發(fā)布時(shí)間：2017-07-03 08:13

  本文關(guān)鍵詞：孕期補(bǔ)充DHA對(duì)宮內(nèi)感染仔鼠腦組織S-100B、ROS及IL-1β表達(dá)的影響

  更多相關(guān)文章： 宮內(nèi)感染 腦損傷 DHA S-100B ROS IL-1β

【摘要】：目的： 通過(guò)制備宮內(nèi)感染致腦損傷的動(dòng)物模型，研究孕期DHA干預(yù)對(duì)宮內(nèi)感染仔鼠腦組織中S-100B蛋白（S-100B）、活性氧（ROS）及白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）表達(dá)的影響，探討S-100B、ROS及IL-1β與腦損傷的關(guān)系以及DHA在宮內(nèi)感染后對(duì)仔鼠腦組織的保護(hù)作用。 方法： 將30只確定第1天懷孕的雌性SD大鼠隨機(jī)分為：生理鹽水對(duì)照組（NS組）、脂多糖組（LPS組）及DHA干預(yù)組（DHA組），，每組10只。DHA組自孕期第1天開(kāi)始每天每只孕鼠給予DHA130mg灌胃至分娩，LPS組及NS組則同時(shí)間給予等容積的無(wú)菌生理鹽水灌胃至分娩，于孕期第17、18天連續(xù)2天給DHA組及LPS組孕鼠腹腔注射LPS，劑量為350ug/kg，而NS組注射等容積（0.6ml）的無(wú)菌生理鹽水。取各組孕20天、生后第1、3、7天（分別記作G20、P1、P3、P7）的仔鼠腦組織，以及各組孕鼠分娩時(shí)的胎盤(pán)組織，采用蘇木精-伊紅染色法（HE染色），在光鏡下觀察各組孕鼠的胎盤(pán)組織及各組不同時(shí)間點(diǎn)仔鼠腦組織的病理改變；應(yīng)用S-P免疫組化法檢測(cè)各組不同時(shí)間點(diǎn)仔鼠腦組織中S-100B及IL-1β的表達(dá)情況；采用大鼠活性氧酶聯(lián)免疫分析試劑盒（ELISA試劑盒）檢測(cè)各組不同時(shí)間點(diǎn)仔鼠腦組織中ROS的含量。 結(jié)果： 1.孕鼠子宮及胎盤(pán)組織HE染色：LPS組孕鼠子宮和胎盤(pán)組織明顯充血、水腫，可見(jiàn)大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)；NS組子宮及胎盤(pán)組織細(xì)胞排列整齊，無(wú)明顯充血水腫，未觀察到明顯的炎性細(xì)胞；DHA組介于LPS組及NS組之間。 2.仔鼠腦組織HE染色：LPS組仔鼠腦組織出現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞腫脹，甚至有局灶性出血，隨著時(shí)間的推移，白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)纖維走向紊亂，可見(jiàn)篩網(wǎng)狀改變，細(xì)胞數(shù)量減少；DHA組早期神經(jīng)細(xì)胞有輕度水腫，但無(wú)明顯局灶性出血，隨著時(shí)間的推移，白質(zhì)內(nèi)神經(jīng)纖維走向尚規(guī)則，未見(jiàn)明顯篩網(wǎng)狀改變；NS組腦組織神經(jīng)細(xì)胞無(wú)水腫，細(xì)胞數(shù)豐富，隨著時(shí)間點(diǎn)推移，白質(zhì)內(nèi)神經(jīng)纖維走向規(guī)則。 3.仔鼠腦組織中S-100B的表達(dá)：LPS組腦組織中S-100B的表達(dá)在G20時(shí)達(dá)高峰，P1、P3、P7時(shí)漸下降，與NS組相比，在G20、P1、P3、P7時(shí)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01）；DHA組腦組織中S-100B的表達(dá)，與LPS組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)相比均明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01），與NS組比較，在G20、P1、P3時(shí)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01），P7時(shí)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 4.仔鼠腦組織中ROS的表達(dá)：LPS組腦組織中ROS的表達(dá)在G20時(shí)達(dá)高峰，P1、P3、P7時(shí)漸下降，與NS組相比，在G20、P1、P3、P7時(shí)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01）；DHA組腦組織中ROS的表達(dá)，與LPS組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)相比均明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01），與NS組比較，在G20、P1、P3時(shí)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01），P7時(shí)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 5.仔鼠腦組織中IL-1β的表達(dá)：LPS組腦組織中IL-1β的表達(dá)在G20時(shí)達(dá)高峰，P1、P3、P7時(shí)漸下降，與NS組相比，在G20、P1、P3、P7時(shí)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01）；DHA組腦組織中IL-1β的表達(dá)，與LPS組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)相比均明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01），與NS組比較，在G20、P1、P3時(shí)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01），P7時(shí)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論： 1.孕鼠腹腔注射LPS制造宮內(nèi)感染模型后，HE染色光鏡下觀察仔鼠腦組織中神經(jīng)細(xì)胞水腫，可見(jiàn)局灶性出血，細(xì)胞數(shù)量減少，推測(cè)宮內(nèi)感染可導(dǎo)致仔鼠腦損傷。 2.與NS組相比，LPS組仔鼠腦組織中S-100B、ROS及IL-1β的表達(dá)明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.01），提示宮內(nèi)感染后大量炎癥因子及炎癥相關(guān)因子的釋放在腦損傷的發(fā)生、發(fā)展中可能起重要作用。 3.與LPS組相比，DHA組仔鼠腦組織的病理形態(tài)學(xué)改變減輕，而且腦組織中S-100B、ROS及IL-1β的表達(dá)減少，提示DHA在宮內(nèi)感染導(dǎo)致的腦損傷中起到一定的抗炎、抗氧化等保護(hù)作用。 4.發(fā)生宮內(nèi)感染后，仔鼠腦組織中S-100B、ROS及IL-1β的表達(dá)存在明顯的正相關(guān)性。推測(cè)它們之間可能通過(guò)某個(gè)信號(hào)通路來(lái)介導(dǎo)腦損傷。
【關(guān)鍵詞】：宮內(nèi)感染 腦損傷 DHA S-100B ROS IL-1β
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R714.2;R722
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-11
• 第1章 引言11-13
• 第2章 材料與方法13-20
• 2.1 材料13-15
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備13
• 2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑13-14
• 2.1.4 主要試劑配制14-15
• 2.2 方法15-19
• 2.2.1 孕鼠模型制作15
• 2.2.2 宮內(nèi)感染模型的建立及實(shí)驗(yàn)分組15-16
• 2.2.3 指標(biāo)測(cè)定和方法16-19
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法19-20
• 第3章 結(jié)果20-26
• 3.1 孕鼠一般情況20
• 3.2 各組孕鼠子宮及胎盤(pán)組織 HE 染色20
• 3.3 各組仔鼠腦組織 HE 染色20-21
• 3.4 各組仔鼠腦組織中 S-100B 的變化21-22
• 3.5 各組仔鼠腦組織中 ROS 的變化22-23
• 3.6 各組仔鼠腦組織中 IL-1β的變化23-24
• 3.7 S-100B 與 ROS 之間進(jìn)行相關(guān)性分析24
• 3.8 ROS 與 IL-1β之間進(jìn)行相關(guān)性分析24-25
• 3.9 S-100B 與 IL-1β之間進(jìn)行相關(guān)性分析25-26
• 第4章 討論26-32
• 4.1 宮內(nèi)感染致仔鼠腦損傷的動(dòng)物模型的制備26-27
• 4.2 宮內(nèi)感染與腦白質(zhì)損傷27-28
• 4.3 宮內(nèi)感染后仔鼠腦組織中 S-100B、ROS、IL-1β的表達(dá)28-30
• 4.4 DHA 對(duì)宮內(nèi)感染導(dǎo)致的仔鼠腦損傷的保護(hù)作用30-32
• 第5章 結(jié)論與展望32-33
• 5.1 結(jié)論32
• 5.2 展望32-33
• 致謝33-34
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 附圖37-43
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果43-44
• 綜述44-48
• 參考文獻(xiàn)47-48

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：512901