發(fā)布時間：2017-08-26 21:38

  本文關鍵詞：γ-氨基丁酸A受體α1和γ2亞單位調質對未成熟鼠反復驚厥發(fā)作的遠期作用

  更多相關文章： 未成熟鼠 驚厥 GABA(A)受體 α1和γ2亞單位 調質 氯硝西泮 氟馬西尼

【摘要】：目的：探討γ-氨基丁酸A受體（GABA(A)受體）調質（激動劑氯硝西泮(CZP)與拮抗劑氟馬西尼(FMZ)）對未成熟鼠反復驚厥(Recurrent seizures，RS)發(fā)作后，海馬內GABA(A)受體α1和γ2亞單位的表達變化及其遠期神經行為學影響，以了解GABA(A)受體調質在未成熟鼠驚厥腦損傷中的干預作用及其意義。 方法：出生5d（Postnatal day5，用P5表示，下同）的健康Waster大鼠160只，隨機分為五組：正常對照組（CONT組，n=32）、驚厥組（RS組，n=32）、驚厥后生理鹽水干預組（NS干預組，n=32）、驚厥后氯硝西泮干預組（CZP干預組，n=32），驚厥后氟馬西尼干預組（FMZ干預組，n=32）。除CONT組外其余四組驚厥動物模型為每日反復吸入三氟乙醚誘導大鼠驚厥發(fā)作5次，每兩次間隔時間2h，連續(xù)5d；CONT組大鼠進行同樣的操作但不吸入三氟乙醚。CZP干預組和FMZ干預組大鼠于驚厥結束后１d起分別給予氯硝西泮6.0mg/(kg·d)、氟馬西尼1.0mg/(kg·d)干預，連續(xù)5d；NS干預組大鼠于驚厥結束后１d起給予等量生理鹽水灌胃干預，連續(xù)5d。在不同的時間通過負趨地性、前肢懸掛、平面翻正、懸崖回避實驗、曠場實驗、平衡木實驗以及Morris水迷宮實驗等進行評價其神經行為情況；并將各組大鼠分別于末次干預后當天（即P15）及20d（即P35）、55d（即P70）留取海馬組織，采用免疫印跡技術及熒光定量RT-PCR法分別測定大鼠海馬GABA(A)受體α1和γ2亞單位的表達。 結果：1、神經行為學檢測結果：（1）懸崖回避實驗：RS組及NS干預組大鼠從木板邊緣退回或轉身所需的時間較CONT組均明顯延長(P0.05)；CZP干預組大鼠從木板邊緣退回或轉身所需的時間較NS干預組均明顯延長(P0.05)；FMZ干預組大鼠從木板邊緣退回或轉身所需的時間較NS干預組無顯著性差異(P0.05)；（2）負趨地性實驗：RS組及NS干預組大鼠倒轉180°所需時間較CONT組明顯延長(P0.05)。CZP干預組大鼠倒轉180°所需時間較NS干預組均明顯延長(P0.05)；FMZ干預組大鼠倒轉180°所需時間較NS干預組明比較無顯著性差異(P0.05)；（3）曠場試驗表明，中央格停留時間CZP干預組大鼠較NS干預組均明顯延長(P0.05)；中央格停留時間FMZ干預組大鼠較NS干預組無顯著性差異；跨越方格數(shù)CZP干預組大鼠較NS干預組均顯著減少(P0.01)�？缭椒礁駭�(shù)FMZ干預組大鼠較NS干預組無顯著性差異(P0.05)；（4）平衡木試驗提示，RS組及NS干預組大鼠平均評分均明顯低于CONT組（P 0.05），CZP干預組大鼠較NS干預組評分均明顯降低(P 0.05)。FMZ干預組大鼠較NS干預組評分無顯著性差異(P0.05)。 2、學習記憶能力（Morris水迷宮檢測結果）：（1）登臺潛伏期：經過連續(xù)5天（P61-P65）定位航行試驗，五組鼠的逃避潛伏期均呈逐漸縮短的趨勢。試驗第3d和4d，RS組和NS干預組大鼠尋找平臺的時間明顯長于CONT組(P0.05)；CZP干預組大鼠尋找平臺的時間明顯長于NS干預組(P0.05)；第5d時RS組和NS干預組大鼠尋找平臺的時間均顯著長于CONT組(P0.01)；CZP干預組大鼠尋找平臺時間顯著長于NS干預組(P0.01)；FMZ干預組大鼠尋找平臺時間與NS干預組相比較無顯著性差異（P0.05）。（2）搜尋策略：CONT組大鼠多采用直線和趨向式策略，而RS組、NS干預組、CZP干預組和FMZ干預組大鼠則多以邊緣式和隨機式為主。（3）穿越平臺次數(shù)：RS組和NS干預組大鼠60s內穿越平臺次數(shù)較CONT組均明顯減少(P0.05)；CZP干預組大鼠60s內穿越平臺次數(shù)較NS干預組均明顯減少(P0.05)。FMZ干預組大鼠60s內穿越平臺次數(shù)與NS干預組相比較無顯著性差異（P0.05）。 3、Western blot檢測結果：隨著大鼠日齡的增長，五組大鼠海馬內GABA(A)受體α1和γ2亞單位的蛋白表達水平均逐漸升高。末次干預后當天（即P15），CZP干預組大鼠GABA(A)受體α1亞單位蛋白表達水平與NS干預組相比較無顯著性差異（P0.05）；CZP干預組大鼠GABA(A)受體γ2亞單位蛋白表達水平與NS干預組相比明顯減少（P0.05）；FMZ干預組大鼠GABA(A)受體α1和γ2亞單位蛋白表達水平與NS干預組相比均略有升高，但無顯著性差異（P0.05）；末次干預后20d（即P35），CZP干預組大鼠GABA(A)受體α1和γ2亞單位蛋白表達水平與NS干預組相比較均明顯減少（P0.05）；FMZ干預組GABA(A)受體α1和γ2亞單位蛋白表達水平與NS干預組相比較無顯著性差異（P0.05）；末次干預后55d（即P70），CZP干預組大鼠GABA(A)受體α1和γ2亞單位蛋白表達水平與NS干預組相比較均明顯減少（P0.05）。FMZ干預組大鼠GABA(A)受體α1和γ2亞單位蛋白表達水平與NS干預組相比較無顯著性差異（P0.05）。 4、RT-PCR檢測結果：隨著各組大鼠日齡的增長，各組大鼠海馬內GABA(A)受體α1和γ2亞單位mRNA的表達水平逐漸升高。末次干預后當天（即P15）：CZP干預組大鼠GABA(A)受體α1亞單位mRNA在海馬地表達水平與NS干預組相比較明顯減少（P0.01）；CZP干預組大鼠GABA(A)受體γ2亞單位mRNA在海馬地表達水平與NS干預組相比無顯著性差異（P0.05）；FMZ干預組大鼠GABA(A)受體α1和γ2亞單位mRNA在海馬的表達水平與NS干預組相比均略有升高，但無顯著性差異（P0.05）；末次干預20天（即P35）：CZP干預組大鼠GABA(A)受體α1和γ2亞單位mRNA在海馬的表達水平與NS干預組相比較明顯減少（P0.05）；FMZ干預組大鼠GABA(A)受體α1和γ2亞單位mRNA在海馬的表達水平與NS干預組相比較無顯著性差異（P0.05）；末次干預后55d（即P70），CZP干預組大鼠GABA(A)受體α1和γ2亞單位mRNA在海馬的表達水平與NS干預組相比較明顯減少（P0.05）。FMZ干預組大鼠GABA(A)受體α1和γ2亞單位mRNA在海馬的表達水平與NS干預組相比較無顯著性差異（P0.05）。 結論：（1）化學致痙劑三氟乙醚可以誘導Waster大鼠反復驚厥，新生期大鼠反復驚厥后給予GABA(A)受體激動劑CZP早期干預，將會對大鼠產生一定程度的腦損害，使大鼠生長發(fā)育落后，神經反射延遲，并產生成年期新環(huán)境適應能力下降，以及遠期學習、記憶能力損害。 （2）未成熟大鼠反復驚厥后給予GABA(A)受體激動劑CZP早期干預，，短期內即明顯影響海馬GABA(A)受體α1和γ2亞單位相關基因的轉錄，且該影響將長期存在，并影響蛋白的表達，這可能對腦發(fā)育期神經功能的發(fā)育產生長期的影響。 （3）未成熟大鼠反復驚厥發(fā)作后給予GABA(A)受體激動劑CZP早期干預，將導致其遠期神經行為學改變和認知損害，也改變了成年期鼠海馬內GABA(A)受體亞單位α1和γ2亞單位的表達，這些亞單位表達的長期改變參與到了成年期大鼠記憶損傷和學習的發(fā)生過程里，對腦功能產生遠期影響。 （4）未成熟鼠反復驚厥發(fā)作后給予GABA(A)受體拮抗劑FMZ早期干預，未見明顯神經行為學及GABA(A)受體α1和γ2亞單位表達的影響，推測可能與“FMZ拮抗作用的發(fā)揮主要體現(xiàn)在已用苯二氮卓類藥物的情況下”有關。
【關鍵詞】：未成熟鼠 驚厥 GABA(A)受體 α1和γ2亞單位 調質 氯硝西泮 氟馬西尼
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R742.1;R720.597
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-12
• 前言12-16
• 實驗流程圖16-17
• 材料與方法17-32
• 結果32-45
• 討論45-54
• 結論54-55
• 參考文獻55-60
• 綜述60-69
• 參考文獻65-69
• 攻讀學位期間公開發(fā)表的論文69-70
• 中英文對照縮略詞表70-71
• 致謝71-72

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據庫 前5條

1 索國玲;唐洪麗;;γ-氨基丁酸A型受體基因變異與癲沲關系的研究進展[J];國際兒科學雜志;2006年03期

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本文編號：743103