本文關(guān)鍵詞：Notch信號通路在小鼠椎間盤細(xì)胞中的差異表達(dá)調(diào)控作用

  更多相關(guān)文章： Notch信號通路 椎間盤 軟骨細(xì)胞 BMP-2 重組腺病毒

【摘要】：目的 探討Notch信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)分子在小鼠脊椎生長發(fā)育過程中的差異性表達(dá)譜，并進(jìn)一步研究Notch信號分子Dll-1和Jag-1對BMP-2誘導(dǎo)椎間盤髓核（nucleus pulpous, sNP）細(xì)胞體外成軟骨分化的影響。 方法 采用RT-PCR檢測各不同發(fā)育年齡段小鼠椎間盤的Notch信號分子表達(dá)情況，分析篩選出對調(diào)控脊椎正常生長發(fā)育的重要信號分子Dll-1、Jag-1，并采用免疫組織化學(xué)方法進(jìn)一步驗(yàn)證。重組腺病毒介導(dǎo)Dll-1、Jag-1、BMP-2在HEK293細(xì)胞中包裝擴(kuò)展獲得高滴度病毒，，將NP細(xì)胞分為Ad-GFP+Ad-RFP對照組（A組）、Ad-BMP-2+Ad-RFP組（B組）、Ad-BMP-2+Ad-Dll-1組（C組）、Ad-BMP-2+Ad-Jag-1組（D組），RT-PCR檢測BMP2、Dll-1、Jag-1在其中的表達(dá)水平，檢測軟骨細(xì)胞特征性產(chǎn)物蛋白聚糖（aggrecan,ACAN）和Ⅱ型膠原（collagen typeⅡ,COL2A1)的表達(dá)，甲苯胺藍(lán)染色檢測軟骨基質(zhì)分泌情況。 結(jié)果 1、小鼠脊椎生長發(fā)育過程中，Notch信號分子表達(dá)總體呈下降趨勢，其中Dll-1、Dll-3、Jag-1下降趨勢尤其顯著，在調(diào)節(jié)脊椎發(fā)生過程中起重要調(diào)節(jié)作用。 2、BMP-2過表達(dá)可促進(jìn)NP細(xì)胞成軟骨分化，致使ACAN和COL2A1表達(dá)增高，甲苯胺藍(lán)染色陽性增強(qiáng)。 3、Dll-1、Jag-1二者間有一定的協(xié)同刺激表達(dá)作用，并且其過表達(dá)可顯著抑制BMP-2誘導(dǎo)的成軟骨分化效應(yīng)。 結(jié)論 Notch信號分子尤其是Dll-1、Jag-1在正常脊椎發(fā)生過程中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用，并對椎間盤軟骨細(xì)胞的成熟分化有明顯負(fù)性調(diào)節(jié)作用。為進(jìn)一步研究Notch信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與脊椎發(fā)育性疾病的關(guān)系奠定了重要基礎(chǔ)
【關(guān)鍵詞】：Notch信號通路 椎間盤 軟骨細(xì)胞 BMP-2 重組腺病毒
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R726.8
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-15
• 參考文獻(xiàn)12-15
• 第一部分 Notch 信號分子在不同發(fā)育階段的小鼠椎間盤細(xì)胞中的差異性表達(dá)15-30
• 1 材料與方法15-22
• 2 結(jié)果22-26
• 3 討論26-28
• 參考文獻(xiàn)28-30
• 第二部分 Notch 信號對椎間盤軟骨細(xì)胞調(diào)控的研究30-45
• 1 材料與方法30-34
• 2 結(jié)果34-40
• 3 討論40-43
• 參考文獻(xiàn)43-45
• 全文總結(jié)45-47
• 文獻(xiàn)綜述47-54
• 參考文獻(xiàn)51-54
• 致謝54-55
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文55-56

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 顧廣玉,吳麗莉,馬大烈,朱明華,詹昒洲;三種不同原位PCR方法的比較研究[J];中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2000年02期

2 袁亞男;劉文忠;;實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的類型、特點(diǎn)與應(yīng)用[J];中國畜牧獸醫(yī);2008年03期

3 翁秀琴;沈武成;;制作HE染色石蠟切片的關(guān)鍵技術(shù)[J];醫(yī)藥論壇雜志;2005年21期

4 吳鴻雁,王景美,鄭金榆;免疫組化染色中骨組織脫鈣方法[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2005年03期

5 劉育艷;應(yīng)用微波輻射脫鈣技術(shù)改善骨組織免疫組化染色效果[J];山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2002年02期

6 熊正文,丁華野,李春光,田玉旺,徐志勇;脫鈣處理對骨及其軟組織免疫細(xì)胞化學(xué)染色的影響[J];診斷病理學(xué)雜志;2000年01期

本文編號：682853