本文關鍵詞：臍血間充質干細胞對大鼠肺動脈高壓的治療作用研究

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【摘要】：肺動脈高壓（pulmonary arterial hypertension，PAH）是一種以肺動脈壓力升高、肺血管損傷、肺小動脈重塑，導致右心室肥厚（right ventricular hypertrophy，RVH），嚴重時造成右心室功能不全，甚至死亡為特點的肺血管疾病[1]。目前，PAH的藥物治療效果尚不理想，部分療效較好的藥物又因價格昂貴或者副作用較大而影響其臨床使用。干細胞移植治療心血管疾病方興未艾，尤其是間充質干細胞（mesenchymalstem cells，MSCs）移植具有獨特的優(yōu)勢，因可分化為血管內皮細胞等多種細胞，并通過旁分泌作用減輕周圍組織的損傷等，有可能成為治療PAH的新手段[2]。 本研究通過腹主動脈-腔靜脈分流法（abdominal aortocaval fistula shunting，A-VF）聯(lián)合單野百合堿（monocrotaline，MCT）注射法建立了可模擬人類左向右分流型先天性心臟病所致嚴重PAH的SD大鼠PAH模型，并采用尾靜脈注射法，將臍血MSCs移植入PAH大鼠，通過觀察血流動力學和組織形態(tài)學等方面評估臍血MSCs治療PAH的效果，以期為臨床上間充質干細胞治療左向右分流型先天性心臟病所致嚴重的PAH提供實驗依據(jù)。 第一部分左向右分流聯(lián)合野百合堿注射所致肺動脈高壓大鼠模型的建立 目的： 建立左向右分流術(A-VF)聯(lián)合單野百合堿注射（monocrotaline, MCT）所致SD大鼠PAH模型，了解該模型肺血管結構的變化。 方法： 將60只健康雄性SD大鼠隨機分為4組：每組15只（n=15），即①正常對照組：不做任何處理；②左向右分流組（abdominal aortocaval fistula shunting，A-VF組）：對大鼠施行腹主動脈－腔靜脈瘺的體內分流術，構建左向右分流型PAH模型；③單野百合堿注射組（MCT組）：一次性于大鼠項背部皮下注射50mg/kg單野百合堿；④左向右分流聯(lián)合單野百合堿注射組（A-VF+MCT組）：對大鼠行A-VF分流術后立即給予50mg/kg MCT皮下注射，建立大鼠PAH模型。術后4周測定大鼠死亡率，并以右心導管法測定平均肺動脈壓(mPAP)。同時檢測右心室肥厚指數(shù)[RVHI=RV/（LV+S）]、中層血管壁橫截面積占血管總橫截面積百分比（MA%）、血管壁中層占血管外徑厚度的百分比（MT%），并且于光鏡、電鏡下觀測肺血管結構的變化。 結果： 1．與對照組相比，A-VF組和MCT組肺動脈平均壓分別升高41%和76%，形態(tài)學觀察顯示該兩組肺小動脈輕至中度狹窄，右心室輕至中度肥厚，組織學觀察發(fā)現(xiàn)肺動脈血管內皮少量壞死、肺部血管輕度纖維化。 2．值得注意的是，我們首次采用的A-VF+MCT聯(lián)合處理組與A-VF或MCT組相比，出現(xiàn)更為明顯的PAH改變，較A-VF或MCT組肺動脈平均壓進一步升高，達到對照組的220%，形態(tài)學觀察顯示肺小動脈明顯狹窄，右心室明顯肥厚，，組織學檢查發(fā)現(xiàn)肺動脈血管內皮細胞大量壞死、脫落，肺血管纖維化明顯增強，肺血管壁新生內膜形成。 結論： 本研究提示，A-VF+MCT聯(lián)合處理可很好地模擬人類嚴重PAH的病理改變，是可靠，穩(wěn)定的模型，并將為后續(xù)研究奠定基礎。 第二部分臍血間充質干細胞移植對大鼠肺動脈高壓的治療作用研究 目的： 基于我們已建立的A-VF+MCT模型，觀察臍血間充質干細胞（mesenchymal stemcells，MSCs）移植對SD大鼠肺動脈高壓(PAH)的治療作用。 方法： 將60只健康雄性SD大鼠隨機分為4組，每組15只（n=15），即①正常對照組：不做任何處理；②模型組：以腹主動脈-腔靜脈瘺分流術(abdominal aortocaval fistulashuning，A-VF)+單野百合堿(monocrotaline，MCT)注射建立大鼠PAH模型，故也可稱為A-VF+MCT組；③干細胞移植組：在建立PAH模型后4周，經尾靜脈注射Hoechst33342熒光染料標記的臍血MSCs，故此組也可稱A-VF+MCT+MSCs組；④培養(yǎng)液對照組：在建立PAH模型后4周，經尾靜脈注射培養(yǎng)臍血MSCs的培養(yǎng)液，故此組也可稱為A-VF+MCT+培養(yǎng)液組。8周后測定mPAP、RVHI、MT%和MA%，檢測血流動力學、肺小動脈重塑情況，并通過熒光顯微鏡觀察臍血MSCs的定植情況。 結果： 與正常對照組比較，4周后A-VF+MCT組大鼠可形成典型的PAH，8周后mPAP進一步增高，動脈中膜明顯增厚，右心室出現(xiàn)明顯肥厚； 熒光顯微鏡觀察顯示臍血MSCs可成功定植到肺血管內膜。且臍血MSCs治療可顯著降低大鼠mPAP、RV/(LV+S)、MT%和MA%（均P0.01），并緩解右心室肥厚。同時PAH大鼠死亡率從66.7%下降到13.3%。 結論： 臍血MSCs移植能顯著降低肺動脈壓力，減輕肺小動脈重塑及右心室肥厚，顯著降低PAH大鼠的死亡率。
【關鍵詞】：肺動脈高壓 臍帶血 間充質干細胞 細胞移植 大鼠
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R725.4
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-14
• 文獻回顧14-27
• 第一部分 肺動脈高壓大鼠模型的建立27-37
• 1 材料27-28
• 2 方法28-32
• 3 結果32-35
• 4 討論35-37
• 第二部分 臍血間充質干細胞移植對大鼠肺動脈高壓的治療作用研究37-45
• 1 材料37-38
• 2 方法38-41
• 3 結果41-43
• 4 討論43-45
• 小結45-46
• 參考文獻46-53
• 個人簡歷和研究成果53-54
• 致謝54

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 朱麗敏;徐卓明;柳立平;孔英;徐志偉;;氣管支氣管軟化對兒童充血型先天性心臟病糾治術后早期恢復的影響[J];上海交通大學學報(醫(yī)學版);2011年09期

2 王曉俠;姚小寶;嵇憲生;李勝利;朱宏亮;樊代明;;攜帶反義熱休克蛋白70抑制人喉癌細胞的生長[J];南方醫(yī)科大學學報;2007年12期

3 張琦;前列腺素E_1治療先天性心臟病合并肺動脈高壓[J];中國藥物與臨床;2005年03期

4 夏偉,趙翠芬,李福海,時慶,楊杰;MMP-1、MMP-3對高動力血流狀態(tài)肺血管重建的影響[J];山東大學學報(醫(yī)學版);2004年06期

5 馬勝軍,劉桂清,馬增山,董銘鋒,柴守棟,張學俊;先天性心臟病伴肺動脈高壓患者血清血管內皮生長因子與肺細小動脈形態(tài)變化的關系[J];中華心血管病雜志;2004年01期

6 徐卓明,蘇肇伉,陳玲,史珍英,周燕萍,徐志偉,丁文祥;小嬰兒危重復雜先天性心臟病的術后治療措施[J];中華小兒外科雜志;2002年05期

7 邢泉生,孫波;PGE_1與NO對先天性心臟病術后肺動脈高壓療效的對比研究[J];中華胸心血管外科雜志;2002年03期

8 齊建光,杜軍保,李簡,湯秀英,魏冰,唐朝樞;左向右分流所致肺動脈高壓大鼠模型的建立及其肺血管結構的變化[J];中華實驗外科雜志;2002年03期

本文編號：764625