本文關鍵詞：靜脈注入膽紅素對新生大鼠脾IRAK-4及p-JNK蛋白表達的影響

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【摘要】：目的：建立新生大鼠高膽紅素血癥模型,探討靜脈注入膽紅素對脾白細胞介素1受體相關激酶-4(interleukin-1receptor associated kinase-4, IRAK-4)及磷酸化c-Jun氨基端激酶(phospho-c-Jun N-terminal kinase, p-JNK)蛋白表達的影響。方法：1.實驗分組：將144只7～8d新生SD大鼠,隨機分為空白對照組(Ⅰ)、脂多糖對照組(Ⅱ)、15mg/kg旦紅素對照組(Ⅲ)、15mg/kg膽紅素+脂多糖組(Ⅳa)、30mg/kg膽紅素+脂多糖組(Ⅳb)和50mg/kg膽紅素+脂多糖組(Ⅳc),共6組,每組24只,各組又分為2h、5h、24h3個時間點,每個時間點8只。2.建立新生大鼠高膽紅素血癥模型：(1)乙醚麻醉新生SD大鼠,分別經(jīng)頸靜脈注入不同劑量膽紅素(15mg/kg、30mg/kg和50mg/kg)；空白對照組和脂多糖對照組給予生理鹽水0.1m1頸靜脈注入。(2)在頸靜脈注入1h后,空白對照組和15mg/kg膽紅素對照組腹腔注入0.05ml生理鹽水；其余各組腹腔注入1mg/kg脂多糖。(3)分別于頸靜脈注入后2h、5h、24h采血,測血漿膽紅素濃度。(4)采血后取脾臟,制成石蠟切片,采用免疫組織化學方法檢測脾IRAK-4和p-JNK蛋白的表達。結果：1.新生SD大鼠在注入膽紅素后不同時間,皮膚出現(xiàn)不同程度的黃染,30～40分鐘黃染達高峰,1h后皮膚黃染逐漸消退。在膽紅素注入1h時,15mg/kg、30mg/kg和5Omg/kg膽紅素組血漿總膽紅素濃度95%的置信區(qū)間分別為：(106.31,123.49(196.58,238.90) μmol/L和(325.15,349.07)μmol/L,膽紅素注入劑量與血漿總膽紅素濃度呈正相關(rs=0.9452,P0.01)。以上3個血漿總膽紅素濃度范圍分別定為本模型的低、中、高膽紅素濃度范圍。2.脂多糖單獨作用可促進脾IRAK-4和p-JNK的表達(P0.01),在脂多糖注入后1h時即可觀察到這種促進作用,4h時作用最強,24h時對IRAK-4的促進作用明顯減弱,對p-JNK的促進作用消失。3.低濃度膽紅素單獨作用可抑制脾IRAK-4和p-JNK的表達(P0.01)。對IRAK-4的抑制作用,在膽紅素注入后2h時即可觀察到,5h時作用最強,24h時作用消失；對p-JNK的抑制作用,在膽紅素注入后2h時已較強,以后逐漸減弱,24h時仍存在。4.低、中、高濃度膽紅素對脂多糖刺激脾IRAK-4表達有抑制作用(P0.01),膽紅素注入后2h時即可觀察到這種抑制作用,5h時作用明顯,24h時低、中濃度膽紅素的抑制作用消失,高濃度膽紅素的抑制作用仍然存在(P0.01)。5.中、高濃度膽紅素對脂多糖刺激p-JNK表達有促進作用(P0.01),膽紅素注入后2h時即可觀察到這種促進作用,5h時作用最強,24h時作用減弱；低濃度膽紅素對脂多糖刺激p-JNK表達有抑制作用(P0.01),膽紅素注入后2h時即可觀察到這種抑制作用,以后逐漸減弱,5h時抑制作用消失。6.在脂多糖刺激下,IRAK-4和p-JNK的表達與膽紅素血漿濃度的相關分析結果：(1)2h、5h和24h的IRAK-4IOD(SUM)值與膽紅素濃度呈負相關(r分別為：—0.838、—0.845和—0.580,P0.01)。(2)2h、5h和24h的p-JNK IOD (SJM)值與膽紅素濃度呈正相關(r分別為0.897、0.935,P0.01和0.466,P0.05)。7.在膽紅素與脂多糖作用下,IRAK-4和p-JNK間的相關分析結果：(1)2h、5h時IRAK-4與p-JNK IOD (SUM)值呈負相關(r分別為—0.846和—0.946,P0.01)。(2)24h時IRAK-4與p-JNK IOD (SUM)值無相關(r為—0.384,P=0.064)。結論：1.LPS單獨作用能夠促進IRAK-4和p-JNK的表達。2.低濃度膽紅素單獨作用能夠抑制IRAK-4和p-JNK的表達。3.低、中、高濃度膽紅素對LPS刺激IRAK-4表達有抑制作用,這種抑制作用呈濃度依賴性,隨著膽紅素濃度的升高,抑制作用增強,持續(xù)時間延長。4.中、高濃度膽紅素可促進LPS刺激JNK磷酸化,隨著膽紅素濃度的升高,促進作用增強,持續(xù)時間延長；低濃度膽紅素可抑制LPS刺激JNK磷酸化。提示膽紅素影響免疫細胞的機制可能與調(diào)節(jié)TLR4信號通路中IRAK-4的表達和JNK的磷酸化有關。
【關鍵詞】：膽紅素 高膽紅素血癥 IRAK-4 p-JNK 脾臟 嬰兒 新生
【學位授予單位】：瀘州醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R722.17
【目錄】：

• 英漢縮略詞對照表3-4
• 摘要4-7
• Abstract7-11
• 前言11-13
• 材料與方法13-20
• 1 實驗動物13
• 2 主要實驗儀器13
• 3 主要實驗試劑和材料13-14
• 4 主要溶液的配制14
• 5 實驗預期目標14-15
• 6 實驗分組及流程15-16
• 7 實驗方法16-19
• 8 統(tǒng)計學處理19-20
• 結果20-37
• 討論37-42
• 結論42-43
• 參考文獻43-48
• 致謝48-49
• 綜述49-66
• 參考文獻59-66

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 覃萍;曾華;;新生兒高膽紅素血癥對腎小管功能損害與尿β_2微球蛋白的關系[J];中國當代兒科雜志;2007年02期

2 劉會領;陳昌輝;陳敏;吳青;李茂軍;;膽紅素對新生兒臍血單核細胞表面分子Toll樣受體4的影響[J];中國當代兒科雜志;2011年02期

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本文編號：683350