發(fā)布時間：2017-06-26 13:02

  本文關(guān)鍵詞：促紅細(xì)胞生成素對腦白質(zhì)軟化新生鼠膠質(zhì)纖維酸性蛋白和神經(jīng)行為學(xué)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景 隨著圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)及新生兒重癥監(jiān)護(hù)技術(shù)的發(fā)展，早產(chǎn)兒存活率較前明顯增加，隨之而來的是早產(chǎn)兒腦損傷的發(fā)病率的升高。這一問題已愈來愈受到關(guān)注，早產(chǎn)兒腦損傷的發(fā)病機(jī)制已成為醫(yī)學(xué)界研究的熱點。早產(chǎn)兒腦室周圍白質(zhì)軟化（periventricularleukomalacia，PVL）是早產(chǎn)兒最常見的腦損傷類型，可引起痙攣性腦性癱瘓、認(rèn)知及行為學(xué)異常等后遺癥。促紅細(xì)胞生成素（Erythropoietin，EPO）作為造血因子除了用于早產(chǎn)兒貧血的治療外，在早產(chǎn)兒腦損傷中也具有神經(jīng)保護(hù)作用。故本實驗通過對3日齡SD大鼠單側(cè)頸總動脈結(jié)扎+缺氧建立PVL模型的基礎(chǔ)上給予EPO進(jìn)行干預(yù)，從病理形態(tài)學(xué)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）免疫組織化學(xué)及遠(yuǎn)期神經(jīng)行為學(xué)試驗檢測大鼠的神經(jīng)運動功能、情感能力和Y-迷宮刺激試驗檢測學(xué)習(xí)和記憶情況從而探索EPO對PVL新生鼠的神經(jīng)保護(hù)作用。 目的 通過對3日齡新生鼠腦室周圍白質(zhì)軟化模型的建立探討EPO對早產(chǎn)腦白質(zhì)損傷鼠的神經(jīng)保護(hù)作用，為臨床早期干預(yù)早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷提供一定的理論依據(jù)。 方法 150只3日齡（P3）SD大鼠隨機(jī)分為對照組和實驗組，實驗組又分為實驗1組（EPO治療組）和實驗2組（PVL組）。對照組僅分離左側(cè)頸總動脈，不結(jié)扎不缺氧。實驗組大鼠結(jié)扎左側(cè)頸總動脈，于術(shù)后在6%氧氣+94%氮氣混合氣中缺氧2.5小時。實驗1組（EPO治療組）在實驗組基礎(chǔ)上腹腔注射EPO5000U/kg而實驗2組（PVL組）在實驗組基礎(chǔ)上腹腔注射等量的生理鹽水。分別于術(shù)后3d、7d、14d、21d測量體質(zhì)量后斷頭取腦測量腦重量、腦質(zhì)量損傷百分比，石蠟包埋切片行常規(guī)HE染色、GFAP免疫組化，剩下的大鼠于生后30d進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)試驗（懸吊試驗、曠場試驗）和Y-迷宮刺激試驗分別檢測大鼠遠(yuǎn)期的神經(jīng)運動功能、情感能力和學(xué)習(xí)記憶情況。 結(jié)果 1.行為學(xué)：對照組大鼠術(shù)后無明顯行為改變，PVL組和EPO組大鼠缺血缺氧后均出現(xiàn)異常行為學(xué)改變，EPO組大鼠主要表現(xiàn)為嗜睡，較易激惹，部分鼠偏向一側(cè)爬行或不能翻身，吃奶及活動稍減少，動作不協(xié)調(diào)，，PVL組不僅表現(xiàn)為嗜睡，易激惹，大多數(shù)鼠偏向一側(cè)爬行或不能翻身，吃奶及活動明顯減少，有的可見全身發(fā)紺，躁動不安，四肢抽動，甚至死亡。 2.體質(zhì)量增長：術(shù)后3d、7d及14d PVL組術(shù)后體質(zhì)量增長明顯落后于EPO組和對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義[術(shù)后3d：（9.8±0.62）比（11.7±0.80）、（13.8±0.41），術(shù)后7d：（12.1±0.46）比（16.1±0.62）、（18.2±0.53），術(shù)后14d：（23.5±0.89）比（28.4±0.62）、（33.8±0.71），P均0.05]； 3.腦質(zhì)量/體質(zhì)量：術(shù)后1d PVL組及EPO組大鼠腦質(zhì)量/體質(zhì)量均大于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義[（5.37±0.38）、（3.83±0.22）比（2.92±0.32），P0.01]，術(shù)后21dPVL組及EPO組大鼠腦質(zhì)量/體質(zhì)量均小于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義[（2.61±0.11）、（2.81±0.07）比（3.70±0.05），P0.01]； 4.腦質(zhì)量損傷%：PVL組和EPO組各時間點的腦質(zhì)量損傷%隨著日齡的增加而增大，且術(shù)后1d、7d及21d腦質(zhì)量損傷%均大于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義[術(shù)后1d（：27.74±7.25）、（13.36±5.40）比（0.29±0.47），術(shù)后7d：（37.65±8.12）、（25.32±6.51）比（0.37±0.17），術(shù)后21d：（40.95±11.34）、（34.38±10.37）比（0.18±0.08），P均0.05]； 5.HE染色：HE染色示術(shù)后7d對照組結(jié)構(gòu)正常，皮質(zhì)下白質(zhì)及胼胝體神經(jīng)纖維束形態(tài)及走向清晰，PVL組可見皮質(zhì)下及胼胝體結(jié)構(gòu)松散，胼胝體神經(jīng)纖維束紊亂、呈現(xiàn)疏松網(wǎng)狀，EPO治療組皮質(zhì)下結(jié)構(gòu)基本正常，胼胝體神經(jīng)纖維束走向較清晰，胼胝體神經(jīng)纖維束結(jié)構(gòu)基本正常；術(shù)后21d對照組側(cè)腦室正常，EPO組側(cè)腦室三角區(qū)稍微擴(kuò)大，PVL組側(cè)腦室三角區(qū)擴(kuò)大明顯； 6.免疫組織化學(xué)：免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示術(shù)后3d與對照組、EPO組相比PVL組GFAP陽性細(xì)胞數(shù)目出現(xiàn)增多（P0.05），術(shù)后7d與對照組相比EPO組和PVL組GFAP陽性細(xì)胞均明顯增多（P0.05），且PVL組增多更為明顯（P0.05）；術(shù)后14d EPO組與PVL組GFAP陽性細(xì)胞數(shù)開始回落，但仍多于對照組（P0.05），PVL組陽性細(xì)胞數(shù)仍然比EPO組多（P0.05），術(shù)后21d各組GFAP陽性細(xì)胞數(shù)基本回落至正常水平； 7.神經(jīng)行為學(xué)試驗:神經(jīng)行為學(xué)試驗懸吊試驗中PVL組鼠大部分反應(yīng)遲鈍，很少有肢體活動，極易從玻璃棒上掉下，PVL組及EPO組大鼠懸吊試驗的分?jǐn)?shù)均低于對照組大鼠，差異有統(tǒng)計學(xué)意義[（1.00±0.76）、（2.38±0.91）比（3.87±0.83），P0.05]，曠場試驗中PVL組鼠大部分行為及其遲緩，穿越方格數(shù)很少，分?jǐn)?shù)均低于對照組及EPO組且具有統(tǒng)計學(xué)意義[（5.00±1.20）比（7.37±0.92）、（10.12±1.24），P0.05]； 8.Y迷宮試驗:Y迷宮試驗中PVL組及EPO組所需訓(xùn)練次數(shù)較對照組多且有統(tǒng)計學(xué)差異[（31.25±2.60）、（25.1±1.89）比（19.63±3.38），P0.05]，24小時后記憶保持率PVL組相比EPO組、對照組低且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義[（43.0±5.65）比（56.4±9.18）、（75.4±5.51），P0.05]，以PVL組24小時后記憶保持率最低。 結(jié)論 1.通過對3日齡SD大鼠行單側(cè)頸總動脈結(jié)扎+缺氧2.5h可成功構(gòu)建PVL模型； 2.腦白質(zhì)軟化時GFAP陽性細(xì)胞表達(dá)增加，且損傷后3d開始出現(xiàn)，7d達(dá)高峰期，損傷后21天基本回落至低表達(dá)水平； 3.EPO能減少腦白質(zhì)軟化后GFAP陽性細(xì)胞的表達(dá)，在神經(jīng)細(xì)胞損傷的修復(fù)中起到一定的作用； 4. EPO能在一定程度上改善腦白質(zhì)軟化后大鼠的隨意運動功能障礙及情感能力異常，提升學(xué)習(xí)和記憶能力。
【關(guān)鍵詞】：促紅細(xì)胞生成素 腦白質(zhì)軟化 膠質(zhì)纖維酸性蛋白 神經(jīng)行為學(xué) Y迷宮
【學(xué)位授予單位】：廣州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R722.6
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-11
• 中英文對照詞匯11-12
• 前言12-18
• 材料和方法18-28
• 結(jié)果28-37
• 討論37-44
• 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-52
• 綜述52-63
• 參考文獻(xiàn)59-63
• 在校期間發(fā)表的論文63-64
• 致謝64-65

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：促紅細(xì)胞生成素對腦白質(zhì)軟化新生鼠膠質(zhì)纖維酸性蛋白和神經(jīng)行為學(xué)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：486195