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OGD/R星形膠質(zhì)細(xì)胞DNMT3a、tPA表達(dá)與凋亡變化及腺苷甲硫氨酸的干預(yù)作用

發(fā)布時(shí)間:2022-02-27 09:10
  目的觀察糖氧剝奪/復(fù)氧復(fù)糖(OGD/R)大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞中DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNMT) 3a、組織型纖溶酶原激活物(tPA)表達(dá)與細(xì)胞凋亡變化,以及S-腺苷甲硫氨酸(SAM)的干預(yù)作用。方法培養(yǎng)并鑒定大鼠皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞,將細(xì)胞分為對(duì)照組、OGD/R組、OGD/R+SAM組。對(duì)照組常規(guī)培養(yǎng)。OGD/R組、OGD/R+SAM組以缺糖缺氧3 h后再?gòu)?fù)氧復(fù)糖24 h建立OGD/R細(xì)胞模型,OGD/R+SAM組在OGD/R過程中細(xì)胞培養(yǎng)基始終保持有50μmol/L的SAM。使用DNA甲基化試劑盒檢測(cè)各組DNMT活性,采用RT-PCR法檢測(cè)各組細(xì)胞中的DNMT3a、tPA mRNA,采用Western blotting法檢測(cè)DNMT3a、tPA、Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白。結(jié)果 OGD/R組DNMT活性、DNMT3a mRNA和蛋白表達(dá)低于對(duì)照組,tPA mRNA和蛋白表達(dá)高于對(duì)照組(P均<0.05); OGD/R+SAM組DNMT活性、DNMT3a mRNA表達(dá)高于OGD/R組,tPA mRNA和蛋白表達(dá)低于OGD/R組(P均<0.05)。OGD/R... 

【文章來源】:山東醫(yī)藥. 2020,60(32)

【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與主要材料
    1.2 大鼠皮質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞分離、培養(yǎng)與鑒定
    1.3 OGD/R細(xì)胞模型建立與分組處理
    1.4 DNMT活性測(cè)定
    1.5 DNMT3a、t PA mRNA及蛋白檢測(cè)
    1.6 凋亡相關(guān)蛋白檢測(cè)
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 各組DNMT活性比較
    2.2 各組細(xì)胞中DNMT3a、t PA mRNA及蛋白表達(dá)比較
    2.3 各組細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)比較
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本文編號(hào):3645173

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