本文關(guān)鍵詞：中國札如病毒的流行特征及諾如病毒GⅡ.17不同毒株P(guān)蛋白的唾液結(jié)合分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究一2012-2014年中國八省區(qū)5歲以下兒童中札如病毒檢測分析目的:了解2012-2014年中國部分地區(qū)5歲以下腹瀉兒童中札如病毒的分子流行病學(xué)特征,明確我國近年來札如病毒的優(yōu)勢基因型,對(duì)我國札如病毒的進(jìn)化機(jī)制研究提供依據(jù)。方法:2012年1月至2014年12月收集河北、山西、內(nèi)蒙、黑龍江、上海、湖南、四川和新疆八個(gè)地區(qū)共3175例5歲以下兒童腹瀉病例糞便標(biāo)本和流行病學(xué)資料;利用RT-PCR方法檢測札如病毒,測定所有陽性毒株的序列并進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析。結(jié)果:札如病毒的總陽性率為0.69%(22/3175),其中6月以下、6-12月、12-24月齡組兒童中札如病毒的陽性率分別為0.53%、0.70%、0.52%,48-60月齡組的陽性率為2.63%。2012-2014年陽性率分別為1.05%、0.38%和0.50%。系統(tǒng)進(jìn)化分析表明以GI.1型(8株)和GII.1型(7株)札如病毒為主,其他基因型包括GI.2(2株)、GII.3(1株)、GII.4(1株)、GII.5(2株)、GIV(1株)。結(jié)論:札如病毒是我國5歲以下兒童急性胃腸炎的病原之一,GI.1和GII.1是目前的優(yōu)勢基因型。研究二諾如病毒GII.17不同毒株P(guān)蛋白的唾液結(jié)合分析目的:分析諾如病毒GII.17型不同變異株P(guān)蛋白與其受體組織血型抗原(HBGAs)的結(jié)合特點(diǎn),探索諾如病毒GII.17新變異株得以廣泛流行的原因,對(duì)諾如病毒的進(jìn)化、流行乃至疫苗研制提供依據(jù)。方法:1.收集2014年廣州市花都區(qū)諾如病毒GII.17新變異株暴發(fā)中183份唾液標(biāo)本,以標(biāo)準(zhǔn)酶免疫(ELI)試驗(yàn)為基礎(chǔ),利用A、B、Lea、Leb、Lex、Ley和H1抗原的單克隆抗體,對(duì)其進(jìn)行表型測定分析。2.從Genbank下載GII.17不同毒株41621、KW323、CS-E1的基因組序列,以其P區(qū)序列為基礎(chǔ),構(gòu)建相應(yīng)的p GEX4T-1克隆載體。3.通過構(gòu)建的載體質(zhì)粒表達(dá)、純化GII.17不同毒株41621、KW323、CS-E1的P蛋白。4.用不同毒株P(guān)蛋白為免疫原免疫家兔,制備相應(yīng)的抗體。5.以標(biāo)準(zhǔn)ELI試驗(yàn)為基礎(chǔ)行P蛋白與不同表型唾液的結(jié)合分析。結(jié)果:1.對(duì)花都183份唾液進(jìn)行表型測定分析示:病例組B抗原、Lex抗原、Ley抗原的陽性率分別為34.48%、17.24%、94.83%,對(duì)照組分別為17.91%、37.31%、76.12%;差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.本研究成功構(gòu)建了諾如病毒GII.17型三種毒株41621、KW323、CS-E1的克隆載體,表達(dá)了相應(yīng)的P蛋白,并以之成功制備了多克隆抗體。3.唾液結(jié)合分析顯示:41621、KW323、CS-E1三種毒株P(guān)蛋白與花都183份唾液結(jié)合的平均吸光值分別為1.637、0.9和0.142,結(jié)合呈陽性的反應(yīng)數(shù)分別為166、152和40,三者之間均存在顯著性差異。結(jié)論:1.對(duì)于諾如病毒GII.17型新變異株的感染,Ley抗原與B抗原為易感抗原,Lex抗原為保護(hù)性抗原。2.諾如病毒GII.17新變異株41621、KW323較之前的毒株CS-E1有著新的抗原特性,其與受體HBGAs的結(jié)合力亦較CS-E1強(qiáng),這兩大變化促使GII.17新變異株逃逸人群免疫,引起了急性胃腸炎的暴發(fā)流行。
【關(guān)鍵詞】：腹瀉 5歲以下兒童 札如病毒 基因型 諾如病毒 GII.17型 新變異株 P蛋白 唾液 HBGAs
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R725.1
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-8
• 研究一 2012-2014年中國八省區(qū)5歲以下兒童中札如病毒檢測及分型8-30
• 前言8-12
• 1.1 研究方案12-13
• 1.2 材料與方法13-18
• 1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-27
• 1.4 分析與討論27-29
• 1.5 結(jié)論29-30
• 研究二 諾如病毒GⅡ.17不同毒株P(guān)蛋白的唾液結(jié)合分析30-51
• 前言30-33
• 2.1 材料與方法33-41
• 2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果41-48
• 2.3 分析與討論48-50
• 2.4 結(jié)論50-51
• 參考文獻(xiàn)51-57
• 在學(xué)期間的研究成果57-58
• 致謝58

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  本文關(guān)鍵詞：中國札如病毒的流行特征及諾如病毒GⅡ.17不同毒株P(guān)蛋白的唾液結(jié)合分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：355955