本文關鍵詞：rhEPO對宮內炎癥致新生大鼠腦白質損傷腦組織NMDA R1mRNA及EPOR表達水平的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討重組人促紅細胞生成素(recGinbinant human erythropoietin,rhEPO)對宮內感染導致的新生鼠腦白質損傷(white matter damage,WMD)的保護作用及有效治療療程。方法選取12只孕15天的Wistar大鼠,將大鼠按3:1比例隨機分成LPS組(n=9)和對照組(n=3),妊娠第15天LPS組行腹腔注射脂多糖(LPS 0.3mg/Kg)建立宮內感染模型,對照組注射等量的無菌生理鹽水(約0.2ml)。分娩胎鼠后,兩組分別隨機取胎盤(n=6)和胎鼠腦組織(n=10)予蘇木素-伊紅(Hematoxylin Eosin,HE)染色觀察胎盤及腦組織病理改變,同時隨機選取LPS組新生鼠64只,對其重新分組為:RhEPO治療組(n=32)于生后每日腹腔注射rhEPO 5000IU/kg,感染對照組(n=32)于生后每日腹腔注射等量無菌生理鹽水0.2ml。并隨機選取對照組中新生鼠32只為空白對照組,于生后每日腹腔注射等量無菌生理鹽水0.2ml,三組在生后第0小時、3天、7天、14天四個時間點各隨機選取8只斷頭取腦。利用ELISA方法檢測腦組織中EPOR蛋白水平及RT-PCR檢測腦組織中NMDA R1mRNA表達水平。結果1.14只孕鼠注射LPS后死亡2只,死亡率為18.2%;其中LPS組孕鼠均于孕19.0-20.5天分娩,早產分娩率100%;對照組孕鼠均于孕22.0-22.5天生產仔鼠。2.脂多糖組孕鼠胎盤典型病理變化見明顯的炎性侵潤。脂多糖組新生鼠腦白質染色淡、結構疏松;神經纖維粗細不均,走向紊亂,出現(xiàn)核固縮表現(xiàn)為細胞核小、突起減少未成熟的神經元;膠質細胞數(shù)量增多。3.ELISA方法檢測腦組織中EPOR蛋白水平顯示:感染對照組在生后3日齡、7日齡可出現(xiàn)EPOR蛋白水平較生理水平升高持續(xù)至生后14日齡,較空白對照組差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05),rhEPO治療組在生后第3日齡EPOR蛋白水平較感染對照組顯著升高,且高水平表達保持在生后14日齡,較感染對照組差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4.RT-PCR方法檢測腦組織NMDA R1mRNA表達水平顯示:感染對照組NMDA R1mRNA表達在生后即刻上升,在第7日齡達到高峰,逐漸下降并持續(xù)表達至生后14日齡,較空白對照組差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),rhEPO治療組在生后0小時、3日齡、7日齡新生鼠腦組織NMDA R1mRNA表達水平較感染對照組明顯降低,差異具有顯著性(P〈0.05)。結論1.孕鼠腹腔內注射LPS可成功模擬宮內感染模型,并導致新生鼠出現(xiàn)腦白質損傷。2.宮內炎癥致腦白質損傷新生大鼠腦組織的NMDA過度活化,給予rhEPO治療可抑制NMDA過度活化介導的氨基酸興奮性毒性作用,促使EPOR表達上調,以減少宮內炎癥致腦組織損傷,發(fā)揮神經保護作用。3.rhEPO治療宮內感染致腦損傷應早期治療,且14天的療程目前為最佳療程。
【關鍵詞】：新生鼠 宮內感染 腦白質損傷 促紅細胞生成素 促紅細胞生成素受體 N-甲基-D-天門冬氨酸
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R722.1
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-8
• 引言8-10
• 第一章 材料和方法10-18
• 1.1 材料10-11
• 1.1.1 實驗動物10
• 1.1.2 實驗藥品和試劑10-11
• 1.1.3 主要實驗儀器及設備11
• 1.2 方法11-18
• 1.2.1 宮內感染致腦白質損傷（WMD）新生大鼠模型制作12
• 1.2.2 實驗動物分組及干預處理12-13
• 1.2.3 標本采集13
• 1.2.4 腦組織RNA的提取13-14
• 1.2.5 逆轉錄合成互補DNA(cDNA)14-15
• 1.2.6 建立RT-PCR反應體系15-16
• 1.2.7 ELISA方法檢測EPOR表達水平16-18
• 第二章 數(shù)據采集與處理18-19
• 2.1 懫用 2~(-△△ct)對 Real-time PCR 結果進行數(shù)據分析,計算公式參照公式18
• 2.2 統(tǒng)計學方法18-19
• 第三章 結果19-23
• 3.1 孕鼠分娩及新生鼠存活情況19
• 3.2 胎盤和腦組織HE染色結果19
• 3.3 EPO對宮內感染新生鼠腦組織NMDAR1mRNA表達影響19-20
• 3.4 EPO對宮內感染新生鼠腦組織EPOR蛋白水平表達影響20-23
• 第四章 結論23-24
• 第五章 討論24-28
• 5.1 宮內感染致新生大鼠腦損傷24
• 5.2 EPO/EPOR在腦白質損傷的表達24-25
• 5.3 NMDA受體在感染新生鼠腦組織中的表達25-26
• 5.4 促紅細胞生成素腦部神經系統(tǒng)保護作用26-27
• 5.5 不同療程應用EPO對感染所致新生鼠腦損傷的保護作用27-28
• 附圖表28-30
• 參考文獻30-33
• 綜述33-38
• 參考文獻38
• 參考文獻38-42
• 攻讀學位期間成果42-43
• 致謝43-44

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據庫 前8條

1 王曉進;危小良;張希;劉云奇;;重組人促紅細胞生成素預處理對體外循環(huán)手術中心肌的保護作用[J];重慶醫(yī)學;2014年10期

2 劉瑩瑩;楊一兵;湯勇;;神經營養(yǎng)因子對損傷的SGNs保護的研究進展[J];臨床醫(yī)學;2014年06期

3 宋麗麗;黃志恒;裴益玲;陳超;;圍產期反復感染對未成熟鼠腦發(fā)育的影響[J];中國當代兒科雜志;2014年12期

4 張嘉熙;史冊;劉姍姍;李琛;鄭嶸;孫宏晨;吳立鵬;;促紅細胞生成素促進骨髓基質細胞成骨分化的實驗研究[J];口腔頜面外科雜志;2014年01期

5 王瑩;劉玉剛;陳占法;;梓醇對缺糖缺氧誘導PC12細胞損傷的保護作用研究[J];河北醫(yī)藥;2014年01期

6 伍吉云;魏慈照;徐悅青;劉路寬;張洋萍;魏楚蓉;毛慕華;羅友根;;硫化氫對氧糖剝奪/復氧誘導小鼠腦皮層神經元損傷的體外觀察[J];解剖學報;2014年03期

7 李進營;黃啟輝;陶彥谷;;腦還丹對APP/PS1雙轉基因小鼠海馬區(qū)學習記憶功能及細胞內鈣離子濃度的影響[J];新中醫(yī);2014年06期

8 張曉紅;徐之良;;重組人促紅細胞生成素對足月兒中重度缺氧缺血性腦病療效的Meta分析[J];中國生化藥物雜志;2014年08期

中國博士學位論文全文數(shù)據庫 前5條

1 張峗;TLR2在骨髓間充質干細胞修復缺氧缺血性腦損傷中的作用及機制[D];重慶醫(yī)科大學;2013年

2 王亮;紅細胞生成素對缺血再灌注急性腎損傷中炎癥反應的作用初探[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2009年

3 蔣樸;高濃度氧誘導小膠質細胞活化致未成熟腦損傷及脂多糖致敏效應的研究[D];重慶醫(yī)科大學;2012年

4 孫慧清;早產兒主要嚴重并發(fā)癥防治措施研究[D];鄭州大學;2014年

5 劉曉巖;Ghrelin對高糖誘導PC12細胞凋亡的抑制作用及其機制探討[D];重慶醫(yī)科大學;2014年

中國碩士學位論文全文數(shù)據庫 前10條

1 姚揚明;促紅細胞生成素對O-2A祖細胞生物學特性的影響[D];蘇州大學;2013年

2 敖利;淺低溫聯(lián)合IGF-1對大鼠全腦缺血再灌注損傷PI3K/Akt信號通路的影響[D];河北醫(yī)科大學;2013年

3 劉波;天麻素抗大鼠腦缺血再灌注損傷作用及機制研究[D];遵義醫(yī)學院;2013年

4 吳葉娟;胰島素樣生長因子-1對缺氧缺血性腦損傷新生小鼠腦細胞線粒體膜電位的影響[D];安徽醫(yī)科大學;2013年

5 狄浩浩;紅細胞生成素受體在糖尿病視網膜病變視網膜前膜上的表達[D];天津醫(yī)科大學;2013年

6 孫玉梅;血清NSE與HIE臨床分度及預后相關性的探討[D];大連醫(yī)科大學;2013年

7 趙文博;重組人促紅細胞生成素對大鼠急性缺血肢體模型的神經保護作用[D];山西醫(yī)科大學;2013年

8 馬瑜;西洋參莖葉總皂苷對β-樣淀粉蛋白誘導的EOC2細胞損傷的保護作用及其機制的研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2013年

9 王洪超;α-硫辛酸對杏仁核電點燃慢性癲癇大鼠海馬CaMKⅡa表達的影響[D];河北醫(yī)科大學;2014年

10 李婷;EPO對宮內感染腦白質損傷新生大鼠腦組織MBP、CD68表達的影響及神經行為學觀察[D];青島大學;2014年

  本文關鍵詞：rhEPO對宮內炎癥致新生大鼠腦白質損傷腦組織NMDA R1mRNA及EPOR表達水平的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：497761