本文關鍵詞：先天性巨結(jié)腸相關標志物的研究及臨床意義

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【摘要】：目的：利用免疫組化和實時熒光定量PCR研究先天性巨結(jié)腸（HD）不同節(jié)段腸壁腸神經(jīng)系統(tǒng)（ENS）、平滑肌、腸間質(zhì)細胞(ICCs)、組織蛋白酶D（CAD）及層粘連蛋白（LN）的病理改變及病變范圍，探討HD手術(shù)切除腸管范圍、LN與HD發(fā)病的關系等問題。 方法：以34例手術(shù)切除HD標本為HD組，以11例死于與胃腸道或神經(jīng)系統(tǒng)無關疾病患兒結(jié)腸標本為對照組。分別行腸壁S－100蛋白、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、c－kit蛋白、CAD、LN免疫組化研究，觀察兩組的分布情況，另取HD組標本行LN實時熒光定量PCR，觀察其各段腸壁分布情況，并行統(tǒng)計學處理。 結(jié)果：1.HD組狹窄段、移行段S－100、α-SMA、c-kit陽性表達與對照組相比明顯降低，擴張段上述指標逐漸增加。至擴張段8cm處，三者總體趨于正常。 2.CAD染色觀察到自狹窄段向擴張段成熟神經(jīng)節(jié)細胞逐漸增多，未成熟節(jié)細胞逐漸減少。 3.LN染色面積從狹窄段到正常段依次減弱，差異有統(tǒng)計學意義；LN基因在狹窄段的表達明顯高于正常段，其表達水平由狹窄段向正常段遞減。 結(jié)論：1.HD組ENS、平滑肌和ICCs均存在病變，至擴張段8cm處病變緩解。在患兒結(jié)腸長度允許的情況下，手術(shù)切除范圍應達到或超過此范圍。 2.CAD染色可鑒別成熟與未成熟神經(jīng)節(jié)細胞。 3.HD中LN的分布出現(xiàn)異常，，是HD發(fā)病的重要原因。
【關鍵詞】：先天性巨結(jié)腸 腸神經(jīng)系統(tǒng) 腸間質(zhì)細胞 組織蛋白酶D 層粘連蛋白
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R726.5
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 中英文縮略詞表8-9
• 第1章 引言9-11
• 第2章 材料與方法11-19
• 2.1 材料11-13
• 2.1.1 主要試劑11-12
• 2.1.2 試劑配制12
• 2.1.3 主要儀器12-13
• 2.1.4 實驗器具處理13
• 2.2 方法13-14
• 2.2.1 收集臨床資料13
• 2.2.2 標本處理13-14
• 2.3 HE 染色14
• 2.4 免疫組化染色14-16
• 2.5 實時熒光定量 PCR 步驟16-18
• 2.5.1 提取 RNA16
• 2.5.2 RNA 質(zhì)量、濃度檢測16
• 2.5.3 RNA 逆轉(zhuǎn)錄16-17
• 2.5.4 實時熒光定量 PCR 反應17-18
• 2.6 結(jié)果判定18
• 2.7 統(tǒng)計處理18-19
• 第3章 結(jié)果19-25
• 3.1 HE 染色結(jié)果19
• 3.2 免疫組織化學染色結(jié)果19-23
• 3.2.1 S-100 蛋白染色結(jié)果19-20
• 3.2.2 α-SMA 染色結(jié)果20
• 3.2.3 c-Kit 染色結(jié)果20-21
• 3.2.4 組織蛋白酶 D 染色21-22
• 3.2.5 層粘連蛋白染色22-23
• 3.3 實時熒光定量 PCR 結(jié)果23-24
• 3.4 隨訪評分結(jié)果24-25
• 第4章 討論25-32
• 4.1 先天性巨結(jié)腸的診斷25-26
• 4.2 先天性巨結(jié)腸術(shù)后腸功能紊亂的原因探討26-28
• 4.3 HD 病變腸管切除范圍問題28-29
• 4.4 HD 的發(fā)病機制29-32
• 第5章 結(jié)論與展望32-33
• 致謝33-34
• 參考文獻34-38
• 附圖38-43
• 攻讀學位期間的研究成果43-44
• 綜述44-48
• 參考文獻46-48

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 侯豫;楊燁;趙新;仝海霞;王寶西;;膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子在先天性巨結(jié)腸中的表達[J];實用兒科臨床雜志;2008年07期

2 王寶西;侯豫;楊燁;;膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、Cajal間質(zhì)細胞和縫隙連接蛋白43在先天性巨結(jié)腸中的表達分布研究[J];中國循證兒科雜志;2008年05期

本文編號：718446