本文關(guān)鍵詞：早產(chǎn)兔生發(fā)基質(zhì)—腦室內(nèi)出血模型的建立和評價

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【摘要】：目的：生發(fā)基質(zhì)-腦室內(nèi)出血(germinal matrix hemorrhage-intraventricularhemorrhage，GMH-IVH）是早產(chǎn)兒最主要的腦損傷形式之一，可導(dǎo)致嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，給家庭及社會造成沉重的負(fù)擔(dān)。盡管如此，目前尚無標(biāo)準(zhǔn)的早產(chǎn)動物GMH-IVH模型，以便我們對早產(chǎn)兒GMH-IVH進(jìn)行深入研究。本研究試圖建立一種能模擬人類早產(chǎn)兒GMH-IVH的早產(chǎn)兔動物模型，并通過超聲、顯微鏡、免疫組化以及神經(jīng)行為測定等手段進(jìn)一步對建立的模型進(jìn)行綜合評價。 方法： 1.將孕29天孕兔進(jìn)行剖宮產(chǎn)，迅速取出幼兔，保溫，給予奶粉喂養(yǎng)，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組及對照組，每組各取18只早產(chǎn)兔。于生后3小時，實(shí)驗(yàn)組的早產(chǎn)兔接受50%丙三醇腹腔注射，劑量為10ml/kg，對照組的早產(chǎn)兔接受等劑量生理鹽水腹腔注射。 2.對照組與實(shí)驗(yàn)組早產(chǎn)兔分別于生后24小時接受頭顱超聲檢查，以觀察GMH-IVH的發(fā)生率。 3.將對照組與實(shí)驗(yàn)組早產(chǎn)兔分別于生后24小時、48小時、72小時給予安樂死，每個時間點(diǎn)各取6只。迅速分離腦組織，肉眼觀察早產(chǎn)兔GMH-IVH的發(fā)生率，并與超聲GMH-IVH的結(jié)果進(jìn)行比較。 4.顯微鏡進(jìn)一步觀察實(shí)驗(yàn)組與對照組早產(chǎn)兔于出生24小時、48小時、72小時3個時間段腦組織GMH-IVH的發(fā)生率。 5.電鏡進(jìn)一步觀察GMH-IVH早產(chǎn)兔腦組織結(jié)構(gòu)的變化，確立GMH-IVH模型的建立。 6.選取接受丙三醇腹腔注射后發(fā)生GMH-IVH的早產(chǎn)兔15只，為GMH-IVH模型組，對照組無GMH-IVH的早產(chǎn)兔15只為正常對照組，兩組分別隨機(jī)分為生后24小時、48小時、72小時三個亞組。 7.正常對照組與模型組早產(chǎn)兔分別于生后24小時、72小時根據(jù)Derrick神經(jīng)行為評分法接受神經(jīng)行為評定。分別觀察兩組早產(chǎn)兔在顱神經(jīng)、意識、步態(tài)等方面的差異，進(jìn)一步觀察GMH-IVH早產(chǎn)兔與早產(chǎn)兒GMH-IVH的相似性。 8.免疫組化法觀察GMH-IVH早產(chǎn)兔腦組織內(nèi)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein，GFAP)的變化，比較正常對照組與模型組早產(chǎn)兔腦組織GFAP陽性細(xì)胞表達(dá)率的差異，并進(jìn)一步比較GMH-IVH早產(chǎn)兔出生24小時、48小時、72小時GFAP陽性細(xì)胞表達(dá)率的變化。 9.統(tǒng)計學(xué)方法：數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件處理，計數(shù)資料兩組之間的比較采用四格表確切概率法，三組以上的比較采用行×列表的卡方檢驗(yàn)。以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，當(dāng)P＜0.05時，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；當(dāng)P＞0.05時，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 1.頭顱超聲檢查：早產(chǎn)兔于出生24小時接受頭顱超聲檢查，實(shí)驗(yàn)組早產(chǎn)兔GMH-IVH的發(fā)生率為83.33%（15/18），對照組早產(chǎn)兔GMH-IVH的發(fā)生率為11.11%（2/18），丙三醇腹腔注射導(dǎo)致早產(chǎn)兔GMH-IVH的發(fā)生率明顯高于生理鹽水腹腔注射法，兩者的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.01）。 2.大體標(biāo)本觀察：肉眼觀察兩組早產(chǎn)兔GMH-IVH的發(fā)生情況，與超聲影像學(xué)結(jié)果完全一致，實(shí)驗(yàn)組GMH-IVH發(fā)生率為83.33%（15/18），對照組GMH-IVH發(fā)生率為11.11%（2/18），對照組與實(shí)驗(yàn)組早產(chǎn)兔GMH-IVH發(fā)生率的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.01）。 3.顯微鏡下觀察實(shí)驗(yàn)組及對照組早產(chǎn)兔腦組織GMH-IVH的發(fā)生率：實(shí)驗(yàn)組GMH-IVH的發(fā)生率為88.89%（16/18），對照組GMH-IVH的發(fā)生率為11.11%（2/18），兩組之間的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.01）。 4.電鏡下觀察：出血后的腦組織表現(xiàn)為神經(jīng)細(xì)胞的變性，胞漿呈空泡狀，軸索腫脹，斷裂，髓鞘剝脫，線粒體嵴模糊，消失，出現(xiàn)大量細(xì)胞空泡現(xiàn)象，進(jìn)一步驗(yàn)證了GMH-IVH模型的建立。 5.神經(jīng)行為測試：出生24小時及72小時的神經(jīng)行為測試結(jié)果顯示GMH-IVH模型組與正常對照組早產(chǎn)兔在神經(jīng)行為測試上均無差異（P＞0.05）。 6.GFAP免疫組化結(jié)果：正常對照組的腦組織切片中GFAP陽性細(xì)胞散在分布，染色較淺，模型組GFAP細(xì)胞數(shù)目顯著增多，染色加深，形態(tài)不規(guī)則。GFAP陽性細(xì)胞的表達(dá)率在模型組與對應(yīng)時間段的正常對照組比較，，模型組明顯高于正常對照組，兩者之間有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.01）。在GMH-IVH模型組,生后48小時腦組織GFAP陽性細(xì)胞數(shù)的表達(dá)率高于生后24小時（P 0.05），72小時的表達(dá)率高于48小時，組間比較具有統(tǒng)計學(xué)意義（P 0.05）。 結(jié)論: 1本研究通過模擬Georgiadis P的方法，建立了早產(chǎn)兔GMH-IVH模型，通過從超聲影像學(xué)，大體標(biāo)本的肉眼觀察，顯微鏡下及電鏡下細(xì)胞微觀結(jié)構(gòu)的觀察，確立了早產(chǎn)兔GMH-IVH動物模型的建立。 2本研究進(jìn)一步通過測試GMH-IVH模型組與正常對照組早產(chǎn)兔在神經(jīng)行為測試上的差異及GFAP免疫組化法測定的結(jié)果，提示本實(shí)驗(yàn)建立的早產(chǎn)兔GMH-IVH動物模型與人類早產(chǎn)兒GMH-IVH后的神經(jīng)行為表現(xiàn)較為一致，且與早產(chǎn)兒GMH-IVH的病理改變相似。
【關(guān)鍵詞】：生發(fā)基質(zhì)-腦室內(nèi)出血 動物模型 早產(chǎn)兒 神經(jīng)行為 顱腦超聲
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R722.6;R-332
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 前言11-12
• 材料與方法12-18
• 結(jié)果18-21
• 附圖21-28
• 附表28-30
• 討論30-34
• 結(jié)論34
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 綜述 早產(chǎn)動物 GMH-IVH 模型的制作37-45
• 參考文獻(xiàn)42-45
• 致謝45-46
• 個人簡歷46

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙聰敏;魯利群;;早產(chǎn)兒腦損傷動物模型的研究現(xiàn)狀與展望[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2009年22期

2 張旭東;韓錦玲;賴龍龍;周敏;李漢廣;;早產(chǎn)兒凝血功能與顱內(nèi)出血的關(guān)系研究[J];兒科藥學(xué)雜志;2008年06期

3 李玉紅,閆平;腦損傷后GFAP和NGF的表達(dá)研究進(jìn)展[J];中國法醫(yī)學(xué)雜志;2003年06期

4 李俐濤;楊q

本文編號：547635