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關(guān)于胃食管反流與支氣管哮喘的關(guān)系的實驗研究

發(fā)布時間:2017-06-27 10:11

  本文關(guān)鍵詞:關(guān)于胃食管反流與支氣管哮喘的關(guān)系的實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的探討胃食管反流能否導(dǎo)致類似哮喘樣變化以及加重支氣管哮喘可能的機制 方法 1、隨機將選擇的100只雄性小鼠平均分成為5組。A組:哮喘對照組,B組:胃食管反流對照組,C組:胃食管反流組,D組:哮喘組,E組:胃食管反流合并哮喘組。A組,用生理鹽水進行霧化吸入并腹腔注射;B組,用生理鹽水進行灌胃;C組,第1天開始每天予以一次1毫升的0.5%的胃蛋白酶(Pepsin)與0.1mmol/L的鹽酸(HCL)溶液緩慢灌注,Ph值為3.0,連續(xù)21天;D組、E組,于第1、8、15天,用新鮮配制的20μg卵清蛋白(ovalbumin, OVA)+lmg氫氧化鋁(Al(OH)3)共0.2ml,腹腔注射致敏,并于第22天開始予每天1次,每次30分鐘予以2%OVA生理鹽水溶液霧化吸入,每天1次,連續(xù)7天。E組,從第16天開始,在腹腔注射基礎(chǔ)上,每天灌注1次,每次30分鐘的0.5%的胃蛋白酶(Pepsin)與0.1mmol/L的鹽酸(HCL)溶液,連續(xù)21天。 2、D組、E組在卵清蛋白(OVA)攻擊結(jié)束之后,再一次持續(xù)霧化吸入30分鐘的OVA生理鹽水(10mg/ml)溶液,予以組胺在小鼠末次灌胃結(jié)束的24小時內(nèi),激發(fā)哮喘。 3、對氣道阻力在各組小鼠中的變化進行監(jiān)測,并觀察小鼠氣道反應(yīng)性的變化;鏡檢肺泡灌洗液涂片,計數(shù)嗜酸性粒細胞以及中性粒細胞在灌洗液細胞總數(shù)中所占比例;觀察HE染色后的肺組織及食管病理切片的病理形態(tài)變化;對脾臟中的IFN-γ, IL-4,以及Th1/Th2比例變化,應(yīng)用流式細胞分析儀進行檢測。 結(jié)果 1、支氣管激發(fā)試驗后小鼠氣道阻力的變化,A組和B組小鼠無氣道高反應(yīng)發(fā)生,C組、D組、E組均有氣道高反應(yīng)性發(fā)生,與A組、B組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);E組的氣道阻力明顯高于C組、D組,差異比較,有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);C與D組比較差異不明顯,無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 2、各組小鼠IL-4值比較:A組、B組間比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與A組、B組相比較,小鼠的IL-4值在C組、D組和E組中明顯增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);C組、D組低于E組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);C組與D組比較,D組略比C組高,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 3、各組小鼠IFN-γ比較:C組、D組、E組與A組、B組比較,IFN-γ顯著降低,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),E組低于C組、D組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),A組與B組、C組與D組之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 4、各組小鼠Thl/Th2比值比較:A組與B組,C組與D組、E組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),C組、D組、E組比值下降,與A組與B組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),E組較C組、D組比值下降明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),C組與D組之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 5、各組小鼠BALF中EOS數(shù)比較:A組、B組偶見單個EOS,C組、D組、E組可見大量的EOS,與A組、B組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),E組與C組、D組比較,EOS數(shù)占細胞總數(shù)百分比明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。A組、B組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),D組EOS數(shù)占細胞總數(shù)百分比高于C組,但比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 6、各組小鼠肺組織及食管病理切片:C組、D組、E組可見管腔變形、上皮細胞脫落、基底膜增厚,周圍可見炎性細胞浸潤,粘膜下層可見血管充血阻塞、水腫,肺泡腔擴張、肺泡壁變薄、斷裂。A組、B組支氣管管腔規(guī)則,管壁主要是假復(fù)層纖毛柱狀上皮細胞,無炎癥細胞浸潤。C組、E組食管病理切片可見下段食管粘膜下水腫明顯,伴有炎性細胞浸潤,角化亢進,其余各組未見病理變化。 結(jié)論 1、胃食管反流可以引起氣道反應(yīng)性升高。 2、胃食管反流可以引起小鼠氣道內(nèi)的以嗜酸性粒細胞及中性粒細胞為主的浸潤。 3、胃食管反流可以引起小鼠氣道發(fā)生類似哮喘樣變化的病理改變。 4、胃食管反流可以引起小鼠IFN-r明顯下降及IL-4顯著升高。 5、胃食管反流可以引起哮喘小鼠Thl/Th2比值顯著下降。 6、胃食管反流合并哮喘組小鼠與單純的胃食管反流組及哮喘組小鼠相比較,氣道反應(yīng)性、嗜酸性粒細胞、淋巴細胞和中性粒細胞浸潤、氣道內(nèi)類似哮喘樣變化的病理改變及IL-4、IFN-Γ及Th1/Th2的變化更明顯。
【關(guān)鍵詞】:胃食管反流 支氣管哮喘 氣道反應(yīng)性 IL-4 IFN-γ Th1/Th2
【學(xué)位授予單位】:延邊大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R725.7;R725.6
【目錄】:
  • 摘要7-9
  • Abstract9-12
  • 第一章 緒論12-14
  • 第二章 材料與方法14-18
  • 2.1 材料14
  • 2.2 實驗設(shè)計與方法14-18
  • 第三章 結(jié)果18-23
  • 3.1 動物情況18
  • 3.2 氣道反應(yīng)性18
  • 3.3 嗜酸性粒細胞(EOS)和中性粒細胞在支氣管肺泡灌洗液(BALF)中的計數(shù)18-19
  • 3.4 病理學(xué)改變19-20
  • 3.5 脾臟細胞IFN-γ、IL-4、以及Th1/Th2的變化20-23
  • 第四章 討論23-28
  • 4.1 胃食管反流對小鼠氣道反應(yīng)性的影響25-26
  • 4.2 胃食管反流對BALF中EOS的影響26
  • 4.3 胃食管反流對肺組織病理學(xué)改變的影響26-27
  • 4.4 胃食管反流對Th1/Th2比值變化的影響27-28
  • 第五章 結(jié)論28-29
  • 致謝29-30
  • 參考文獻30-33
  • 綜述33-50
  • 參考文獻46-50

【參考文獻】

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本文編號:489398

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