發(fā)布時(shí)間：2024-03-20 23:36

　　目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究BMSC對(duì)白血病細(xì)胞的保護(hù)作用,通過(guò)檢測(cè)VLA-4抗體干預(yù)后白血病細(xì)胞凋亡率的改變,研究VLA-4抗體對(duì)BMSC保護(hù)作用的影響;通過(guò)檢測(cè)抗凋亡基因Survivin、Bcl-2的表達(dá)變化,進(jìn)一步闡明可能機(jī)制,為深入研究?jī)和籽〖捌渑R床治療提供理論依據(jù)。 方法:一、收集白血病兒童骨髓標(biāo)本,并進(jìn)行分離培養(yǎng),提取BMSC與白血病細(xì)胞并用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài);實(shí)驗(yàn)選第2代的BMSC和第4⁶代的白血病細(xì)胞。二、采用熒光染色、流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,研究BMSC對(duì)白血病細(xì)胞的保護(hù)作用及VLA-4抗體對(duì)其保護(hù)作用影響;三、應(yīng)用RT-PCR法研究各組白血病細(xì)胞Survivin、Bcl-2基因的表達(dá)情況,從基因水平來(lái)說(shuō)明BMSC、VLA-4抗體、化療藥物三者之間的關(guān)系以及它們對(duì)白血病細(xì)胞凋亡的影響。 結(jié)果:一、體外單獨(dú)培養(yǎng)原代白血病細(xì)胞生存時(shí)間較短,生長(zhǎng)狀態(tài)欠佳;在BMSC存在情況下,其生存時(shí)間延長(zhǎng),狀態(tài)比較好。二、BMSC組的凋亡率低于白血病細(xì)胞組(P<0.05);抗體組、抗體加藥物組白血病細(xì)胞凋亡率較BMSC組明顯增高(P<0....

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1原代細(xì)胞的形態(tài)觀察a：分離的單個(gè)核細(xì)胞（200×）；b：分離出的白血病細(xì)胞（200×）

圖2-1原代細(xì)胞的形態(tài)觀察a：分離的單個(gè)核細(xì)胞（200×）；b：分離出的白血病細(xì)胞（200×）Fig2-1Themorphousofprimarygenerationcellsa:mononuclearcellswerejustbesegregate....

圖2-2骨髓基質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)觀察a：原代BMSC（200×）；b：第二代BMSC（200×）

圖2-1原代細(xì)胞的形態(tài)觀察a：分離的單個(gè)核細(xì)胞（200×）；b：分離出的白血病細(xì)胞（200×）Fig2-1Themorphousofprimarygenerationcellsa:mononuclearcellswerejustbesegregate....

圖2-3BMSC和白血病細(xì)胞共培養(yǎng)a：剛分離的白血病細(xì)胞；b：共培養(yǎng)2天；c：共培養(yǎng)5天；d：共培養(yǎng)12天

-12-圖2-3BMSC和白血病細(xì)胞共培養(yǎng)a：剛分離的白血病細(xì)胞；b：共培養(yǎng)2天；c：共培養(yǎng)5天；d：共培養(yǎng)12天。（a、b、c：200×，d：400×）Fig2-3Theco-cultureofBMSCandleukemiccellsa:....

圖3--I共培養(yǎng)l壓各組白血病細(xì)胞流式細(xì)胞儀結(jié)果

組別AnnexinⅤ+/PI-AnnexinⅤ+/PI+AnnexinⅤ+/PI+andAnnexinⅤ+/PI-白血病細(xì)胞組10.51±1.98☆7.27±0.78☆17.78±2.17☆BMSC組4.99±1.663.27±1.228.26±1.22上....

本文編號(hào)：3933475