呼吸道合胞病毒（RSV）是全球范圍內(nèi)引起嬰幼兒肺炎、毛細(xì)支氣管炎等下呼吸道感染的重要病原體,可引起或加重兒童哮喘,是嬰幼兒住院的主要病因,嚴(yán)重者甚至可導(dǎo)致死亡。RSV也可引起成人嚴(yán)重的呼吸系統(tǒng)疾病,特別是老年人及免疫缺陷病患者。目前臨床上尚無特異性針對其的抗病毒藥物,所以開發(fā)研究新的治療RSV藥物及疫苗已成為全球迫在眉睫的需要。重組人干擾素α1b（rh INF-α1b）抗病毒及免疫調(diào)節(jié)等作用已被越來越多的學(xué)者研究證實,最近其作用于RSV的研究被積極開展,前期我們已有部分實驗表明rh INF-α1b對RSV的抗病毒作用,但其作用機(jī)制尚不明確。據(jù)文獻(xiàn)報道JAK/STAT、TLR4/NF-κB等信號通路與RSV感染有密切的相關(guān)性。因此,我們推測這些信號通路與RSV感染的致病機(jī)制及rh INF-α1b干預(yù)治療的效果可能有著一定的相關(guān)性。目的本課題通過rh INF-α1b不同劑量的霧化吸入給藥及腹腔注射給藥,采用光鏡下觀察病理學(xué)改變、免疫熒光法觀察STAT1、STAT2蛋白的表達(dá)及免疫組化法觀察TLR4和NF-κB蛋白的表達(dá),探討rh INF-α1b不同劑量及給藥方式對RSV感染小鼠的抗病毒作用... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻(xiàn)回顧
實驗一rhIFN-α1b對RSV感染小鼠肺組織病變的影響
    1 材料
        1.1 細(xì)胞株及病毒株
        1.2 實驗動物及實驗室等級
        1.3 主要試劑及液體配置
        1.4 主要實驗儀器及耗材
    2 方法
        2.1 Hep-2 細(xì)胞培養(yǎng)方法
        2.2 RSV病毒增殖
        2.3 RSV病毒懸液的鑒定
        2.4 實驗分組、造模及給藥
        2.5 標(biāo)本采集
        2.6 HE染色
        2.7 肺組織病理學(xué)評分
        2.8 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 正常Hep-2 細(xì)胞形態(tài)
        3.2 RSV感染的Hep-2 細(xì)胞
        3.3 病毒懸液RNA純度及完整性檢測
        3.4 熒光RT-PCR核酸鑒定結(jié)果
        3.5 TCID50 & Reed-Muench法
        3.6 RSV感染小鼠模型成功建立
        3.7 小鼠病理學(xué)改變及評分
    4 討論
實驗二 rhIFN-α1b對RSV感染小鼠JAK/STAT信號通路的影響
    1 材料
        1.1 主要試劑
        1.2 實驗儀器
        1.3 動物肺組織蠟塊標(biāo)本
    2 方法
        2.1 免疫熒光染色
        2.2 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 各組小鼠肺組織STAT1和STAT2蛋白表達(dá)熒光顯色圖
        3.2 Image J軟件檢測各組灰度值
    4 討論
實驗三 rhIFN-α1b對RSV感染小鼠TLR4/NF-κB信號通路的影響
    1 材料
        1.1 主要實驗試劑
        1.2 實驗儀器
        1.3 動物肺組織蠟塊標(biāo)本
    2 方法
        2.1 免疫組化染色
        2.2 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 TLR4和NF-κB蛋白表達(dá)情況
        3.2 Image-pro plus 6.0 測定各組肺組織IOD
    4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個人簡歷及研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]熱毒寧對呼吸道合胞病毒感染哮喘模型小鼠的影響[J]. 盧協(xié)勤,杜強(qiáng),高天明,張揚,翁曉琴,馮旰珠.  藥學(xué)與臨床研究. 2014(06)
[2]重組人干擾素α1b不同給藥方式治療兒童病毒性肺炎的臨床觀察[J]. 靳秀紅,湯昱,梁利紅,張向峰,陳海燕,李會娟,常會娟.  中國藥房. 2014(28)
[3]喜炎平與利巴韋林治療小兒手足口病療效和安全性的系統(tǒng)評價[J]. 劉兵兵,華麗霞,董艷,姚沖.  中國實驗方劑學(xué)雜志. 2014(09)
[4]呼吸道合胞病毒與TLR3、TLR4的關(guān)系及其中醫(yī)藥研究進(jìn)展[J]. 李濤,戴啟剛,汪受傳.  中華中醫(yī)藥雜志. 2014(01)
[5]重組人干擾素α1b與炎琥寧和喜炎平抗呼吸道合胞病毒感染的對照研究[J]. 黃可飛,張國成,劉瑞清,鄧軍霞,黃艷嫻,呂香萍,林海波,劉雪,成勝權(quán),許東亮,曹云新,馬福成.  中華實驗和臨床感染病雜志(電子版). 2013(06)
[6]拉米夫定聯(lián)合干擾素治療乙型肝炎病毒感染療效及對免疫功能的影響[J]. 邢現(xiàn)峰.  安徽醫(yī)藥. 2013(12)
[7]喜炎平注射液治療呼吸道合胞病毒肺炎50例臨床觀察[J]. 劉淑梅,修國權(quán).  中國臨床研究. 2013(09)
[8]甘草醇沉淀物有效部位對RSV作用的體外實驗研究[J]. 蔡旭玲,黃曉暉,周俊立,鄒志輝,陳思東.  中國熱帶醫(yī)學(xué). 2013(07)
[9]黃芩苷經(jīng)由TLR4信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抗呼吸道合胞病毒作用的研究[J]. 云云,汪長中,桂麗,李振興.  中成藥. 2013(06)
[10]重組人干擾素α1b對呼吸道合胞病毒感染小鼠外周血T淋巴細(xì)胞亞群及肺組織病理學(xué)的影響[J]. 劉瑞清,張國成,黃可飛,鄧軍霞,楊曉蕾,呂香萍,林海波,劉雪,成勝權(quán),許東亮,付蓉,曹云新,馬福成.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2013(09)



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