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先天性巨結(jié)腸相關(guān)標(biāo)志物的研究及臨床意義

發(fā)布時(shí)間:2017-08-22 09:46

  本文關(guān)鍵詞:先天性巨結(jié)腸相關(guān)標(biāo)志物的研究及臨床意義


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【摘要】:目的:利用免疫組化和實(shí)時(shí)熒光定量PCR研究先天性巨結(jié)腸(HD)不同節(jié)段腸壁腸神經(jīng)系統(tǒng)(ENS)、平滑肌、腸間質(zhì)細(xì)胞(ICCs)、組織蛋白酶D(CAD)及層粘連蛋白(LN)的病理改變及病變范圍,探討HD手術(shù)切除腸管范圍、LN與HD發(fā)病的關(guān)系等問(wèn)題。 方法:以34例手術(shù)切除HD標(biāo)本為HD組,以11例死于與胃腸道或神經(jīng)系統(tǒng)無(wú)關(guān)疾病患兒結(jié)腸標(biāo)本為對(duì)照組。分別行腸壁S-100蛋白、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、c-kit蛋白、CAD、LN免疫組化研究,觀察兩組的分布情況,另取HD組標(biāo)本行LN實(shí)時(shí)熒光定量PCR,觀察其各段腸壁分布情況,并行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)果:1.HD組狹窄段、移行段S-100、α-SMA、c-kit陽(yáng)性表達(dá)與對(duì)照組相比明顯降低,擴(kuò)張段上述指標(biāo)逐漸增加。至擴(kuò)張段8cm處,三者總體趨于正常。 2.CAD染色觀察到自狹窄段向擴(kuò)張段成熟神經(jīng)節(jié)細(xì)胞逐漸增多,未成熟節(jié)細(xì)胞逐漸減少。 3.LN染色面積從狹窄段到正常段依次減弱,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;LN基因在狹窄段的表達(dá)明顯高于正常段,其表達(dá)水平由狹窄段向正常段遞減。 結(jié)論:1.HD組ENS、平滑肌和ICCs均存在病變,至擴(kuò)張段8cm處病變緩解。在患兒結(jié)腸長(zhǎng)度允許的情況下,手術(shù)切除范圍應(yīng)達(dá)到或超過(guò)此范圍。 2.CAD染色可鑒別成熟與未成熟神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。 3.HD中LN的分布出現(xiàn)異常,,是HD發(fā)病的重要原因。
【關(guān)鍵詞】:先天性巨結(jié)腸 腸神經(jīng)系統(tǒng) 腸間質(zhì)細(xì)胞 組織蛋白酶D 層粘連蛋白
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R726.5
【目錄】:
  • 摘要3-4
  • ABSTRACT4-8
  • 中英文縮略詞表8-9
  • 第1章 引言9-11
  • 第2章 材料與方法11-19
  • 2.1 材料11-13
  • 2.1.1 主要試劑11-12
  • 2.1.2 試劑配制12
  • 2.1.3 主要儀器12-13
  • 2.1.4 實(shí)驗(yàn)器具處理13
  • 2.2 方法13-14
  • 2.2.1 收集臨床資料13
  • 2.2.2 標(biāo)本處理13-14
  • 2.3 HE 染色14
  • 2.4 免疫組化染色14-16
  • 2.5 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 步驟16-18
  • 2.5.1 提取 RNA16
  • 2.5.2 RNA 質(zhì)量、濃度檢測(cè)16
  • 2.5.3 RNA 逆轉(zhuǎn)錄16-17
  • 2.5.4 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 反應(yīng)17-18
  • 2.6 結(jié)果判定18
  • 2.7 統(tǒng)計(jì)處理18-19
  • 第3章 結(jié)果19-25
  • 3.1 HE 染色結(jié)果19
  • 3.2 免疫組織化學(xué)染色結(jié)果19-23
  • 3.2.1 S-100 蛋白染色結(jié)果19-20
  • 3.2.2 α-SMA 染色結(jié)果20
  • 3.2.3 c-Kit 染色結(jié)果20-21
  • 3.2.4 組織蛋白酶 D 染色21-22
  • 3.2.5 層粘連蛋白染色22-23
  • 3.3 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 結(jié)果23-24
  • 3.4 隨訪評(píng)分結(jié)果24-25
  • 第4章 討論25-32
  • 4.1 先天性巨結(jié)腸的診斷25-26
  • 4.2 先天性巨結(jié)腸術(shù)后腸功能紊亂的原因探討26-28
  • 4.3 HD 病變腸管切除范圍問(wèn)題28-29
  • 4.4 HD 的發(fā)病機(jī)制29-32
  • 第5章 結(jié)論與展望32-33
  • 致謝33-34
  • 參考文獻(xiàn)34-38
  • 附圖38-43
  • 攻讀學(xué)位期間的研究成果43-44
  • 綜述44-48
  • 參考文獻(xiàn)46-48

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 侯豫;楊燁;趙新;仝海霞;王寶西;;膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子在先天性巨結(jié)腸中的表達(dá)[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2008年07期

2 王寶西;侯豫;楊燁;;膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、Cajal間質(zhì)細(xì)胞和縫隙連接蛋白43在先天性巨結(jié)腸中的表達(dá)分布研究[J];中國(guó)循證兒科雜志;2008年05期



本文編號(hào):718446

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