dá)及基因表達(dá)明顯低于對(duì)照組,柯薩奇B3病毒組+葉酸組的NKX2.5、GATA-4、TBX5蛋白表達(dá)及基因表達(dá)高于柯薩奇B3病毒組。結(jié)論:CVB3感染造成NKx2.5、GATA-4、TBX5基因及蛋白表達(dá)水平下降在先天性心臟病發(fā)病機(jī)制中起著重要作用。葉酸可逆轉(zhuǎn)CVB3感染造成的NKx2.5、GATA-4、TBX5基因及蛋白水平的低表達(dá),,對(duì)先天性心臟病具有預(yù)防性保護(hù)作用,其機(jī)制可能是通過上游主基因NKx2.5、GATA-4、TBX5調(diào)控促進(jìn)下游基因表達(dá)及減少細(xì)胞凋亡促進(jìn)心臟發(fā)育功能恢復(fù)來起作用。
【關(guān)鍵詞】:CVB3 葉酸 NKx2.5 GATA-4 TBX5 先天性心臟病
【學(xué)位授予單位】:桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R725.4
【目錄】:
  • 中文摘要4-5
  • ABSTRACT5-6
  • 英漢縮略詞對(duì)照表6-7
  • 前言7-9
  • 1 材料與方法9-20
  • 1.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器9-11
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)方法11-20
  • 2 結(jié)果20-26
  • 2.1 各組大鼠一般情況20
  • 2.2 HE 染色光鏡觀察結(jié)果20-22
  • 2.3 RT-PCR 檢測(cè)子代心臟 GATA-4、NKx2.5、TBX5 基因 mRNA 表達(dá)22-23
  • 2.4 Western blot 檢蛋白測(cè) GATA-4、NKx2.5、TBX5 蛋白表達(dá)水平23-26
  • 3 討論26-31
  • 4 結(jié)論31-32
  • 參考文獻(xiàn)32-35
  • 綜述35-47
  • 參考文獻(xiàn)41-47
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄47-48
  • 致謝48

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