目的： 探討IUGR幼鼠胰腺組織增殖和凋亡,肝臟mTOR/S6K通路及肝糖異生關(guān)鍵酶的變化與幼鼠IR發(fā)生的關(guān)系及營(yíng)養(yǎng)干預(yù)的影響。 方法： 1.采用孕鼠妊娠期全程低蛋白飲食的方法建立IUGR幼鼠模型。通過控制每只母鼠喂哺幼鼠的個(gè)數(shù),達(dá)到早期營(yíng)養(yǎng)干預(yù)的目的。通過對(duì)3周齡和7周齡幼鼠進(jìn)行腹腔葡萄糖耐量試驗(yàn)評(píng)價(jià)胰島素敏感性。 2.應(yīng)用Real-time PCR方法測(cè)定IUGR幼鼠出生時(shí),1周齡,3周齡和7周齡胰腺組織中增殖指標(biāo)PDX-1和凋亡指標(biāo)caspase-3,bax和bcl-2mRNA表達(dá)。 3.應(yīng)用Western Blot方法測(cè)定IUGR幼鼠出生時(shí),3周齡和7周齡肝臟組織中mTOR/S6K,IRS-1以及p-IRS-1的蛋白表達(dá)。 4.應(yīng)用Real-time PCR方法測(cè)定IUGR幼鼠出生時(shí),1周齡,3周齡和7周齡肝臟組織中PGC-1α和糖異生關(guān)鍵酶PEPCK和G-6-Pase mRNA表達(dá)。 5.數(shù)據(jù)采用SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果： 1.妊娠期全程低蛋白飲食母鼠(LPM)在妊娠第8天,第15天和分娩前體重均明顯低于對(duì)照組(CM),P<0.01。并且LPM體重呈現(xiàn)...

【文章頁(yè)數(shù)】：104 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、IUGR幼鼠模型建立與幼鼠胰島功能評(píng)價(jià)
    1.1 對(duì)象與方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        1.1.3 主要試劑
        1.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
        1.1.5 胰島素敏感指數(shù)和胰島素抵抗指數(shù)的計(jì)算
        1.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 不同營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)對(duì)母鼠妊娠,體重變化和幼鼠數(shù)量的影響
        1.2.2 幼鼠體重,鼻臀長(zhǎng)和尾長(zhǎng)的變化
        1.2.3 3組幼鼠3周齡和7周齡時(shí)腹腔葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)
        1.2.4 3組幼鼠間胰島素抵抗指數(shù)和胰島素敏感指數(shù)的比較
    1.3 討論
        1.3.1 動(dòng)物模型的建立
        1.3.2 營(yíng)養(yǎng)干預(yù)對(duì)IUGR幼鼠胰島素敏感性的影響
    1.4 小結(jié)
二、營(yíng)養(yǎng)干預(yù)對(duì)IUGR幼鼠胰腺凋亡和增殖的影響
    2.1 對(duì)象與方法
        2.1.1 胰腺組織的制備
        2.1.2 試劑
        2.1.3 主要儀器和設(shè)備
        2.1.4 各種引物
        2.1.5 胰腺組織總mRNA提取
        2.1.6 提取mRNA質(zhì)量鑒定
        2.1.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        2.1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 3組幼鼠不同周齡PDX-1mRNA表達(dá)
        2.2.2 3組幼鼠不同周齡擦傷caspase-3mRNA表達(dá)
        2.2.3 3組幼鼠不同周齡bc1-2 mRNA表達(dá)
        2.2.4 3組幼鼠不同周齡bax mRNA表達(dá)
    2.3 討論
        2.3.1 凋亡和凋亡蛋白
        2.3.2 PDX-1與胰腺增殖
        2.3.3 營(yíng)養(yǎng)干預(yù)對(duì)IUGR幼鼠胰腺凋亡和增殖的影響
        2.3.4 展望
    2.4 小結(jié)
三、肝臟胰島素受體后通路與IUGR幼鼠IR相關(guān)研究
    3.1 對(duì)象與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
        3.1.2 主要儀器和設(shè)備
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 主要溶液和緩沖液的配置
        3.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 3組幼鼠不同周齡mTOR,S6K,IRS-1和p-IRS-1ser636的蛋白表達(dá)
        3.2.2 3組幼鼠不同周齡PGC-1αmRNA,G-6-PasemRNA和PEPCK mRNA的表達(dá)
    3.3 討論
        3.3.1 胰島素受體后通路
        3.3.2 mTOR和胰島素抵抗
        3.3.3 PGC-1α和肝臟糖異生與胰島素抵抗
        3.3.4 肝臟胰島素受體后通路與IUGR幼鼠胰島素抵抗
        3.3.5 展望
    3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3972008