本文關鍵詞：兒童ALL微小殘留病的動態(tài)監(jiān)測及門冬酰胺酶抑制白血病細胞增殖的體內外研究

  更多相關文章： 白血病 腫瘤 殘余 兒童 預后 L-ASP Jurkat細胞 細胞周期 腫瘤

【摘要】：第一部分兒童ALL微小殘留病的動態(tài)監(jiān)測及其意義 目的 探討動態(tài)監(jiān)測微小殘留病(MRD)在兒童急性淋巴細胞白血病(ALL)治療中的預后價值。 方法 ALL病兒75例,在誘導緩解治療第19、33天及維持治療過程中通過流式細胞術檢測MRD水平,根據(jù)MRD水平分為A組(MRD≤10-4)、B組(MRD介于A組與C組間)、C組(MRD≥10-2),采用Kaplan-Meier分析法及COX比例風險回歸模型對實驗結果進行分析。 結果 1.誘導緩解治療第19天,A組生存率明顯高于B、C組(x2=6.435、19.795,P0.05)；誘導緩解治療第33天,C組病兒的生存率顯著低于其他兩組(x2=5.057、8.346,P0.05)。 2.維持治療3個月、6個月、12個月、2年時MRD不同水平,生存期差異有顯著性(x2=6.133-22.558,P0.05)；治療第3年時MRD的水平對病兒生存率無影響(P0.05)。根據(jù)維持治療過程中MRD≥10-2出現(xiàn)在不同時間點分3組：半年內出現(xiàn)(Ⅰ組)、半年到1年出現(xiàn)(Ⅱ組)、1年后出現(xiàn)(Ⅲ組),Ⅲ組的生存率高于Ⅰ、Ⅱ組(x2=6.226、7.018,P0.05)。 3.在治療1年內出現(xiàn)MRD≥10-2的病兒,高危組、T細胞型、融合基因陽性的生存率顯著降低(x2=5.661～10.682,P0.05)。 4.多因素分析：誘導緩解治療第19天MRD水平是影響病兒預后的獨立危險因素(RR=4.01;95%CI0.968～8.995, P0.05).治療1年內出現(xiàn)MRD≥10-2的病兒,高危組(RR4.73;95%CI1.316-14.624, P0.05)、T細胞型(RR1.78;95%CI0.101～6.014, P0.05)、融合基因陽性(RR0.08;95%CI0.008～0.801, P0.05)是影響病兒預后的危險因素。 結論 動態(tài)監(jiān)測MRD對病兒預后有極大臨床指導意義,有助于實施個體化治療。 第二部分左旋門冬酰胺酶抑制白血病細胞增殖的體內外研究 目的 探究L-ASP對Jurkat細胞株增殖的影響及其體內外對白血病細胞周期的影響。 方法 體外培養(yǎng)的Jurkat細胞株,取處于對數(shù)生長期且生長狀態(tài)良好的細胞用L-ASP進行干預。不同濃度L-ASP (0.2U/ml、1U/ml、5U/ml)分別處理Jurkat細胞24h、48h、72h后,Jurkat細胞的增殖抑制作用采用CCK-8法檢測,流式細胞術檢測細胞周期的阻滯作用。取ALL病兒新鮮骨髓液3～5ml,提取單個核細胞,按照細胞周期試劑盒的要求處理實驗所需細胞,流式細胞術檢測L-ASP對體內白血病細胞周期的阻滯作用。 結果 1.不同濃度(0.2U/ml、1.0U/ml、5.0U/ml) L-ASP分別作用Jurkat細胞24h、48h、72h后,各個處理組之間的細胞抑制率差異有顯著性(P0.05)。單因素方差分析示：在L-ASP濃度不變的情況下,L-ASP分別作用Jurkat細胞24h、48h、72h,抑制率逐漸升高(P0.05)；當作用時間不變時,L-ASP的濃度越高,細胞抑制率越高(P0.05)。 2.不同濃度的L-ASP (0.2U/ml、1.0U/ml、5U/ml)處理Jurkat細胞24h,G1期細胞所占比例各組間比較有差異(P0.05)。當L-ASP濃度為0.2U/ml處理細胞24h時,LSD-t檢驗,G1期細胞所占比例與對照組比較無差異(P0.05),L-ASP為0.2U/ml處理細胞48h、72h時,G1期細胞所占比例與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。不同濃度的L-ASP (0.2U/ml、1.0U/ml、5U/ml)處理Jurkat細胞48h,G1期細胞所占比例各組間以及各組與對照組之間的差異有顯著性(P0.05)。不同濃度的L-ASP (0.2U/ml、1.0/ml、5U/ml)處理Jurkat細胞72h, L-ASP對Jurkat細胞周期的阻滯作用明顯,各組間以及各組與對照組之間的差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。0.2U/ml的L-ASP作用Jurkat細胞不同時間(24h、48h、72h),各組間G1期細胞所占比例有差異(P0.05)。1.0U/ml的L-ASP作用Jurkat細胞不同時間,隨著作用時間延長,G1期細胞所占比例升高,(P0.05)。5.0U/ml的L-ASP作用Jurkat細胞不同時間,L-ASP對Jurkat細胞周期的阻滯作用隨著作用時間的延長越來越明顯(P0.05)。 3.ALL病兒新發(fā)組骨髓細胞G1期所占比例為(75.223±2.085)%,誘導治療33天組骨髓細胞G1期所占比例為(89.106±3.250)%,t檢驗結果：新發(fā)組和誘導緩解治療第33天組G1期細胞比例差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。誘導緩解治療第33天時G1期細胞比例與MRD的水平呈負相關性(r=-0.867,P0.01)。 結論 在體內外L-ASP均可抑制白血病細胞的增殖,并將細胞阻滯在G1期。ALL病兒誘導緩解治療第33天時G1期細胞比例與MRD水平可能呈負相關性。
【關鍵詞】：白血病 腫瘤 殘余 兒童 預后 L-ASP Jurkat細胞 細胞周期 腫瘤
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R733.7
【目錄】：

• 摘要2-6
• ABSTRACT6-12
• 縮略詞索引表12-13
• 第一部分 兒童ALL微小殘留病e蠖嗖餳捌湟庖，
  
  本文編號：683250
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