本文關(guān)鍵詞：腸道病毒71感染人腸道上皮細(xì)胞所致宿主細(xì)胞反應(yīng)的研究

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【摘要】：腸道病毒71型(enterovirus 71, EV71)屬于小核糖核酸病毒科、腸道病毒屬的單股正鏈無(wú)包膜RNA病毒。臨床上可以引起嬰幼兒手足口病和嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)疾病,目前其致病機(jī)制還不清楚,有待于更深一步的研究。研究報(bào)道人腸道上皮是EV71的起始復(fù)制位點(diǎn),但臨床上常無(wú)消化道癥狀或者癥狀輕微,可能是EV71在腸道上皮細(xì)胞中有獨(dú)特的免疫應(yīng)答機(jī)制。然而幾乎沒有這方面的相關(guān)研究和報(bào)道。本次研究中,我們證明EV71能感染人腸道上皮細(xì)胞HT29,并且觀察到被感染的細(xì)胞有明顯的細(xì)胞病變反應(yīng)(cytopathic effects, CPEs)。我們發(fā)現(xiàn),在EV71感染人腸道上皮細(xì)胞后,TLR-7和TLR-8被明顯誘導(dǎo),可能在宿主抗EV71固有免疫應(yīng)答和干擾素p的誘導(dǎo)中起關(guān)鍵作用；炎性細(xì)胞因子IL-6, CCL5和IP10被顯著上調(diào),可能在宿主炎癥反應(yīng)中起重要作用。我們檢測(cè)到在EV71感染的HT29細(xì)胞中,caspase-8和caspase-9都被激活,并且伴隨著線粒體細(xì)胞色素C的釋放和caspase-3的激活。這表明腸道上皮細(xì)胞的凋亡可能是經(jīng)由死亡受體介導(dǎo)的外源性凋亡途徑和線粒體介導(dǎo)的內(nèi)源性凋亡途徑雙重激活的；并且內(nèi)源性凋亡通路可能是通過(guò)激活的caspase 8將Bid切割成tBid,而激活內(nèi)源性通路。我們還觀察到,凋亡因子FasL和TNF-α表達(dá)明顯上調(diào),而TRAIL表達(dá)上調(diào)則不明顯,說(shuō)明FasL和TNF-α可能是外源性凋亡途徑的主要啟動(dòng)因子。EV71感染腸道上皮細(xì)胞后,誘導(dǎo)了大量干擾素p的表達(dá)以及ISG54和ISG56的明顯上調(diào),可能是宿主抗病毒的主要因子。而感染EV71后病人消化道癥狀輕微可能是由于足量的干擾素被誘導(dǎo)、引起局部抗病毒應(yīng)答的結(jié)果。在部分病人中癥狀嚴(yán)重,且中樞神經(jīng)系統(tǒng)累及,則可能是因?yàn)檫@些病人由于免疫系統(tǒng)發(fā)育不成熟或遺傳差異,而不能在腸道局部有效誘導(dǎo)干擾素表達(dá),因而不能刺激抗病毒應(yīng)答,結(jié)果導(dǎo)致病毒向中樞神經(jīng)系統(tǒng)擴(kuò)散。本研究首次證明人腸道上皮細(xì)胞對(duì)EV71的宿主抗病毒免疫不同于其他組織細(xì)胞,這也可能是腸道癥狀輕微的原因之一。本研究結(jié)論將加深我們對(duì)EV71感染的致病機(jī)制和宿主防御機(jī)制的認(rèn)識(shí)和理解。
【關(guān)鍵詞】：腸道病毒71型 EV71 腸道上皮細(xì)胞 細(xì)胞凋亡 固有免疫
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R725.1
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 第一章 腸道病毒71的系統(tǒng)進(jìn)化分析11-22
• 前言11-14
• 實(shí)驗(yàn)方法14-15
• 結(jié)果與分析15-21
• 討論21-22
• 第二章 腸道病毒71感染人腸道上皮細(xì)胞所致宿主細(xì)胞反應(yīng)的研究22-43
• 前言22-25
• 實(shí)驗(yàn)材料與方法25-30
• 結(jié)果與分析30-40
• 討論40-43
• 論文綜述 腸道病毒71感染引起宿主固有免疫應(yīng)答的研究進(jìn)展43-51
• 參考文獻(xiàn)51-57
• 附錄1 PCR中所用引物序列57-59
• 附錄2 中英文全稱及縮寫59-61
• 附錄3 在校期間撰寫及發(fā)表論文61-62
• 致謝62-63

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：869274