腸道菌群多樣性在喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒中的作用研究
本文關(guān)鍵詞:腸道菌群多樣性在喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒中的作用研究
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【摘要】:第一部分PCR-DGGE對(duì)喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒腸道菌群多樣性的作用研究 【目的】運(yùn)用16S rDNAPCR聯(lián)合變性梯度凝膠電泳(Denaturinggel gradient electrophoresis,簡(jiǎn)稱DGGE)探討腸道菌群多樣性變化在喂養(yǎng)不耐受(Feeding Intolerance,簡(jiǎn)稱FI)早產(chǎn)兒中的作用及其與疾病轉(zhuǎn)歸的關(guān)系。 【方法】隨機(jī)選取重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院2012年4月~2013年4月發(fā)生喂養(yǎng)不耐受的早產(chǎn)兒為FI組,共20例(其中14例患兒病程中出現(xiàn)一次FI癥狀,6例患兒在病程中反復(fù)出現(xiàn)FI癥狀),按照患兒臨床表現(xiàn)分為3組,其中胃潴留(FIⅠ)5份、腹脹嘔吐(FIⅡ)8份和打亂腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)(FIⅢ)13份,采集其發(fā)生FI24h內(nèi)(t0)及喂養(yǎng)不耐受恢復(fù)后(t1)的糞便。采用16S rDNA PCR-DGGE技術(shù),分別對(duì)20例喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒(FI組)發(fā)生喂養(yǎng)不耐受24小時(shí)內(nèi)(t0)及喂養(yǎng)不耐受恢復(fù)后(t1)的糞便標(biāo)本進(jìn)行菌群多樣性分析,同期采集20例孕周、產(chǎn)重、日齡匹配的喂養(yǎng)耐受早產(chǎn)兒(分別為對(duì)照組CⅠ、CⅡ和CⅢ亞組)糞便標(biāo)本進(jìn)行對(duì)比分析。運(yùn)用quantity one軟件分析DGGE圖譜,得到菌群條帶豐富度(S)和香農(nóng)威納指數(shù)(H′)。 【結(jié)果】①喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒發(fā)生FI24h內(nèi)(t0)糞便標(biāo)本的條帶豐富度相比對(duì)照組下降,其中Ⅰ組(9.80±4.92vs19.20±2.95,P<0.05),Ⅱ組(9.37±3.46vs15.00±3.82,P<0.05),Ⅲ組(10.69±3.04vs15±3.27,P<0.05);②喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒發(fā)生FI24h內(nèi)(t0)糞便標(biāo)本的香農(nóng)威納指數(shù)(H′)相比對(duì)照組下降,其中Ⅰ組(2.16±0.51vs2.90±0.16,P<0.05),Ⅱ組(2.14±0.42vs2.65±0.27,P<0.05),Ⅲ組(2.27±0.35vs2.61±0.25,P<0.05);③喂養(yǎng)不耐受病情恢復(fù)后(t1)各組糞便標(biāo)本條帶豐富度、香農(nóng)威納指數(shù)相比對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 【結(jié)論】喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒腸道菌群多樣性降低,隨著病情的恢復(fù),腸道菌群多樣性恢復(fù)。 第二部分T-A克隆測(cè)序探討喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒對(duì)腸道菌群種屬分布的作用 【目的】運(yùn)用T-A克隆測(cè)序分析喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒腸道菌群種屬分布情況及常見優(yōu)勢(shì)菌。 【方法】切割回收DGGE凝膠中所有條帶,對(duì)回收的DNA液進(jìn)行T-A克隆測(cè)序,測(cè)序結(jié)果在NCBI(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast)中比對(duì)分析。 【結(jié)果】FI組與對(duì)照組腸道菌群種屬類別沒有顯著差異,包含有克雷伯菌屬、腸桿菌屬、大腸桿菌屬、鏈球菌屬等九個(gè)屬以及無法培養(yǎng)的細(xì)菌,,其中喂養(yǎng)不耐受組糞便標(biāo)本中克雷伯菌屬(46.82%vs38.66%,P<0.05)、擬桿菌屬較對(duì)照組有升高趨勢(shì),雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬、大腸桿菌屬、腸桿菌屬有減少趨勢(shì)。 【結(jié)論】喂養(yǎng)不耐受的發(fā)生,可能與腸道菌群中益生菌的減少,而克雷伯菌屬比例增加有一定相關(guān)性。
【關(guān)鍵詞】:早產(chǎn)兒 喂養(yǎng)不耐受 腸道菌群 生物多樣性 DGGE
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R722.6
【目錄】:
- 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-6
- 摘要6-9
- ABSTRACT9-12
- 前言12-13
- 第一部分 PCR-DGGE 探討喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒腸道菌群多樣性及其動(dòng)態(tài)變化13-28
- 前言13
- 1 對(duì)象與方法13-21
- 2 結(jié)果21-26
- 3 討論26-27
- 4 小結(jié)27-28
- 第二部分 T-A 克隆測(cè)序探討喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒對(duì)腸道菌群種屬分布的作用28-36
- 前言28
- 1 對(duì)象與方法28-32
- 2 結(jié)果32-34
- 3 討論34-35
- 4 小結(jié)35-36
- 全文總結(jié)36-37
- 參考文獻(xiàn)37-40
- 文獻(xiàn)綜述40-46
- 參考文獻(xiàn)43-46
- 致謝46-47
- 攻讀碩士學(xué)位期間的學(xué)位論文目錄47-48
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條
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本文編號(hào):808122
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