本文關(guān)鍵詞：腺病毒介導(dǎo)的IL-10及IGF-1基因聯(lián)合干預(yù)對(duì)NOD鼠T1DM發(fā)病早期胰島β細(xì)胞的保護(hù)作用

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【摘要】：目的觀察腺病毒介導(dǎo)的鼠白細(xì)胞介素10(Ad-mlL-10)及胰島素樣生長因子1(Ad-mIGF-1)基因聯(lián)合干預(yù)對(duì)NOD小鼠1型糖尿病發(fā)病早期胰島β細(xì)胞的保護(hù)作用,為臨床早期干預(yù)提供動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法17-20周齡近期發(fā)病的雌性NOD小鼠24只,隨機(jī)分為①Ad-mIGF-1組、②Ad-mIL-10組、③Ad-mIL-10+Ad-mIGF-1組、④糖尿病對(duì)照組,另選取相同周齡、至實(shí)驗(yàn)?zāi)┤晕窗l(fā)病的小鼠為⑤空白對(duì)照組。發(fā)病后立即干預(yù),分別給予①、②、③組腹腔注射Ad-mIGF-1、Ad-mIL-10、Ad-mIL-10+Ad-mIGF-1,各0.1ml,④、⑤組未予任何干預(yù)。定期監(jiān)測(cè)小鼠體質(zhì)量、尿糖及血糖,行胰腺病理切片HE染色及免疫組化觀察胰島炎癥浸潤程度和IL-10、IGF-1基因胰腺表達(dá)情況,測(cè)定血清IL-10、IGF-1、IFN-γ、IL-4和C肽水平。 結(jié)果1.IL-10、IGF-1基因在胰腺局部表達(dá)增強(qiáng),血清中水平也相應(yīng)升高； 2.基因干預(yù)后小鼠血清IFN-γ水平降低,IL-4、IL-10水平升高,聯(lián)合基因干預(yù)組效果更顯著(p0.01)；IL-10單基因干預(yù)組較IGF-1單基因干預(yù)組IFN-γ水平降低,IFN-γ/IL-4降低(p0.01)； 3.IL-10單基因及聯(lián)合基因干預(yù)后C肽水平升高,聯(lián)合基因干預(yù)組升高更明顯(p0.01),但I(xiàn)GF-1單基因干預(yù)組C肽水平未升高(p0.05)； 4.與糖尿病對(duì)照組小鼠比較,基因干預(yù)組小鼠胰島炎程度及血糖水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),在基因干預(yù)后3周時(shí)IL-10單基因及聯(lián)合基因干預(yù)組小鼠體質(zhì)量降低(p0.05)。 結(jié)論1.腹腔注射Ad-mIL-10、Ad-mIGF-1后,IL-10、IGF-1分別在胰腺高表達(dá),血清中水平也相應(yīng)升高； 2.IL-10和/IGF-1基因干預(yù),可發(fā)揮一定地免疫調(diào)節(jié)作用,其中IL-10基因干預(yù)較IGF-1基因干預(yù)效果好,聯(lián)合基因干預(yù)較單基因干預(yù)效果更顯著； 3.IL-10單基因及聯(lián)合基因干預(yù),可發(fā)揮一定地胰島β細(xì)胞功能保護(hù)作用,其中聯(lián)合基因干預(yù)效果更明顯,但I(xiàn)GF-1單基因干預(yù)組未發(fā)現(xiàn)此作用； 4.IL-10和/IGF-1基因干預(yù),無減輕胰島炎作用,在控制血糖水平及增加體質(zhì)量方面無改善作用。
【關(guān)鍵詞】：白細(xì)胞介素10 胰島素樣生長因子1 胰島B細(xì)胞 NOD小鼠 1型糖尿病
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R725.8
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-8
• 引言8-10
• 第一章 材料和方法10-18
• 1.1 主要儀器、試劑及耗材10-12
• 1.1.1 主要儀器10
• 1.1.2 主要試劑及耗材10
• 1.1.3 常用試劑配制10-11
• 1.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物11
• 1.1.5 病理、免疫組化分析試劑及設(shè)備11
• 1.1.6 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)實(shí)驗(yàn)設(shè)備11-12
• 1.1.7 重組腺病毒載體12
• 1.2 細(xì)胞培養(yǎng)、重組腺病毒的擴(kuò)增及滴度測(cè)定12-13
• 1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)12
• 1.2.2 重組腺病毒擴(kuò)增12
• 1.2.3 重組腺病毒滴度測(cè)定12-13
• 1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組、處理及標(biāo)本采集13
• 1.3.1 動(dòng)物分組13
• 1.3.2 動(dòng)物處理及標(biāo)本采集13
• 1.4 血清IL-10、IGF-1、IL-4、IFN-γ、C肽的測(cè)定13-14
• 1.4.1 血清IL-10測(cè)定13-14
• 1.4.2 血清IGF-1測(cè)定14
• 1.4.3 血清IL-4測(cè)定14
• 1.4.4 血清IFN-γ測(cè)定14
• 1.4.5 血清C肽測(cè)定14
• 1.5 胰腺病理形態(tài)學(xué)觀察14-15
• 1.5.1 胰腺標(biāo)本固定與石蠟包埋14
• 1.5.2 切片、展片與粘片14-15
• 1.5.3 切片行HE染色15
• 1.5.4 胰島炎性浸潤程度15
• 1.6 免疫組化15-16
• 1.6.1 操作步驟15-16
• 1.6.2 IL-10在胰腺的局部表達(dá)情況16
• 1.6.3 IGF-1在胰腺的局部表達(dá)情況16
• 1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析16-18
• 第二章 結(jié)果18-28
• 2.1 腺病毒的擴(kuò)增及其滴度測(cè)定18
• 2.2 小鼠尿糖、血糖、體質(zhì)量監(jiān)測(cè)18-20
• 2.3 小鼠血清細(xì)胞因子測(cè)定20-22
• 2.4 小鼠血清C肽測(cè)定22-23
• 2.5 小鼠胰腺炎癥浸潤程度23-24
• 2.6 小鼠胰腺免疫組化24-28
• 第三章 討論28-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-34
• 綜述34-50
• 參考文獻(xiàn)43-50
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果50-51
• 致謝51-52

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 陳志紅;李堂;胡素娟;王桂琴;;鼠胰島素樣生長因子-1重組腺病毒的構(gòu)建及其在胰島β細(xì)胞的表達(dá)[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2009年05期

2 解秀文;田飛;陳志紅;李堂;;腺病毒介導(dǎo)胰島素樣生長因子-1基因?qū)︽滊遄艟卣T發(fā)1型糖尿病大鼠的保護(hù)作用[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2010年08期

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本文編號(hào)：569417