小鼠播散性巨細胞病毒感染后樹突狀細胞肺內活化及腹腔淋巴結遷移的時序性研究
發(fā)布時間:2017-07-29 06:07
本文關鍵詞:小鼠播散性巨細胞病毒感染后樹突狀細胞肺內活化及腹腔淋巴結遷移的時序性研究
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【摘要】:【目的】 1.建立播散性小鼠巨細胞病毒(MCMV)感染模型; 2.觀察小鼠MCMV感染后肺內樹突狀細胞活化及表面共刺激分子的表達水平變化以及樹突狀細胞遷移至腹腔淋巴結內的時序性變化。 【方法】 1.建立小鼠播散性巨細胞病毒感染模型:4.5周齡雌性BALB/c小鼠,腹腔接種MCMV Smith株(5×103)PFU,建立播散性感染模型(MCMV感染組),同時設立正常對照組和LPS處理組; 2.在MCMV感染后1d、3d、7d,收獲各組小鼠肺和淋巴結,制備單細胞懸液,用流式抗體標記樹突狀細胞表面分子CD11c、MHCⅡ及CD86,流式細胞學檢測法測定MCMV感染組、正常對照組和LPS處理組肺和腹腔淋巴結內樹突狀細胞的比率、表面特異性分子CD11c、抗原提呈分子MHCⅡ和表面共刺激分子CD86的表達水平。 【結果】 1.肺組織流式細胞學檢測 1)樹突狀細胞的比率:MCMV感染組感染后1d樹突狀細胞(CD11chiMHC-IIhi雙陽性細胞)比率稍上升,,3d升至峰值,7d下降,但仍高于正常對照組;LPS處理組樹突狀細胞比率基本穩(wěn)定,與正常組無明顯差異; 2)樹突狀細胞表面CD11c表達量:MCMV感染組,感染后1d和3d與正常對照組CD11c表達量無明顯變化,但在7d明顯上升,高于正常組。LPS處理組,其CD11c的表達量在感染后1d時明顯低于正常對照組,此后回升,與正常組無明顯差異; 3)樹突狀細胞表面CD86表達量:MCMV感染組,其CD86表達量與正常對照組相比在感染后1d無明顯改變,于3d達峰,明顯高于正常組,7d回落,降至正常左右。LPS處理組,在感染后1d時處于峰值,高于正常對照組,但統(tǒng)計學意義不充分,后CD86表達量逐漸回落,與正常無差異; 4)樹突狀細胞表面MHCⅡ表達量:MCMV感染組MHCⅡ表達量在感染后1d無明顯改變,3d時下降,低于正常組,待7d回升,接近正常組水平。LPS處理組于感染后1d及3d MHCⅡ水平較正常正常組稍有下降但無統(tǒng)計學意義,7d時回至正常水平; 5)肺部CD11cint細胞群:感染后7d,肺內明顯出現(xiàn)CD11c表達量中等的細胞群(CD11cint),主要出現(xiàn)于MCMV感染組,而正常對照組和LPS處理組不明顯。MCMV感染組,與正常對照組相比較,CD11cint細胞群比率在3d稍上升,7d明顯高于正常對照組。除上述情況外其余各組均無明顯統(tǒng)計學差異。CD11cint細胞群CD11c表達量中等,CD86無或低表達,MHCⅡ表達也從無到弱,即CD11cintMHCII /loCD86 /lo,且上述表面分子表達量穩(wěn)定,在各實驗組間及區(qū)組間差異不大。 2.淋巴結流式細胞學檢測:MCMV感染組,CD11c+細胞的比率于感染后1d和3d與正常對照組無明顯差異,7d時上升,明顯高于正常對照組。而LPS組,其比率在感染后1d、3d、7d均無統(tǒng)計學差異上的改變。 【結論】 1. MCMV感染與LPS感染相比,其肺內DCs的活化和遷移延遲。DCs比率達峰時其表面MHCⅡ類分子下調、共刺激分子CD86表達稍上調,且DCs活化受到一定程度抑制,可能與MCMV感染DCs相關; 2. MCMV感染組肺內發(fā)現(xiàn)一群中量表達CD11c的細胞群(感染后7d明顯),其CD86無表達或低表達,MHCⅡ表達也從無到弱(即CD11cintMHC II /loCD86 /lo),可能是漿細胞樣DCs(pDCs)和/或干擾素產生性殺傷樹突狀細胞(IKDC),與宿主抗病毒免疫反應相關。 3.淋巴結內DCs于感染后7d明顯增多,提示外周組織的DCs于7d已明顯遷移至淋巴結。
【關鍵詞】:小鼠巨細胞病毒 樹突狀細胞 CD11c MHCⅡ CD86
【學位授予單位】:華中科技大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R725.1
【目錄】:
- 縮略詞表5-7
- 中文摘要7-9
- Abstract9-12
- 前言12-18
- 參考文獻16-18
- 引言18-19
- 材料和方法19-28
- 結果28-36
- 討論36-43
- 參考文獻43-45
- 全文小結45-46
- 綜述46-58
- 參考文獻54-58
- 致謝58
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 徐翼;方峰;董永綏;向稚丹;李革;;小鼠巨細胞病毒全身播散型感染模型的建立[J];臨床兒科雜志;2008年06期
本文編號:587728
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