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rhEPO對(duì)宮內(nèi)炎癥致新生大鼠腦白質(zhì)損傷腦組織NMDA R1mRNA及EPOR表達(dá)水平的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-06-29 12:01

  本文關(guān)鍵詞:rhEPO對(duì)宮內(nèi)炎癥致新生大鼠腦白質(zhì)損傷腦組織NMDA R1mRNA及EPOR表達(dá)水平的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的探討重組人促紅細(xì)胞生成素(recGinbinant human erythropoietin,rhEPO)對(duì)宮內(nèi)感染導(dǎo)致的新生鼠腦白質(zhì)損傷(white matter damage,WMD)的保護(hù)作用及有效治療療程。方法選取12只孕15天的Wistar大鼠,將大鼠按3:1比例隨機(jī)分成LPS組(n=9)和對(duì)照組(n=3),妊娠第15天LPS組行腹腔注射脂多糖(LPS 0.3mg/Kg)建立宮內(nèi)感染模型,對(duì)照組注射等量的無菌生理鹽水(約0.2ml)。分娩胎鼠后,兩組分別隨機(jī)取胎盤(n=6)和胎鼠腦組織(n=10)予蘇木素-伊紅(Hematoxylin Eosin,HE)染色觀察胎盤及腦組織病理改變,同時(shí)隨機(jī)選取LPS組新生鼠64只,對(duì)其重新分組為:RhEPO治療組(n=32)于生后每日腹腔注射rhEPO 5000IU/kg,感染對(duì)照組(n=32)于生后每日腹腔注射等量無菌生理鹽水0.2ml。并隨機(jī)選取對(duì)照組中新生鼠32只為空白對(duì)照組,于生后每日腹腔注射等量無菌生理鹽水0.2ml,三組在生后第0小時(shí)、3天、7天、14天四個(gè)時(shí)間點(diǎn)各隨機(jī)選取8只斷頭取腦。利用ELISA方法檢測(cè)腦組織中EPOR蛋白水平及RT-PCR檢測(cè)腦組織中NMDA R1mRNA表達(dá)水平。結(jié)果1.14只孕鼠注射LPS后死亡2只,死亡率為18.2%;其中LPS組孕鼠均于孕19.0-20.5天分娩,早產(chǎn)分娩率100%;對(duì)照組孕鼠均于孕22.0-22.5天生產(chǎn)仔鼠。2.脂多糖組孕鼠胎盤典型病理變化見明顯的炎性侵潤(rùn)。脂多糖組新生鼠腦白質(zhì)染色淡、結(jié)構(gòu)疏松;神經(jīng)纖維粗細(xì)不均,走向紊亂,出現(xiàn)核固縮表現(xiàn)為細(xì)胞核小、突起減少未成熟的神經(jīng)元;膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量增多。3.ELISA方法檢測(cè)腦組織中EPOR蛋白水平顯示:感染對(duì)照組在生后3日齡、7日齡可出現(xiàn)EPOR蛋白水平較生理水平升高持續(xù)至生后14日齡,較空白對(duì)照組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),rhEPO治療組在生后第3日齡EPOR蛋白水平較感染對(duì)照組顯著升高,且高水平表達(dá)保持在生后14日齡,較感染對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.RT-PCR方法檢測(cè)腦組織NMDA R1mRNA表達(dá)水平顯示:感染對(duì)照組NMDA R1mRNA表達(dá)在生后即刻上升,在第7日齡達(dá)到高峰,逐漸下降并持續(xù)表達(dá)至生后14日齡,較空白對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),rhEPO治療組在生后0小時(shí)、3日齡、7日齡新生鼠腦組織NMDA R1mRNA表達(dá)水平較感染對(duì)照組明顯降低,差異具有顯著性(P〈0.05)。結(jié)論1.孕鼠腹腔內(nèi)注射LPS可成功模擬宮內(nèi)感染模型,并導(dǎo)致新生鼠出現(xiàn)腦白質(zhì)損傷。2.宮內(nèi)炎癥致腦白質(zhì)損傷新生大鼠腦組織的NMDA過度活化,給予rhEPO治療可抑制NMDA過度活化介導(dǎo)的氨基酸興奮性毒性作用,促使EPOR表達(dá)上調(diào),以減少宮內(nèi)炎癥致腦組織損傷,發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。3.rhEPO治療宮內(nèi)感染致腦損傷應(yīng)早期治療,且14天的療程目前為最佳療程。
【關(guān)鍵詞】:新生鼠 宮內(nèi)感染 腦白質(zhì)損傷 促紅細(xì)胞生成素 促紅細(xì)胞生成素受體 N-甲基-D-天門冬氨酸
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R722.1
【目錄】:
  • 中文摘要2-4
  • Abstract4-8
  • 引言8-10
  • 第一章 材料和方法10-18
  • 1.1 材料10-11
  • 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物10
  • 1.1.2 實(shí)驗(yàn)藥品和試劑10-11
  • 1.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備11
  • 1.2 方法11-18
  • 1.2.1 宮內(nèi)感染致腦白質(zhì)損傷(WMD)新生大鼠模型制作12
  • 1.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及干預(yù)處理12-13
  • 1.2.3 標(biāo)本采集13
  • 1.2.4 腦組織RNA的提取13-14
  • 1.2.5 逆轉(zhuǎn)錄合成互補(bǔ)DNA(cDNA)14-15
  • 1.2.6 建立RT-PCR反應(yīng)體系15-16
  • 1.2.7 ELISA方法檢測(cè)EPOR表達(dá)水平16-18
  • 第二章 數(shù)據(jù)采集與處理18-19
  • 2.1 懫用 2~(-△△ct)對(duì) Real-time PCR 結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)算公式參照公式18
  • 2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法18-19
  • 第三章 結(jié)果19-23
  • 3.1 孕鼠分娩及新生鼠存活情況19
  • 3.2 胎盤和腦組織HE染色結(jié)果19
  • 3.3 EPO對(duì)宮內(nèi)感染新生鼠腦組織NMDAR1mRNA表達(dá)影響19-20
  • 3.4 EPO對(duì)宮內(nèi)感染新生鼠腦組織EPOR蛋白水平表達(dá)影響20-23
  • 第四章 結(jié)論23-24
  • 第五章 討論24-28
  • 5.1 宮內(nèi)感染致新生大鼠腦損傷24
  • 5.2 EPO/EPOR在腦白質(zhì)損傷的表達(dá)24-25
  • 5.3 NMDA受體在感染新生鼠腦組織中的表達(dá)25-26
  • 5.4 促紅細(xì)胞生成素腦部神經(jīng)系統(tǒng)保護(hù)作用26-27
  • 5.5 不同療程應(yīng)用EPO對(duì)感染所致新生鼠腦損傷的保護(hù)作用27-28
  • 附圖表28-30
  • 參考文獻(xiàn)30-33
  • 綜述33-38
  • 參考文獻(xiàn)38
  • 參考文獻(xiàn)38-42
  • 攻讀學(xué)位期間成果42-43
  • 致謝43-44

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 王曉進(jìn);危小良;張希;劉云奇;;重組人促紅細(xì)胞生成素預(yù)處理對(duì)體外循環(huán)手術(shù)中心肌的保護(hù)作用[J];重慶醫(yī)學(xué);2014年10期

2 劉瑩瑩;楊一兵;湯勇;;神經(jīng)營養(yǎng)因子對(duì)損傷的SGNs保護(hù)的研究進(jìn)展[J];臨床醫(yī)學(xué);2014年06期

3 宋麗麗;黃志恒;裴益玲;陳超;;圍產(chǎn)期反復(fù)感染對(duì)未成熟鼠腦發(fā)育的影響[J];中國當(dāng)代兒科雜志;2014年12期

4 張嘉熙;史冊(cè);劉姍姍;李琛;鄭嶸;孫宏晨;吳立鵬;;促紅細(xì)胞生成素促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨分化的實(shí)驗(yàn)研究[J];口腔頜面外科雜志;2014年01期

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6 伍吉云;魏慈照;徐悅青;劉路寬;張洋萍;魏楚蓉;毛慕華;羅友根;;硫化氫對(duì)氧糖剝奪/復(fù)氧誘導(dǎo)小鼠腦皮層神經(jīng)元損傷的體外觀察[J];解剖學(xué)報(bào);2014年03期

7 李進(jìn)營;黃啟輝;陶彥谷;;腦還丹對(duì)APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠海馬區(qū)學(xué)習(xí)記憶功能及細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響[J];新中醫(yī);2014年06期

8 張曉紅;徐之良;;重組人促紅細(xì)胞生成素對(duì)足月兒中重度缺氧缺血性腦病療效的Meta分析[J];中國生化藥物雜志;2014年08期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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2 王亮;紅細(xì)胞生成素對(duì)缺血再灌注急性腎損傷中炎癥反應(yīng)的作用初探[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2009年

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4 孫慧清;早產(chǎn)兒主要嚴(yán)重并發(fā)癥防治措施研究[D];鄭州大學(xué);2014年

5 劉曉巖;Ghrelin對(duì)高糖誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡的抑制作用及其機(jī)制探討[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姚揚(yáng)明;促紅細(xì)胞生成素對(duì)O-2A祖細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[D];蘇州大學(xué);2013年

2 敖利;淺低溫聯(lián)合IGF-1對(duì)大鼠全腦缺血再灌注損傷PI3K/Akt信號(hào)通路的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

3 劉波;天麻素抗大鼠腦缺血再灌注損傷作用及機(jī)制研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2013年

4 吳葉娟;胰島素樣生長(zhǎng)因子-1對(duì)缺氧缺血性腦損傷新生小鼠腦細(xì)胞線粒體膜電位的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

5 狄浩浩;紅細(xì)胞生成素受體在糖尿病視網(wǎng)膜病變視網(wǎng)膜前膜上的表達(dá)[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

6 孫玉梅;血清NSE與HIE臨床分度及預(yù)后相關(guān)性的探討[D];大連醫(yī)科大學(xué);2013年

7 趙文博;重組人促紅細(xì)胞生成素對(duì)大鼠急性缺血肢體模型的神經(jīng)保護(hù)作用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

8 馬瑜;西洋參莖葉總皂苷對(duì)β-樣淀粉蛋白誘導(dǎo)的EOC2細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制的研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2013年

9 王洪超;α-硫辛酸對(duì)杏仁核電點(diǎn)燃慢性癲癇大鼠海馬CaMKⅡa表達(dá)的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

10 李婷;EPO對(duì)宮內(nèi)感染腦白質(zhì)損傷新生大鼠腦組織MBP、CD68表達(dá)的影響及神經(jīng)行為學(xué)觀察[D];青島大學(xué);2014年


  本文關(guān)鍵詞:rhEPO對(duì)宮內(nèi)炎癥致新生大鼠腦白質(zhì)損傷腦組織NMDA R1mRNA及EPOR表達(dá)水平的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào):497761

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