本文關(guān)鍵詞：NT-3聯(lián)合NSC移植治療缺血缺氧性腦損傷乳鼠的病理研究

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【摘要】：目的：探討NT-3能否促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞增殖和分化，及NT-3聯(lián)合NSC移植對HIBD的神經(jīng)功能恢復(fù)的治療效果。 方法：取雌性Wistar孕鼠的胎鼠腦組織，行神經(jīng)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)、傳代、鑒定，確定是神經(jīng)干細(xì)胞后，將培養(yǎng)好的神經(jīng)干細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液，等待移植用。將wistar乳鼠78只采用隨機(jī)數(shù)字表法將其分成四組：正常組、HIBD組、單純NSC移植組、NT-3聯(lián)合移植組。出生7日后采用左側(cè)頸總動脈結(jié)扎+缺氧2小時的方法制備HIBD模型，造模后3日行神經(jīng)干細(xì)胞側(cè)腦室移植，正常組乳鼠不給予任何干預(yù)，后三組分別給予生理鹽水、單純NSCs、NT-3聯(lián)合NSCs。移植后繼續(xù)喂養(yǎng)，分別于4周、8周時行平衡木實驗，后斷頭取腦，制作石蠟切片，行HE染色以及免疫組化，同時取材行電鏡檢查。 結(jié)果：體外培養(yǎng)胎腦組織可見懸浮生長的圓球形或不規(guī)則球形細(xì)胞團(tuán)，Nestin染色陽性，提示其為神經(jīng)干細(xì)胞。行為學(xué)觀察HIBD鼠在通過平衡木橫桿時遲疑不定，探索行為較多，下肢關(guān)節(jié)活動僵硬，協(xié)調(diào)能力較差；而神經(jīng)干細(xì)胞移植組較HIBD組關(guān)節(jié)活動恢復(fù)明顯，協(xié)調(diào)性也有所改善，NT-3組活動恢復(fù)更加顯著。統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示：NT-3組與NSC組比較（P＜0.05）有統(tǒng)計學(xué)意義。形態(tài)學(xué)觀察HE染色HIBD組腦室旁正常組織破壞嚴(yán)重，并可見多個不規(guī)則囊腔，NSC移植組和NT-3聯(lián)合移植組腦室旁正常組織結(jié)構(gòu)均有所恢復(fù)，，囊變少見。免疫組織化學(xué)提示NT-3聯(lián)合組可見MBP陽性細(xì)胞明顯增多，細(xì)胞排列結(jié)構(gòu)明顯改善。高倍鏡下觀察MBP染色的陽性細(xì)胞數(shù)各組分別為14.83±2.44個、3.13±0.39個、7.04±0.93個、12.87±1.19個，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果：NT-3組與NSC組比較（P＜0.05）有統(tǒng)計學(xué)意義。而GFAP染色NT-3組陽性細(xì)胞明顯減少，與NSC組比較統(tǒng)計學(xué)依然有明顯差異；電鏡下從細(xì)胞水平觀察，超微結(jié)構(gòu)明顯好轉(zhuǎn)，髓鞘纖維排列明顯改善，細(xì)胞器排列稍欠規(guī)則，較單純NSC移植組也有明顯的改善。 結(jié)論：NT-3能夠通過促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞向少突膠質(zhì)細(xì)胞分化作用，能有效促進(jìn)乳鼠缺血缺氧性腦損傷的功能恢復(fù)。
【關(guān)鍵詞】：神經(jīng)營養(yǎng)因子3 缺血缺氧性腦損傷 神經(jīng)干細(xì)胞 聯(lián)合移植 功能恢復(fù)
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R722.1
【目錄】：

• 目錄5-6
• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 英文縮略語表8-9
• 前言9-11
• 材料和方法11-17
• 1. 實驗材料11-12
• 2. 實驗方法和步驟12-16
• 3. 統(tǒng)計學(xué)方法16
• 4. 實驗流程圖16-17
• 結(jié)果17-29
• 1. HIBD 模型制作情況17
• 2. HIBD 模型制作評價17
• 3. 胎鼠腦源性神經(jīng)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)及鑒定17
• 4. 行為學(xué)觀察結(jié)果17-18
• 5. 形態(tài)學(xué)評價18-21
• 6. 附圖21-29
• 討論29-35
• 1. 神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)及鑒定29-30
• 2. HIBD 模型的建立30-31
• 3. 神經(jīng)營養(yǎng)因子對 NSC 的促進(jìn)增殖及誘導(dǎo)定向分化31-32
• 4. NT-3 聯(lián)合 NSC 移植更能促進(jìn) HIBD 鼠神經(jīng)功能恢復(fù)32-33
• 5. 問題與展望33-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 文獻(xiàn)綜述39-44
• 參考文獻(xiàn)42-44
• 作者簡介44-45
• 致謝45-46
• 導(dǎo)師評閱表46

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：562403