本文關(guān)鍵詞：靜脈注入膽紅素對(duì)新生大鼠脾IRAK-4及p-JNK蛋白表達(dá)的影響

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【摘要】：目的：建立新生大鼠高膽紅素血癥模型,探討靜脈注入膽紅素對(duì)脾白細(xì)胞介素1受體相關(guān)激酶-4(interleukin-1receptor associated kinase-4, IRAK-4)及磷酸化c-Jun氨基端激酶(phospho-c-Jun N-terminal kinase, p-JNK)蛋白表達(dá)的影響。方法：1.實(shí)驗(yàn)分組：將144只7～8d新生SD大鼠,隨機(jī)分為空白對(duì)照組(Ⅰ)、脂多糖對(duì)照組(Ⅱ)、15mg/kg旦紅素對(duì)照組(Ⅲ)、15mg/kg膽紅素+脂多糖組(Ⅳa)、30mg/kg膽紅素+脂多糖組(Ⅳb)和50mg/kg膽紅素+脂多糖組(Ⅳc),共6組,每組24只,各組又分為2h、5h、24h3個(gè)時(shí)間點(diǎn),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)8只。2.建立新生大鼠高膽紅素血癥模型：(1)乙醚麻醉新生SD大鼠,分別經(jīng)頸靜脈注入不同劑量膽紅素(15mg/kg、30mg/kg和50mg/kg)；空白對(duì)照組和脂多糖對(duì)照組給予生理鹽水0.1m1頸靜脈注入。(2)在頸靜脈注入1h后,空白對(duì)照組和15mg/kg膽紅素對(duì)照組腹腔注入0.05ml生理鹽水；其余各組腹腔注入1mg/kg脂多糖。(3)分別于頸靜脈注入后2h、5h、24h采血,測(cè)血漿膽紅素濃度。(4)采血后取脾臟,制成石蠟切片,采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)脾IRAK-4和p-JNK蛋白的表達(dá)。結(jié)果：1.新生SD大鼠在注入膽紅素后不同時(shí)間,皮膚出現(xiàn)不同程度的黃染,30～40分鐘黃染達(dá)高峰,1h后皮膚黃染逐漸消退。在膽紅素注入1h時(shí),15mg/kg、30mg/kg和5Omg/kg膽紅素組血漿總膽紅素濃度95%的置信區(qū)間分別為：(106.31,123.49(196.58,238.90) μmol/L和(325.15,349.07)μmol/L,膽紅素注入劑量與血漿總膽紅素濃度呈正相關(guān)(rs=0.9452,P0.01)。以上3個(gè)血漿總膽紅素濃度范圍分別定為本模型的低、中、高膽紅素濃度范圍。2.脂多糖單獨(dú)作用可促進(jìn)脾IRAK-4和p-JNK的表達(dá)(P0.01),在脂多糖注入后1h時(shí)即可觀察到這種促進(jìn)作用,4h時(shí)作用最強(qiáng),24h時(shí)對(duì)IRAK-4的促進(jìn)作用明顯減弱,對(duì)p-JNK的促進(jìn)作用消失。3.低濃度膽紅素單獨(dú)作用可抑制脾IRAK-4和p-JNK的表達(dá)(P0.01)。對(duì)IRAK-4的抑制作用,在膽紅素注入后2h時(shí)即可觀察到,5h時(shí)作用最強(qiáng),24h時(shí)作用消失；對(duì)p-JNK的抑制作用,在膽紅素注入后2h時(shí)已較強(qiáng),以后逐漸減弱,24h時(shí)仍存在。4.低、中、高濃度膽紅素對(duì)脂多糖刺激脾IRAK-4表達(dá)有抑制作用(P0.01),膽紅素注入后2h時(shí)即可觀察到這種抑制作用,5h時(shí)作用明顯,24h時(shí)低、中濃度膽紅素的抑制作用消失,高濃度膽紅素的抑制作用仍然存在(P0.01)。5.中、高濃度膽紅素對(duì)脂多糖刺激p-JNK表達(dá)有促進(jìn)作用(P0.01),膽紅素注入后2h時(shí)即可觀察到這種促進(jìn)作用,5h時(shí)作用最強(qiáng),24h時(shí)作用減弱；低濃度膽紅素對(duì)脂多糖刺激p-JNK表達(dá)有抑制作用(P0.01),膽紅素注入后2h時(shí)即可觀察到這種抑制作用,以后逐漸減弱,5h時(shí)抑制作用消失。6.在脂多糖刺激下,IRAK-4和p-JNK的表達(dá)與膽紅素血漿濃度的相關(guān)分析結(jié)果：(1)2h、5h和24h的IRAK-4IOD(SUM)值與膽紅素濃度呈負(fù)相關(guān)(r分別為：—0.838、—0.845和—0.580,P0.01)。(2)2h、5h和24h的p-JNK IOD (SJM)值與膽紅素濃度呈正相關(guān)(r分別為0.897、0.935,P0.01和0.466,P0.05)。7.在膽紅素與脂多糖作用下,IRAK-4和p-JNK間的相關(guān)分析結(jié)果：(1)2h、5h時(shí)IRAK-4與p-JNK IOD (SUM)值呈負(fù)相關(guān)(r分別為—0.846和—0.946,P0.01)。(2)24h時(shí)IRAK-4與p-JNK IOD (SUM)值無(wú)相關(guān)(r為—0.384,P=0.064)。結(jié)論：1.LPS單獨(dú)作用能夠促進(jìn)IRAK-4和p-JNK的表達(dá)。2.低濃度膽紅素單獨(dú)作用能夠抑制IRAK-4和p-JNK的表達(dá)。3.低、中、高濃度膽紅素對(duì)LPS刺激IRAK-4表達(dá)有抑制作用,這種抑制作用呈濃度依賴性,隨著膽紅素濃度的升高,抑制作用增強(qiáng),持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)。4.中、高濃度膽紅素可促進(jìn)LPS刺激JNK磷酸化,隨著膽紅素濃度的升高,促進(jìn)作用增強(qiáng),持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)；低濃度膽紅素可抑制LPS刺激JNK磷酸化。提示膽紅素影響免疫細(xì)胞的機(jī)制可能與調(diào)節(jié)TLR4信號(hào)通路中IRAK-4的表達(dá)和JNK的磷酸化有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：膽紅素 高膽紅素血癥 IRAK-4 p-JNK 脾臟 嬰兒 新生
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R722.17
【目錄】：

• 英漢縮略詞對(duì)照表3-4
• 摘要4-7
• Abstract7-11
• 前言11-13
• 材料與方法13-20
• 1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 2 主要實(shí)驗(yàn)儀器13
• 3 主要實(shí)驗(yàn)試劑和材料13-14
• 4 主要溶液的配制14
• 5 實(shí)驗(yàn)預(yù)期目標(biāo)14-15
• 6 實(shí)驗(yàn)分組及流程15-16
• 7 實(shí)驗(yàn)方法16-19
• 8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理19-20
• 結(jié)果20-37
• 討論37-42
• 結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-48
• 致謝48-49
• 綜述49-66
• 參考文獻(xiàn)59-66

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 覃萍;曾華;;新生兒高膽紅素血癥對(duì)腎小管功能損害與尿β_2微球蛋白的關(guān)系[J];中國(guó)當(dāng)代兒科雜志;2007年02期

2 劉會(huì)領(lǐng);陳昌輝;陳敏;吳青;李茂軍;;膽紅素對(duì)新生兒臍血單核細(xì)胞表面分子Toll樣受體4的影響[J];中國(guó)當(dāng)代兒科雜志;2011年02期

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本文編號(hào)：683350