發(fā)布時間：2017-05-17 05:03

  本文關(guān)鍵詞：探索MicroRNA-206治療BPD小鼠效果，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討mi R-206對高氧導(dǎo)致昆明白色小鼠BPD的干預(yù)效果。方法:小鼠持續(xù)暴露于高濃度氧環(huán)境建立BPD小鼠模型,預(yù)定4窩剛出生昆白小鼠,分為高氧對照組(O2)、高氧mi R-206處理組(206)、高氧空白質(zhì)粒對照組(NC)和空氣對照組(Air),隨機(jī)分配,每組約8只,高氧環(huán)境的3組小鼠共養(yǎng)于同一養(yǎng)殖箱內(nèi),氧氣濃度維持在80%左右。生后每周稱體重并觀察記錄小鼠一般狀態(tài);生后第20日齡開始高氧mi R-206處理組、高氧空白質(zhì)粒對照組開始干預(yù)治療和干預(yù)對照處理共2周療程,最后一次治療3天后于小鼠苯巴比妥鈉麻醉,進(jìn)行眼眶采血,離心取血清保存于-80℃。開胸取肺,對稱部位取肺組織分別保存標(biāo)本于4%多聚甲醛溶液、液氮、-20℃冰箱。試驗中主要應(yīng)用的試驗方法有肺組織石蠟切片HE染色、馬森三色染色、輻射狀肺泡計數(shù)(radial alveolar counts,RAC)及ELISA、Real-time PCR和肺組織冰凍切片免疫熒光等技術(shù)。結(jié)果:1.重組mmu-mi R-206質(zhì)粒經(jīng)尾靜脈高壓注射入小鼠體內(nèi)后,RT-PCR檢測肺組織mi R-206的m RNA表達(dá),與NC組和O2組相比206組mi R-206 m RNA表達(dá)增加,P0.01,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。證明本實驗該外源基因成功導(dǎo)入。2.206組較NC組和O2組小鼠體重?zé)o統(tǒng)計學(xué)差別,但206組小鼠離氧后活動耐力較NC組和O2組好;mi R-206組與Air組相比肺濕重高、干濕重比低,但與NC組和O2組相比肺濕重明顯下降、干濕重比較高,P0.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;肺組織病理切片觀察發(fā)現(xiàn):NC組和O2組肺泡大小不等,肺泡間隔炎細(xì)胞浸潤、增寬,甚至呈塊狀,臟膜下炎性反應(yīng)明顯,甚至有纖維化傾向;Air組織結(jié)構(gòu)正常、肺泡大小均一,無炎細(xì)胞浸潤;206組較NC組和O2組炎性反應(yīng)低,臟膜下無明顯炎性反應(yīng),但馬森三色染色顯示肺間質(zhì)膠原蛋白沉積物無明顯差異。3.206組小鼠血清IL-6、TGF-β濃度較NC組低,P0.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。PCR試驗顯示FN1基因的m RNA表達(dá)下降,而免疫熒光顯示FN1的蛋白表達(dá)量無明顯下降。結(jié)論:本研究小鼠尾靜脈注射重組質(zhì)粒mmu-mir-206,使小鼠肺組織mi R-206表達(dá)上調(diào),通過下調(diào)前炎性因子IL-6水平抑制炎癥反應(yīng)擴(kuò)大,并進(jìn)一步使FN1基因的m RNA表達(dá)下降,分子水平上顯示肺纖維化有改善趨勢。因干預(yù)治療起始時間遲和持續(xù)治療時間短,病理組織結(jié)構(gòu)上尚無得到明顯改善,可能說明mi R-206抗纖維化作用具有時間依賴性;同時mi R-206的上調(diào)伴隨血清TGF-β水平下降。
【關(guān)鍵詞】：小鼠 尾靜脈注射 miR-206 IL-6 TGF-β BPD
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R722
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 常用縮寫詞中英文對照表10-11
• 前言11-12
• 1 材料與方法12-21
• 1.1 常規(guī)分子生物學(xué)試劑12
• 1.2 實驗設(shè)備及特殊試劑12-14
• 1.3 動物實驗14-15
• 1.4 實驗方法15-21
• 2 結(jié)果21-29
• 2.1 小鼠一般情況21-22
• 2.2 各組小鼠每周體重比較22
• 2.3 肺組織結(jié)構(gòu)形態(tài)22-24
• 2.4 肺組織冰凍切片免疫熒光染色24
• 2.5 肺組織miR-206 及FN1 基因miRNA206、mRNA表達(dá)量24-28
• 2.6 ELISA檢測血清中IL-6、TGF-β結(jié)果28-29
• 3 討論29-34
• 4 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-40
• 綜述40-50
• 參考文獻(xiàn)44-50
• 致謝50-51
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果51-52
• 個人簡歷52

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 孔令凱;章晟;封志純;;支氣管肺發(fā)育不良的研究進(jìn)展[J];實用兒科臨床雜志;2012年14期

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  本文關(guān)鍵詞：探索MicroRNA-206治療BPD小鼠效果，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：372566