發(fā)布時(shí)間：2017-08-02 06:17

  本文關(guān)鍵詞：TNF-α對(duì)哮喘小鼠肺泡灌洗液中LTD4、LTE4水平和肺組織中CysLTR1表達(dá)的影響

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【摘要】：目的：以哮喘小鼠模型為研究對(duì)象，觀察腫瘤壞死因子-α（Tumornecrosis factor-α, TNF-α）是否參與調(diào)控其肺泡灌洗液中LTD4、LTE4含量變化及肺組織中半胱氨酰白三烯受體1(Cysteinyl leukotriene receptor1,CysLTR1)表達(dá)情況。方法：將48只健康雌性Balb/c小鼠，隨機(jī)分為六組：正常組（A組），哮喘模型組（B組），低劑量TNF-α腹腔注射給藥哮喘組（C1組，0.1μg/kg），高劑量TNF-α腹腔注射給藥哮喘組（C2組，0.4μg/kg，），低劑量TNF-α霧化吸入給藥哮喘組（D1組，0.1μg/kg），高劑量TNF-α霧化吸入給藥哮喘組（D2組，0.4μg/kg），每組分別為8只。建立哮喘動(dòng)物模型，在末次激發(fā)后處死小鼠，取其肺泡灌洗液和肺組織，酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定（ELISA）檢測(cè)肺泡灌洗液中LTD4和LTE4含量水平，，蘇木精—伊紅染色法（HE染色）、免疫組織化學(xué)法（IHC）、實(shí)時(shí)免疫熒光定量PCR（QPCR）和蛋白質(zhì)免疫印跡法（Western Blot）檢測(cè)肺組織中CysLTR1表達(dá)情況。結(jié)果：（1）肺組織HE染色病理切片顯示哮喘組和TNF-α干預(yù)組有明顯氣道炎癥改變；（2）BALF中各組LTD4含量分別為（19.28±2.34）μg/L、（24.45±3.17）μg/L、（25.93±6.63）μg/L、（31.63±4.18）μg/L、（26.04±5.98）μg/L、（31.06±5.77）μg/L,干預(yù)組均高于正常對(duì)照組和哮喘模型組（P0.05）,高低劑量組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；各組LTE4含量分別為（40.00±2.71）ng/L、（46.90±3.91）ng/L、（52.16±2.73）ng/L、（53.41±5.01）ng/L、（50.41±4.70）ng/L、（52.26±4.70）ng/L。干預(yù)組均高于正常對(duì)照組和哮喘模型組（P0.05）,但不同劑量組之間差異不顯著（P0.05）（3）BALF各組EOS計(jì)數(shù)情況為（0.01±0.00）×106/L、（1.76±0.80）×106/L、（2.80±0.27）×106/L、（3.47±0.60）×106/L、（2.68±0.47）×106/L、（3.58±0.54）×106/L。干預(yù)組EOS數(shù)目顯著增加,但C1組和D1組之間、C2組和D2組之間差異不顯著，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）（4）IHC法測(cè)定各組CysLTR1陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)計(jì)數(shù)分別為：22.899±1.236、26.333±3.240、33.222±4.585、51.888±6.988、39.010±5.232、52.222±6.593。其中B組和C1組之間、C2組和D2組之間差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)性，其余任意兩組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（5）免疫組織熒光PCR法檢測(cè)各組的CysLTR1基因表達(dá)情況為0.688±0.206、1.648±0.534、3.822±1.585、5.888±0.988、4.010±1.232、6.136±1.287，其中C1組和D1組之間、C2組和D2組之間差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)性，其余任意兩組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（6）Westernblot法檢測(cè)各組的CysLTR1蛋白相對(duì)密度分別為0.797±0.081、1.422±0.17、1.784±0.210、2.448±0.096、2.023±0.058、2.933±0.034其中B組和C1組、C2組和D2組之間差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)性，，其余任意兩組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 結(jié)論：（1）TNF-α引起肺內(nèi)炎性介質(zhì)LTD4和LTE4產(chǎn)生增加，同時(shí)引起EOS和其它炎性細(xì)胞在氣道和肺組織局部募集、浸潤(rùn)，維持和加重了哮喘病理改變，這可能是哮喘炎癥狀態(tài)持續(xù)存在的發(fā)生機(jī)制之一；(2）TNF-α對(duì)肺組織CysLTR1表達(dá)呈上調(diào)作用，在呼吸道病毒感染時(shí)，局部產(chǎn)生大量的TNF-α，這可能是病毒性呼吸道感染時(shí)誘發(fā)喘息發(fā)作的機(jī)理之一。
【關(guān)鍵詞】：哮喘 TNF-α 白三烯 半胱氨酰白三烯受體1 調(diào)控
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R725.6
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 英漢縮略詞對(duì)照表10-11
• 前言11-14
• 1 材料與方法14-28
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器14-16
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法16-27
• 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析27-28
• 2 結(jié)果28-36
• 2.1 哮喘發(fā)作癥狀28
• 2.2 肺泡灌洗液中 LTD4、LTE4 含量和嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果28-29
• 2.3 肺組織 HE 染色病理切片結(jié)果29-32
• 2.4 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)哮喘鼠肺組織 CysLTR1 結(jié)果32-33
• 2.5 實(shí)時(shí)免疫熒光定量 PCR 檢測(cè)哮喘鼠肺組織 CysLTR1 基因表達(dá)結(jié)果…3133-34
• 2.6 蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)哮喘鼠肺組織 CysLTR1 蛋白結(jié)果34-36
• 3 討論36-45
• 3.1 哮喘動(dòng)物模型的建立36-38
• 3.2 CysLTs、CysLTR1 與支氣管哮喘關(guān)系38-39
• 3.3 TNF-α與支氣管哮喘關(guān)系39-43
• 3.4 TNF-α對(duì)哮喘小鼠肺泡灌洗液中 LTD4、LTE4 含量及肺組織中CysLTR1 表達(dá)影響及意義43-45
• 參考文獻(xiàn)45-48
• 4 結(jié)論48-49
• 綜述49-61
• 參考文獻(xiàn)56-61
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄61-62
• 致謝62

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1 張亨菊，張耀;血漿前列腺素測(cè)定在哮喘患兒中的意義[J];中國(guó)婦幼保健;1996年04期

2 李川寶，王衷眾，黃開(kāi)平;兒童哮喘的胸片評(píng)估[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1996年04期

3 李強(qiáng),姜斌,劉忠令,張世明,孫德明,張殿堯,劉燕燕,肖現(xiàn)文,李平升;T淋巴細(xì)胞激活及其釋放的白細(xì)胞介素-4與哮喘發(fā)病的關(guān)系[J];中華內(nèi)科雜志;1997年02期

4 李惠新,張繼蘭;當(dāng)心誤用中成藥包裝的激素治療哮喘[J];中國(guó)臨床醫(yī)生;1997年04期

5 蔣東波,李華強(qiáng),史源,潘捷,沈際皋,姚忠凱;哮喘患兒外周血IL-2,IL-10與NO水平及其關(guān)系研究[J];免疫學(xué)雜志;1998年03期

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本文編號(hào)：607977