本文關(guān)鍵詞：氯化鋰對母嬰隔離誘導(dǎo)的后天獲得性孤獨(dú)癥樣行為的緩解作用及機(jī)制研究

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【摘要】：第一部氯化鋰對母嬰隔離誘導(dǎo)的后天獲得性孤獨(dú)癥樣行為的緩解作用 目的：采用SD大鼠新生鼠PND1-9母嬰隔離的方法建立后天獲得性孤獨(dú)癥樣行為缺陷模型，成年后用行為學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測其是否具有孤獨(dú)癥樣行為表現(xiàn)。且給予慢性氯化鋰（Lithium）處理研究其對后天獲得性孤獨(dú)癥樣行為是否有緩解作用，為臨床早期干預(yù)孤獨(dú)癥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。 方法：SD大鼠新生鼠分為對照組（Ctr組）、母嬰隔離組（Iso組）、氯化鋰處理組(Licl組)、隔離氯化鋰處理組（Licl+iso組）。Iso組和Licl+iso組新生鼠每天進(jìn)行一小時的母嬰隔離（出生后PND1-9），每次母嬰隔離結(jié)束后Licl組及Licl+iso組給予氯化鋰（2mmol/kg）腹腔注射，Ctr組和Iso組給予等體積的生理鹽水腹腔注射。成年后（PND42-56）進(jìn)行行為學(xué)檢測：1.用三箱動物社交行為學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測SD大鼠的社會交往能力；2.用曠場實(shí)驗(yàn)檢測大鼠重復(fù)刻板樣的自身梳理行為；3.采用強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)檢測大鼠的抑郁樣行為；4.采用高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)和禁食實(shí)驗(yàn)檢測大鼠的焦慮狀態(tài)。 結(jié)果：社交行為學(xué)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Iso組雄性大鼠成年后與陌生同齡雄性SD大鼠交流時間與Ctr組大鼠相比顯著性減少，而玩玩具時間明顯增加，雌性SD大鼠社會交往能力檢測結(jié)果和雄性大鼠相似，且雌雄SD大鼠社會交往能力無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。慢性Lithium處理的雄性和雌性Licl+iso組大鼠社會交往能力接近Ctr組水平。曠場實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Iso組大鼠重復(fù)的自身梳理行為時間明顯多于Ctr組大鼠，而慢性Lithium處理能緩解這種重復(fù)的自身梳理行為。強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Iso組大鼠的不動潛伏期及掙扎時間都少于Ctr組大鼠，同樣慢性Lithium處理緩解了強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)時表現(xiàn)出的抑郁樣行為。高架十字迷宮和禁食實(shí)驗(yàn)均發(fā)現(xiàn)母嬰隔離增加了大鼠的焦慮狀態(tài)，而慢性Lithium處理能緩解母嬰隔離導(dǎo)致的大鼠焦慮樣行為。 結(jié)論：新生SD大鼠母嬰隔離會導(dǎo)致子代成年后孤獨(dú)癥樣行為，且伴有焦慮、抑郁樣行為表現(xiàn)。而慢性Lithium處理能緩解母嬰隔離誘發(fā)的后天獲得性孤獨(dú)癥樣行為缺陷以及伴有焦慮、抑郁樣行為。 第二部分氯化鋰緩解母嬰隔離誘導(dǎo)的后天獲得性孤獨(dú)癥樣行為機(jī)制的探討 目的：進(jìn)一步探討母嬰隔離誘導(dǎo)的孤獨(dú)癥樣行為的可能機(jī)制。探索母嬰隔離對大鼠成年后神經(jīng)系統(tǒng)的影響：海馬齒狀回（DG）區(qū)域神經(jīng)發(fā)生及海馬區(qū)域突觸傳導(dǎo)的變化，同時探索慢性Lithium處理對神經(jīng)發(fā)生及突觸傳導(dǎo)的作用，進(jìn)一步探索慢性Lithium逆轉(zhuǎn)孤獨(dú)癥樣行為的可能機(jī)制。 方法：造模同第一部分。免疫熒光實(shí)驗(yàn)方法：PND42時大鼠連續(xù)3天腹腔注射的Brdu（100mg/kg），每天一次，24hr后大鼠用30%的水合氯醛（3ml/kg）麻醉，首先用生理鹽水心室灌注，再用4%的多聚甲醛心室灌注，內(nèi)固定后取其整個腦組織固定于4%的多聚甲醛，48小時后用30%的蔗糖脫水，48小時后用免疫熒光實(shí)驗(yàn)方法檢測海馬齒狀回（DG）區(qū)域的神經(jīng)發(fā)生的變化。用雙皮質(zhì)素（Doublecortin, DCX）抗體檢測未成熟神經(jīng)細(xì)胞的變化及Brdu和成熟神經(jīng)元特異性核蛋白標(biāo)志（NeuN）及新型膠質(zhì)細(xì)標(biāo)志（GFAP）抗體檢測神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞表型的神經(jīng)祖細(xì)胞的變化。電生理實(shí)驗(yàn)方法：PND35-56時麻醉大鼠，用通過氧氣的NMDG腦脊液心室灌注后取腦組織切片，腦片用通過氧氣的HEPES腦脊液37℃孵育1hr后將腦片置于人工腦脊液中用神經(jīng)電生理（膜片鉗）室驗(yàn)方法記錄海馬處突觸傳遞的變化（檢測興奮性突觸后電流（sEPSC）和抑制性突觸后電流（sIPSC）的幅度及頻率的變化）。 結(jié)果：免疫熒光實(shí)驗(yàn)結(jié)果：母嬰隔離造成了大鼠海馬齒狀回神經(jīng)發(fā)生障礙。Iso組新生神經(jīng)細(xì)胞（DCX positive cell）與Ctr組大鼠相比明顯降低，而Lithium處理促進(jìn)了神經(jīng)祖細(xì)胞（NPC）的分化，Licl+iso組和Ctr組相比沒有差別。母嬰隔離同時也造成了NPC增殖的減少，Iso組Brdu和NeuN共表達(dá)的神經(jīng)元明顯低于Ctr組，但是母嬰隔離對GFAP和Brdu共表達(dá)標(biāo)的星型膠質(zhì)細(xì)胞沒有影響。慢性Lithium處理同樣促進(jìn)了NPC的增殖，Licl+iso組和Ctr組Brdu和NeuN共表達(dá)的神經(jīng)元相比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。GFAP和Brdu共表達(dá)的細(xì)胞四組之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。電生理實(shí)驗(yàn)結(jié)果：母嬰隔離增加了抑制性突觸傳遞，Iso組sIPSC的幅度和Ctr組比較明顯增加，，但其頻率沒有明顯的變化。而母嬰隔離對sEPSC的頻率和幅度都沒有影響。慢性Lithium處理能將抑制性突觸傳遞的改變恢復(fù)到生理水平。 結(jié)論：神經(jīng)發(fā)生障礙及突觸傳遞的改變可能是母嬰隔離誘導(dǎo)孤獨(dú)癥樣行為的機(jī)制，慢性Lithium處理緩解后天獲得性孤獨(dú)癥樣行的機(jī)制可能是通過促進(jìn)神經(jīng)發(fā)生和調(diào)節(jié)海馬區(qū)域突觸功能來完成的。
【關(guān)鍵詞】：母嬰隔離 氯化鋰 孤獨(dú)癥樣行為 神經(jīng)再生 自發(fā)性興奮性突觸后電位 自發(fā)性抑制性突觸后電位
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.94
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-6
• 摘要6-10
• ABSTRACT10-15
• 前言15-20
• 參考文獻(xiàn)17-20
• 第一部分 氯化鋰對母嬰隔離誘導(dǎo)的后天獲得性孤獨(dú)癥樣行為的緩解作用20-33
• 前言20
• 1 材料和方法20-23
• 2 結(jié)果23-29
• 3 討論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-33
• 第二部分 氯化鋰緩解母嬰隔離誘導(dǎo)的后天獲得性孤獨(dú)樣行為的機(jī)制探討33-45
• 前言33
• 1 材料和方法33-37
• 2 結(jié)果37-40
• 3 討論40-42
• 參考文獻(xiàn)42-45
• 全文總結(jié)45-46
• 文獻(xiàn)綜述46-54
• 參考文獻(xiàn)50-54
• 致謝54-55
• 攻讀碩士期間的研究成果及發(fā)表的論文55-56

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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本文編號：621849