巨結(jié)腸同源病輔助檢查、手術(shù)方式及術(shù)后石蠟切片的免疫組化染色研究
發(fā)布時(shí)間:2017-07-01 12:03
本文關(guān)鍵詞:巨結(jié)腸同源病輔助檢查、手術(shù)方式及術(shù)后石蠟切片的免疫組化染色研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的: 第一,在所選的97例HD,28例IND和42例HG中,利用統(tǒng)計(jì)學(xué)的手段,分別對(duì)術(shù)前輔助檢查(包括AchE組化染色、直腸肛管測(cè)壓)、手術(shù)方式的選擇進(jìn)行歸納分析,尋找其檢查的陽(yáng)性指標(biāo)對(duì)診斷和治療的指導(dǎo)意義以及不同手術(shù)方式對(duì)疾病的影響。 第二,本研究共選擇五種腸神經(jīng)標(biāo)志物,包括:1.人蛋白基因產(chǎn)物9.5(ProteinGeneProduct9.5,PGP9.5);2.組織蛋白酶D(CathepsinD,CAD);3.外周蛋白(Peripherin,PR);4.S-100蛋白;5.神經(jīng)元特異性烯醇化酶(Neuron-specificenolase,NSE)。運(yùn)用免疫組織化學(xué)染色的方法檢測(cè)它們?cè)贗ND結(jié)腸的表達(dá)特點(diǎn),進(jìn)而深入xO究腸神經(jīng)元發(fā)育不良癥結(jié)腸的病理學(xué)特征,進(jìn)一步提高其診斷和鑒別診斷的準(zhǔn)確率。 方法: 167例患者,按HD、IND、HG分三組,對(duì)術(shù)前常規(guī)檢查AchE組化染色的結(jié)果分為陰性(-)和陽(yáng)性(+)兩種進(jìn)行統(tǒng)計(jì);在直腸肛管測(cè)壓中,分無(wú)反射波、有正常反射波、“W”或“U”形波三種進(jìn)行統(tǒng)計(jì);IND和HG手術(shù)方式分“左半結(jié)腸切除術(shù)”和“結(jié)腸次全切除術(shù)”進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。 PGP9.5、組織蛋白酶D、外周蛋白、S-100和NSE五種抗體,采用過氧化酶標(biāo)記的鏈霉卵白素(Streptavidin/Peroxidase)免疫組織化學(xué)染色方法對(duì)28例IND結(jié)腸石蠟標(biāo)本切片進(jìn)行染色。 光學(xué)顯微鏡下觀察神經(jīng)叢大小,每叢神經(jīng)節(jié)細(xì)胞形態(tài)、數(shù)量等。 結(jié)果: 對(duì)比研究發(fā)現(xiàn),AchE組化染色,在IND組的多數(shù)患兒為陰性,在HG組和HD組中,陽(yáng)性占多數(shù)或絕大多數(shù),這也是IND與HG、HD非同尋常的差異。提示由于IND的腸道神經(jīng)系統(tǒng)存在,遠(yuǎn)端直結(jié)腸腸壁并沒有大量膽堿能神經(jīng)增生,這也是IND缺少巨結(jié)腸樣的痙攣腸段的主要原因和證據(jù)。在直腸肛管測(cè)壓檢查中,IND組不同于HD組,絕大多數(shù)存在肛管抑制反射波,和正常比不同的是存在的反射波絕大多數(shù)呈“W”或“U”型;在手術(shù)方式的選擇上,IND組“結(jié)腸次全切除術(shù)”比例遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于“左半結(jié)腸切除術(shù)”;反觀HG組,正好相反,,“左半結(jié)腸切除術(shù)”比例遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于“結(jié)腸次全切除術(shù)”。這和傳統(tǒng)的先天性巨結(jié)腸的手術(shù)方式有很大的區(qū)別。 五種神經(jīng)標(biāo)志物在正常腸道神經(jīng)系統(tǒng)染色特點(diǎn):組織蛋白酶D僅在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞表達(dá)為陽(yáng)性,神經(jīng)叢卻不表達(dá);PGP9.5和外周蛋白在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞、腸壁肌間、黏膜下神經(jīng)叢中均有表達(dá);S-100只在黏膜下、肌內(nèi)神經(jīng)叢表達(dá),神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中不表達(dá),形成細(xì)胞狀空白區(qū);NSE在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞胞漿呈褐色的強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),環(huán)形肌內(nèi)的神經(jīng)纖維為棕黃色細(xì)波紋狀表達(dá),施旺細(xì)胞和周圍細(xì)胞不著色,呈陰性反應(yīng)。 腸神經(jīng)元發(fā)育不良癥(IND)的免疫組化染色光鏡下觀察分析:1神經(jīng)叢:神經(jīng)叢縱橫徑均明顯大于正常。2節(jié)細(xì)胞計(jì)數(shù):IND的節(jié)細(xì)胞明顯增加,通常在6個(gè)以上,部分甚至超過10個(gè)。 結(jié)論 AchE組化染色、直腸肛管測(cè)壓檢查是診斷HD的重要方法,但同時(shí)對(duì)于巨結(jié)腸同源病的診斷和鑒別診斷,也具有較高的價(jià)值意義。先天性巨結(jié)腸的手術(shù)方式千變?nèi)f化,巨結(jié)腸同源病的手術(shù)方式主要分兩種,根據(jù)具體情況需要選擇施行“結(jié)腸次全切術(shù)”或者“左半結(jié)腸切除術(shù)”,在HG組和IND組中,兩者分別所占的比例也是不一樣的,HG組所選手術(shù)多半為“左半結(jié)腸切除術(shù)”,IND組則多選用“結(jié)腸次全切除術(shù)”。這說(shuō)明,對(duì)于IND的治療以結(jié)腸次全切為主,HG則應(yīng)該以左半切除為主。 免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腸道神經(jīng)系統(tǒng)的PGP9.5、組織蛋白酶D、外周蛋白、S-100和NSE表達(dá)有相當(dāng)高的特異性結(jié)果,可以明顯地顯示IND中神經(jīng)叢和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞等的形態(tài)特點(diǎn)。對(duì)IND的深入研究以及診斷和鑒別診斷具有重要價(jià)值意義。
【關(guān)鍵詞】:腸神經(jīng)元發(fā)育不良癥 巨結(jié)腸同源病 經(jīng)標(biāo)志物 免疫組化染色
【學(xué)位授予單位】:華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R726.2
【目錄】:
- 前言5-8
- 中文摘要8-11
- 英文摘要11-14
- 引言14
- 材料與方法14-18
- (一)臨床病例采集和處理14-15
- (二)術(shù)后切片的免疫組化染色15-18
- (三)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析18
- 結(jié)果18-21
- 討論21-25
- 綜述25-30
- 全文參考文獻(xiàn)30-33
- 致謝33-34
- 附錄34
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條
1 鄭輝明;李善春;葉彤;李娜萍;戴育堅(jiān);王英俊;;NSE和S-100蛋白在巨結(jié)腸同源病的表達(dá)[J];臨床小兒外科雜志;2006年05期
2 關(guān)鳳玲;孫曉毅;周晟;魏明發(fā);;先天性巨結(jié)腸癥及其同源病神經(jīng)標(biāo)志物的表達(dá)以及圖形測(cè)量定量研究[J];中華小兒外科雜志;2007年07期
本文關(guān)鍵詞:巨結(jié)腸同源病輔助檢查、手術(shù)方式及術(shù)后石蠟切片的免疫組化染色研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):505813
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