第一部分重組腺病毒BMP9，BMP13的擴(kuò)增及分別轉(zhuǎn)染C3H10T1/2細(xì)胞 目的：利用重組腺病毒BMP9，BMP13和GFP的病毒原液分別轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞從而反復(fù)擴(kuò)增獲得高滴度的重組腺病毒BMP9，BMP13和GFP，利用AdEasy-BMP9，AdEasy-BMP13, AdEasy-BMPGFP轉(zhuǎn)染C3H10T1/2細(xì)胞使其分別過表達(dá)BMP9和BMP13基因。并以新生C3H小鼠的原代心肌細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)陽性對(duì)照，未處理的C3H10T1/2細(xì)胞作為空白組。 方法：利用HEK293細(xì)胞反復(fù)擴(kuò)增獲得高滴度的重組腺病毒BMP9，BMP13和GFP。以C3H新生小鼠（1-3d）原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)陽性對(duì)照。復(fù)蘇后傳代培養(yǎng)的C3H10T1/2細(xì)胞于倒置顯微鏡下觀察，當(dāng)觀察到視野中的細(xì)胞生長融合達(dá)70%左右時(shí)，將AdEasy-BMP9， AdEasy-BMP13, AdEasy-GFP加入培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)染C3H10T1/2細(xì)胞，利用熒光顯微鏡下估算和流式細(xì)胞技術(shù)直接檢測(cè)兩種方法明確各腺病毒轉(zhuǎn)染組細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，并利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定各組細(xì)胞中BMP9，BMP13的表達(dá)情況。 結(jié)...

【文章頁數(shù)】：113 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
符號(hào)說明
摘要
ABSTRACT
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 重組腺病毒 BMP9，BMP13 的擴(kuò)增及分別轉(zhuǎn)染 C3H10T1/2 細(xì)胞
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第二部分 BMP9 及 BMP13 在體外對(duì) C3H10T1/2 細(xì)胞心肌樣分化的影響及其差異
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三部分 BMP9和13轉(zhuǎn)染后C3H10T1/2細(xì)胞對(duì)心梗后大鼠心功能的影響及其差異
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
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