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BMP9和13對C3H10T1/2細胞心肌樣分化及改善心梗后大鼠心功能的影響

發(fā)布時間:2024-12-26 04:24
  第一部分重組腺病毒BMP9,BMP13的擴增及分別轉(zhuǎn)染C3H10T1/2細胞 目的:利用重組腺病毒BMP9,BMP13和GFP的病毒原液分別轉(zhuǎn)染HEK293細胞從而反復擴增獲得高滴度的重組腺病毒BMP9,BMP13和GFP,利用AdEasy-BMP9,AdEasy-BMP13, AdEasy-BMPGFP轉(zhuǎn)染C3H10T1/2細胞使其分別過表達BMP9和BMP13基因。并以新生C3H小鼠的原代心肌細胞作為實驗陽性對照,未處理的C3H10T1/2細胞作為空白組。 方法:利用HEK293細胞反復擴增獲得高滴度的重組腺病毒BMP9,BMP13和GFP。以C3H新生小鼠(1-3d)原代培養(yǎng)心肌細胞作為實驗陽性對照。復蘇后傳代培養(yǎng)的C3H10T1/2細胞于倒置顯微鏡下觀察,當觀察到視野中的細胞生長融合達70%左右時,將AdEasy-BMP9, AdEasy-BMP13, AdEasy-GFP加入培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)染C3H10T1/2細胞,利用熒光顯微鏡下估算和流式細胞技術直接檢測兩種方法明確各腺病毒轉(zhuǎn)染組細胞的轉(zhuǎn)染效率,并利用實時熒光定量PCR測定各組細胞中BMP9,BMP13的表達情況。 結(jié)...

【文章頁數(shù)】:113 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
符號說明
摘要
ABSTRACT
前言
    參考文獻
第一部分 重組腺病毒 BMP9,BMP13 的擴增及分別轉(zhuǎn)染 C3H10T1/2 細胞
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
    參考文獻
第二部分 BMP9 及 BMP13 在體外對 C3H10T1/2 細胞心肌樣分化的影響及其差異
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
    參考文獻
第三部分 BMP9和13轉(zhuǎn)染后C3H10T1/2細胞對心梗后大鼠心功能的影響及其差異
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
    參考文獻
全文總結(jié)
    參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
致謝
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本文編號:4020528

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