本文關(guān)鍵詞：RELMβ對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞血管形成活性的影響及機(jī)制研究

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【摘要】：目的：探討轉(zhuǎn)染RELMβ對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移及血管形成的影響。 方法：采用脂質(zhì)體介導(dǎo)方法，將RELMβ真核表達(dá)載體轉(zhuǎn)染入人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)分組為空白對(duì)照組（Control）、空載體轉(zhuǎn)染組（Vector）及目的質(zhì)粒組（RELMβ），采用MTT（四甲基偶氮唑鹽酶反應(yīng)）比色法、EdU（5-乙炔基-2'脫氧尿嘧啶核苷）摻入法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性，Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移，小管形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)血管生成活性。 結(jié)果：在HUVEC細(xì)胞系中，與空白對(duì)照組相比，空載體轉(zhuǎn)染組細(xì)胞增殖率、細(xì)胞遷移數(shù)目及血管形成能力均無(wú)顯著性差異（P0.05）；MTT比色法顯示RELMβ轉(zhuǎn)染組HUVEC細(xì)胞增殖率下降了48.3%（P0.05）；EdU摻入法顯示：轉(zhuǎn)染RELMβ48h后，HUVEC細(xì)胞增殖率下降了25%（P0.05）；Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：RELMβ轉(zhuǎn)染組穿越細(xì)胞數(shù)目比空白對(duì)照組下降了65%（P0.05）；小管形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：RELMβ轉(zhuǎn)染組細(xì)胞的血管生成能力顯著下降，生成血管的直徑較小且成環(huán)率降低。 結(jié)論：轉(zhuǎn)染RELMβ基因能抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移及血管形成。 目的：探討重組RELMβ蛋白對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移及血管形成的影響。 方法：運(yùn)用重組RELMβ蛋白直接干預(yù)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，，實(shí)驗(yàn)分組為：空白對(duì)照組（Control）、溶劑對(duì)照（BSA）組、重組RELMβ蛋白組（10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml）。采用MTT比色法、EdU摻入法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性，Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移，小管形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)血管生成活性。 結(jié)果：在HUVEC細(xì)胞系中，與空白對(duì)照組相比，BSA組細(xì)胞增殖率、細(xì)胞遷移數(shù)目及血管形成能力均無(wú)顯著性差異（P0.05），而RELMβ組均有不同程度的下降。MTT比色法顯示：10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml RELMβ處理HUVEC細(xì)胞后，細(xì)胞增殖率分別下降8%（P0.05）、19.3%（P0.05）、22.5%（P0.05）；EdU摻入法顯示10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml RELMβ處理組細(xì)胞增殖率分別下降16..4%（P0.05）、23.3%（P0.05）、25.4%（P0.05）；Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml RELMβ處理HUVEC細(xì)胞后，細(xì)胞遷移能力分別下降了13.5%（P0.05）、34.6%（P0.05）、56.5%（P0.05）；小管形成實(shí)驗(yàn)顯示：10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml RELMβ處理組細(xì)胞的血管生成能力顯著下降，生成血管的直徑較小且成環(huán)率明顯降低。 結(jié)論：重組RELMβ蛋白能抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移及血管形成。 目的：探討RELMβ抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移及血管形成的機(jī)制。 方法：運(yùn)用重組RELMβ蛋白直接干預(yù)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)分組為：空白對(duì)照組（Control）、溶劑對(duì)照（BSA）組、重組RELMβ蛋白組（10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml）。采用Werstern blot法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)VEGF的表達(dá)，實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)檢測(cè)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）受體的表達(dá)水平。 結(jié)果：在HUVEC細(xì)胞系中，與空白對(duì)照組相比，BSA組的VEGF及其受體KDR、FLT-1表達(dá)均無(wú)顯著性差異（P0.05）。10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml RELMβ處理HUVEC細(xì)胞后，Western blot結(jié)果顯示10ng/ml、50ng/ml、100ng/mlRELMβ處理HUVEC細(xì)胞后，VEGF蛋白表達(dá)分別下調(diào)11.8%（P0.05）、41.6%（P0.05）、67.2%（P0.05）；實(shí)時(shí)定量PCR顯示細(xì)胞內(nèi)KDR表達(dá)水平分別顯著升高3.05倍（P0.05）、1.5倍（P0.05）、1.42倍（P0.05），F(xiàn)LT-1表達(dá)水平分別顯著升高4.3倍（P0.05）、1.63倍（P0.05）、1.75倍（P0.05）；。 結(jié)論：RELMβ能下調(diào)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中VEGF的表達(dá)，但上調(diào)VEGF受體KDR和FLT-1的表達(dá)，其表達(dá)調(diào)控機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：抵抗素樣分子β 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 增殖 遷移 血管生成 抵抗素樣分子β 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 增殖 遷移 血管生成 抵抗素樣分子β 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 血管生成
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R725.4
【目錄】：

• 縮略詞表5-7
• 研究背景7-12
• 參考文獻(xiàn)10-12
• 中文摘要12-15
• Abstract15-18
• 第一部分 轉(zhuǎn)染 RELMΒ對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞血管形成活性的影響18-32
• 實(shí)驗(yàn)材料18-19
• 實(shí)驗(yàn)方法19-24
• 結(jié)果24-28
• 討論28-30
• 參考文獻(xiàn)30-32
• 第二部分 重組 RELMΒ蛋白對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞血管形成活性的影響32-44
• 實(shí)驗(yàn)材料32-33
• 實(shí)驗(yàn)方法33-37
• 結(jié)果37-41
• 討論41-43
• 參考文獻(xiàn)43-44
• 第三部分 RELMΒ抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞血管生成的分子機(jī)制研究44-58
• 實(shí)驗(yàn)材料44-47
• 實(shí)驗(yàn)方法47-52
• 結(jié)果52-54
• 討論54-57
• 參考文獻(xiàn)57-58
• 研究小結(jié)58-59
• 綜述59-69
• 參考文獻(xiàn)65-69
• 參與課題情況69-70
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文目錄70-71
• 致謝71-72

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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8 劉灝;巨噬細(xì)胞再極化[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

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10 孫麗瑩;人體小腸微生態(tài)研究及肝移植受者腸道微生態(tài)研究[D];南開(kāi)大學(xué);2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 吳丹;人源性乳腺微環(huán)境小鼠模型的移植物功能研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

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4 馮穩(wěn);腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞與食管鱗癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及脈管生成的關(guān)系研究[D];鄭州大學(xué);2012年

5 王素梅;RELMβ在大鼠COPD模型肺組織的表達(dá)及與IL-8、IL-10和TNF-α的相關(guān)性[D];暨南大學(xué);2013年

6 周俊峰;抵抗素樣分子β在胃癌中的表達(dá)及其意義[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

7 任旭升;TAM、VEGF在外周T細(xì)胞淋巴瘤非特指型中表達(dá)與預(yù)后的相關(guān)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

8 章小霞;抗人死亡受體5單鏈抗體誘導(dǎo)結(jié)腸癌sw480細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

9 薛平燕;腸道菌群與非酒精性脂肪性肝病的關(guān)系[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2013年

10 王文婷;RS4型甘薯抗性淀粉對(duì)高脂飲食C57BL/6J小鼠血脂和腸道的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

本文編號(hào)：870515