本文關(guān)鍵詞：高血流肺血管重建中內(nèi)皮細(xì)胞NF-κB對(duì)血管活性物質(zhì)腎上腺髓質(zhì)素及前列環(huán)素的影響

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【摘要】：研究背景 先天性小兒心血管系統(tǒng)疾病在兒科較為常見,其中最常見是先天性心臟病。我國小兒先天性心臟病發(fā)病率約0.7%,每年約有15-20萬病患兒降生。肺動(dòng)脈高壓(pulmonary arterial hypertension, PAH)可發(fā)生于先心病的任何一階段,是一種致殘率和病死率均很高的臨床綜合征。因此肺動(dòng)脈高壓的治療亦是國內(nèi)外備受關(guān)注的臨床問題。肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生是由于肺血流量增加,導(dǎo)致肺動(dòng)脈切應(yīng)力(shear stress,SS)增加,肺動(dòng)脈內(nèi)皮結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變,從而使血管平滑肌細(xì)胞失去控制而引起增殖,引起肺血管重建,肺血管重建是肺動(dòng)脈高壓形成的病理生理基礎(chǔ)。 在1986年,Sen和Baltimore首先從B淋巴細(xì)胞核抽提物中檢測到一種能與免疫球蛋白K輕鏈基因增強(qiáng)子κB序列(GGG ACT TTC)特異結(jié)合的核蛋白因子,稱之為NF-κB,人類逐漸發(fā)現(xiàn)其廣泛存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞(vascular endothelial cell,VEC).血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)及心肌細(xì)胞中。許多研究證實(shí)高肺血流所致大鼠肺血管收縮和結(jié)構(gòu)重建與NF-κB的活動(dòng)增強(qiáng)有關(guān)。而肺血管收縮及結(jié)構(gòu)重建與許多血管活性物質(zhì)如內(nèi)皮素—1(ET-1)、血管緊張素(AngⅡ)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、血小板源性生長因子(PDGF)、前列環(huán)素(PGI2)、心鈉素(ANP)、腎上腺髓質(zhì)素(ADM)、一氧化氮(NO)等物質(zhì)變化是密不可分的。我們通過研究NF—κB活性與上述血管活性物質(zhì)的關(guān)系,為肺動(dòng)脈高壓的預(yù)防和治療提供理論依據(jù)和新的途徑。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?研究高血流肺血管重建中肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞NF-κB與特定基因識(shí)別序列相結(jié)合的活性變化對(duì)于肺動(dòng)脈壁內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)血管活性物質(zhì)腎上腺髓質(zhì)素(adrenomeullin,ADM)及前列環(huán)素(prostacyclin, PGI2)表達(dá)的影響,確立核蛋白因子κB(NF-κB)與左向右分流大鼠模型中血管活性物質(zhì)ADM及PGI的關(guān)系及應(yīng)用阻斷劑吡咯烷二硫基甲酸鹽(PDTC)干預(yù)后的變化。 實(shí)驗(yàn)方法： 將50只4周齡大Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為4組,其中,手術(shù)分流組Tn組15只,手術(shù)分流+PDTC阻斷組Ti組15只,假手術(shù)對(duì)照組Co組10只,正常對(duì)照組10只。應(yīng)用水合氯醛麻醉大鼠,將Tn組和Ti組大鼠通過套管連接的方法,建立左側(cè)頸總動(dòng)脈-頸外靜脈分流,Ti組大鼠在手術(shù)前1小時(shí)開始按照120mg/kg.d給予阻斷劑PDTC,連續(xù)應(yīng)用2周,Co組大鼠除了不進(jìn)行頸總動(dòng)脈-頸外靜脈吻合外,其余手術(shù)程序與實(shí)驗(yàn)組完全相同。連續(xù)喂養(yǎng)2周,應(yīng)用右心導(dǎo)管測量肺動(dòng)脈壓力(PASP),計(jì)算Qp/Qs;之后切取肺動(dòng)脈組織,分離動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,提取核蛋白,制作DNA探針,通過凝膠遷移率實(shí)驗(yàn)測定各實(shí)驗(yàn)組NF-κB與特定基因識(shí)別序列相結(jié)合的活性,再通過免疫組織化學(xué)的方法測定各實(shí)驗(yàn)組中腎上腺髓質(zhì)素(adrenomeullin,ADM)及前列環(huán)素(prostacyclin,PGI2)的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 術(shù)后2周,測量各實(shí)驗(yàn)組肺動(dòng)脈壓,計(jì)算得出Qp/Qs平均值為2.32±0.44,該結(jié)果提示手術(shù)分流通暢,動(dòng)物模型建立成功；Tn組大鼠較Cn組比較肺動(dòng)脈收縮壓明顯升高(P0.01)；Ti組與Cn組比較肺動(dòng)脈收縮壓無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)；Co組與Cn組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。Tn組NF-KB的活性較Cn組明顯升高(P0.01)；Ti組較Cn組明顯降低(P0.01)； Co組與Cn組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。Tn組大鼠ADM及PGI2表達(dá)較Cn組降低,Ti組與Cn組比較無明顯差異；Co組與Cn組相比無明顯差異。研究結(jié)論： 高血流肺血管重建,肺動(dòng)脈壓力升高與NF-κB活性增強(qiáng)有關(guān)；NF-κB活性增強(qiáng)組,測得血管活性物質(zhì)ADM及PGI2的表達(dá)降低；應(yīng)用NF-κB阻斷劑PDTC后抑制NF-κB活性,ADM及PGI2表達(dá)增加,阻礙肺血管重建,抑制肺動(dòng)脈高壓而形成。
【關(guān)鍵詞】：阻斷劑吡咯烷二硫基甲酸鹽 核蛋白因子k 血管內(nèi)皮細(xì)胞 肺血管重建
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R725.4
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 中英文對(duì)照及符號(hào)說明12-13
• 第1章 前言13-20
• 第2章 研究材料與方法20-23
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物20
• 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑及實(shí)驗(yàn)儀器儀器20
• 2.3 動(dòng)物模型的建立20
• 2.4 測量肺動(dòng)脈壓20
• 2.5 制作肺動(dòng)脈組織石，
  
  本文編號(hào)：604199
  suoshi