本文關(guān)鍵詞：藏紅花素對(duì)正常兒童外周血淋巴細(xì)胞DNA損傷及修復(fù)的影響

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【摘要】：第一部分：藏紅花素對(duì)正常兒童外周血淋巴細(xì)胞DNA損傷的影響 目的探討藏紅花素(crocin)是否對(duì)正常兒童外周血淋巴細(xì)胞DNA有損傷作用。方法無菌條件下用生理鹽水配制crocin、阿糖胞苷(cytarabine,Ara-c)及維生素C(vitamin C, zel C)溶液,分為對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組,對(duì)照組包括空白對(duì)照A組(crocin.0)、陽(yáng)性對(duì)照B組(Ara-c0.25mg/ml)、陰性對(duì)照C組(zel C0.4mg/ml);實(shí)驗(yàn)組為D組,按crocin濃度的不同分為D1(0.625mg/ml)、D2(1.25mg/ml)、D3(2.5mg/ml)、D4(5mg/ml)。Ficoll密度梯度離心法提取正常兒童外周血淋巴細(xì)胞,將提取的淋巴細(xì)胞分別培養(yǎng)于以上各組的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)72小時(shí)后收獲細(xì)胞,單細(xì)胞凝膠電泳觀察淋巴細(xì)胞尾部DNA百分比(tail DNA%,TDNA)、尾矩(tail moment, TM)及尾長(zhǎng)(tail length, XL),姐妹染色單體分化染色法測(cè)定姐妹染色單體交換數(shù)(SCE)。 結(jié)果 (1)淋巴細(xì)胞尾部DNA百分比對(duì)照組A、B、C組分別為(6.14±2.12)%、(12.67±3.36)%、(6.11±2.08)%,B組明顯高于A、C組(p0.05),A組與C組之間無顯著性差異(t=1.012,p0.05)。實(shí)驗(yàn)組D1-D4組分別為(6.15±2.1.4)%、(6.10±2.13)%、(6.13±2.12)%、(11.44±4.17)%,D4組明顯高于Dl-D3組(p0.05),Dl、D2、D3組間無顯著性差異(F=1.642,p0.05),與A組及C組比較亦無顯著性差異(p0.05)。B組明顯高于D1-D3組(p0.05),D4組與B組比較無顯著性差異(t=1.305,p0.05)。 (2)尾矩對(duì)照組A、B、C組分別為1.25±0.46、2.41±0.75、1.28±0.46,B組明顯高于A、C組(p0.05),A組與C組之間無顯著性差異(t=1.412,p0.05)。實(shí)驗(yàn)組D1-D4組分別為1.27±0.47、1.26±0.45、1.25±0.45、2.36±0.77,D4組明顯高于D1-D3組(p0.05),D1、D2、D3組間無顯著性差異(F=1.752,p0.05),與A組及C組比較亦無顯著性差異(p0.05)。B組明顯高于D1-D3組(p0.05),D4組與B組比較無顯著性差異(t=1.215,p0.05)。 (3)尾長(zhǎng)對(duì)照組A、B、C組分別為1.04±0.30、3.47±0.71、1.06±0.39um,B組明顯高于A、C組(p0.05),A組與C組之間無顯著性差異(t=0.912,p0.05)。實(shí)驗(yàn)組D1-D4組分別為1.05±0.34、1.01±0.35、1.03±0.38、3.39±0.77um,D4組明顯高于Dl-D3組(p0.05), D1、 D2、D3組間無顯著性差異(F=2.012,p0.05),與A組及C組比較亦無顯著性差異(p0.05)。B組明顯高于Dl-D3組(p0.05),D4組與B組比較無顯著性差異(t=1.105,p0.05)。 (4)姐妹染色單體交換數(shù)對(duì)照組A、B、C組分別為1.96±1.27、4.00±2.23、2.17±1.20,B組明顯高于A、C組(p0.05),A組與C組之間無顯著性差異(t=1.412,p0.05)。實(shí)驗(yàn)組D1-D4組分別為1.84±1.29、1.97±1.11、1.93±1.15、3.93±1.95,D4組明顯高于Dl-D3組(p0.05),D1、D2、D3組間無顯著性差異(F=1.732,p0.05),與A組及C組比較亦無顯著性差異(p0.05)。B組明顯高于D1-D3組(p0.05),D4組與B組比較無顯著性差異(t=2.005,P0.05)。 結(jié)論1.當(dāng)crocin濃度為0.625～2.5mg/ml時(shí),淋巴細(xì)胞尾部DNA百分比、尾矩、尾長(zhǎng)及組妹染色單體交換數(shù)與空白對(duì)照組(A)及陰性對(duì)照組(C)無顯著性差異,提示該范圍內(nèi)crocin對(duì)正常兒童外周血淋巴細(xì)胞DNA無損傷作用：2.當(dāng)crocin濃度為5mg/ml時(shí),淋巴細(xì)胞尾部DNA百分比、尾矩、尾長(zhǎng)及姐妹染色單體交換數(shù)均明顯高于空白對(duì)照組(A)及陰性對(duì)照組(C),提示該濃度crocin對(duì)正常兒童外周血淋巴細(xì)胞DNA有損傷作用。第二部分：藏紅花素對(duì)正常兒童外周血淋巴細(xì)胞DNA損傷后修復(fù)韻研究 目的探討藏紅花素(crocin)對(duì)阿糖胞苷(cytarabine, Ara-c)損傷后的淋巴細(xì)胞有無DNA修復(fù)作用。 方法無菌條件下用生理鹽水配制crocin、阿糖胞苷(cytarabine, Ara-c)及維生素C(vitamin C, zel C)溶液,分A-E組：A組(crocin2.5mg/ml)、B組(crocin2.5mg/ml+Ara-c0.25mg/ml)、C組(zel C0.4mg/ml)、D組(Ara-c0.25mg/ml)、E組(zel C0.4mg/ml+Ara-c0.25mg/ml)。Ficoll密度梯度離心法提取正常兒童外周血淋巴細(xì)胞,將提取的淋巴細(xì)胞分別培養(yǎng)于以上各組的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)72小時(shí)后分別收獲細(xì)胞,行單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)觀察淋巴細(xì)胞尾部DNA百分比(tail DNA%, TDNA).尾矩(tail moment, TM)、尾長(zhǎng)(tail length,TL),行姐妹染色單體分化染色法測(cè)定姐妹染色單體交換數(shù)(SCE)。 結(jié)果 (1)淋巴細(xì)胞尾部DNA百分比A-E組分別為(6.13±2.12)%、(6.15±2.14)%、(6.10±2.13)%、(12.67±3.36)%、(6.14±2.14)%,各組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=12.518,p0.05)。A-C組及E組均明顯低于D組(p均0.05),而B組與E組比較,無顯著性差異(p0.05)； (2)尾矩A-E組分別為1.25±0.46、1.28±0.45、1.24±0.45、2.41±0.75、1.22±0.45,各組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=16.237,p0.05)。A-C組及E組均明顯低于D組(p均0.05),而B組與E組比較,無顯著性差異(p0.05)； (3)尾長(zhǎng)A-E組分別為1.03±0.38、1.08±0.36、1.04±0.30、3.47±0.71、1.09±0.38umm,各組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=11.971,p0.05)。A-C組及E組均明顯低于D組(p均0.05),而B組與E組比較,無顯著性差異(p0.05)； (4)姐妹染色單體交換數(shù)A-E組分別為1.93±1.15、2.33±1.41、2.17±1.20、4.00±2.23、2.21±1.39,各組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=18.117,p0.05)。A-C組及E組均明顯低于D組(p均0.05),而B組與E組比較,無顯著性差異(p0.05)； 結(jié)論0.25mg/ml Ara-c可造成淋巴細(xì)胞DNA損傷,而2.5mg/ml crocin與Ara-C共同作用于淋巴細(xì)胞時(shí),淋巴細(xì)胞尾部DNA百分比、尾矩、尾長(zhǎng)及姐妹染色單體交換數(shù)均較Ara-c單獨(dú)培養(yǎng)時(shí)降低,提示該濃度crocin寸Ara-c損傷后的淋巴細(xì)胞存在DNA修復(fù)作用。
【關(guān)鍵詞】：藏紅花素 阿糖胞苷 維生素C 單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn) 姐妹染色單體分化染色法 藏紅花素 阿糖胞苷 維生素C 單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn) 姐妹染色單體分化染色法
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R285;R272
【目錄】：

• 摘要2-6
• Abstract6-12
• 縮略詞索引表12-13
• 第一部分：藏紅花素對(duì)正常兒童外周血淋巴細(xì)胞DNA損傷的影響13-24
• 引言13
• 第一章 材料與方法13-16
• 1.1 材料13-14
• 1.2 方法14-16
• 第二章 結(jié)果16-20
• 2.1 單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果16-17
• 2.2 姐妹染色單體分化染色法結(jié)果17-20
• 第三章 討論20-22
• 第四章 結(jié)論22
• 參考文獻(xiàn)22-24
• 第二部分：藏紅花素對(duì)正常兒童外周血淋巴細(xì)胞DNA損傷后修復(fù)的研究24-33
• 引言24
• 第一章 材料與方法24-26
• 1.1 材料24-25
• 1.2 方法25-26
• 第二章 結(jié)果26-30
• 2.1 單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果26
• 2.2 姐妹染色單體分化染色法結(jié)果26-30
• 第三章 討論30-31
• 第四章 結(jié)論31
• 參考文獻(xiàn)31-33
• 綜述33-41
• 綜述參考文獻(xiàn)39-41
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果41-42
• 致謝42-43

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：750124