發(fā)布時(shí)間：2017-07-20 06:44

  本文關(guān)鍵詞：瀘州市兒童β地中海貧血基因突變類(lèi)型研究

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【摘要】：目的：地中海貧血是由于血紅蛋白基因的突變導(dǎo)致珠蛋白鏈的合成不平衡所造成的一類(lèi)常見(jiàn)的單基因遺傳性、溶血性疾病，包括α地中海貧血和β地中海貧血兩種類(lèi)型，是世界上最常見(jiàn)和發(fā)病率最高的遺傳性溶血性貧血，也是危害最嚴(yán)重的血紅蛋白病之一。在國(guó)外以地中海沿岸國(guó)家和東南亞各國(guó)多見(jiàn)，我國(guó)以廣東、廣西、海南、四川等�。ㄗ灾螀^(qū)）較常見(jiàn)。本病具有高度的遺傳異質(zhì)性和極大的地域民族差異，不同地區(qū)人群的發(fā)病率和基因背景差異均很大，因此，研究這些變化特征可為本病的預(yù)防及診斷提供科學(xué)依據(jù)。本課題通過(guò)了解瀘州市β地中海貧血的基因突變類(lèi)型及構(gòu)成比，為本地區(qū)地中海貧血的診斷和預(yù)防提供理論依據(jù)，，同時(shí)探討基因診斷在地中海貧血中的重要作用。方法：1.全部病例來(lái)源為2011年1月至2013年6月在瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院兒科門(mén)診（包括兒保門(mén)診）及住院部就診兒童。2.所有病例均進(jìn)行血常規(guī)檢查，篩查出的血紅蛋白（Hb）110g/L,紅細(xì)胞平均容積（MCV）80fl或紅細(xì)胞平均血紅蛋白（MCH）27pg的小細(xì)胞低色素貧血患兒，進(jìn)一步做血紅蛋白電泳檢測(cè)。3.血紅蛋白電泳檢測(cè)結(jié)果中判為β地中海貧血表型陽(yáng)性者，即MCV80%，HbA23.2%或HbF3.1%，進(jìn)行β地貧基因檢測(cè)。4.用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chainreaction，PCR)結(jié)合反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)(reverse dot blot，RDB)檢測(cè)常見(jiàn)β-珠蛋白基因上的17個(gè)位點(diǎn)突變，包括CD41-42(-TTCT)、IVS-Ⅱ-654(C㧐T)、-28(A㧐G)、CD71-72(+A)、CD17(AAG㧐TAG)、βE (GAG→AAG)、CD31(-C)、CD43(GAG㧐TAG)、-32(C㧐A)、-29(A㧐G)、-30(T㧐C)、CD14-15(+G)、CAP+40-43(-AAAC)、起始密碼子Int(ATG㧐AGG)、CD27／28(+C)、IVS-Ⅰ-1（G㧐T）、IVS-Ⅰ-5（G㧐C）。首先制備DNA標(biāo)本，通過(guò)PCR擴(kuò)增、雜交、洗膜等步驟，最后顯色觀察結(jié)果，膜條有藍(lán)色雜交斑點(diǎn)為陽(yáng)性結(jié)果。結(jié)果：1.在進(jìn)行地貧基因檢查的114例β-地貧表型陽(yáng)性?xún)和�，檢測(cè)到β地貧基因突變者72例，占總檢測(cè)對(duì)象的63.16%。2.72例β-地貧中共檢出7種基因突變位點(diǎn)，分別為CD41-42（-TTCT）、IVS-Ⅱ-654（C㧐T）、CD17（AAG㧐TAG）、-28（A㧐G）、CD71-72（+A）、βE(GAG→AAG)、-32（C㧐A）。其中以CD17（AAG㧐TAG）、IVS-Ⅱ-654（C㧐T）、CD41-42（-TTCT）3種基因型最為常見(jiàn)，占90.22%。3.基因突變組成15種基因型，包括52例雜合子(72.22%)、13例雙重雜合子(18.05%)、3例三重雜合子(4.17%)和4例純合子(5.56%)。雜合子基因型分別為: CD17(27.78%)、IVS-Ⅱ-654(22.22%)、CD41-42(19.44%)和-28(2.78%)。雙重雜合子基因型分別為：IVS-Ⅱ-654/CD17(8.33%)、CD41-42/CD17(2.78%)、-28/CD17(1.39%)、CD41-42/CD71-72(1.39%)、CD41-42/βE(1.39%)、CD41-42/IVS-Ⅱ-654(1.39%)、CD41-42/-32(1.39%)。三重雜合子基因型分別為: IVS-Ⅱ-654+CD17/-32(2.78%)、CD41-42+IVS-Ⅱ-654/-28(1.39%)。純合子基因型為: CD41-42/CD41-42(2.78%)和IVS-Ⅱ-654/IVS-Ⅱ-654(2.78%)。結(jié)論：1.瀘州地區(qū)兒童β-地貧基因突變以CD17（AAG㧐TAG）、IVS-Ⅱ-654（C㧐T）、CD41-42（-TTCT）最為多見(jiàn)。2.基因型以雜合子頻率較高。3.瀘州地區(qū)兒童β地中海貧血檢出率較高，應(yīng)加強(qiáng)β地貧篩查，以做到及早診斷。4.RDB-PCR技術(shù)在β地貧的檢測(cè)中診斷率高，適合于中國(guó)人群常見(jiàn)的突變類(lèi)型β-地貧基因檢測(cè)。
【關(guān)鍵詞】：地中海貧血 基因突變 基因診斷 反向點(diǎn)雜交
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R725.5
【目錄】：

• 目錄3-4
• 摘要4-7
• Abstract7-10
• 前言10-14
• 材料與方法14-20
• 結(jié)果20-24
• 討論24-30
• 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-35
• 英漢縮略詞對(duì)照表35-36
• 致謝36-37
• 綜述37-49
• 參考文獻(xiàn)45-49

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 肖奇志;周玉球;張永良;謝建紅;鄭勤;;單管多重PCR結(jié)合RDB技術(shù)在α-地貧產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2012年03期

2 馮明;粟福f

本文編號(hào)：566694