目的轉(zhuǎn)化生長因子β（TGF-β）信號(hào)通路在心血管系統(tǒng)發(fā)育中具有重要作用。microRNA（miRNA）可通過與靶基因mRNA的3’端非編碼區(qū)（3’-UTR）互補(bǔ)結(jié)合,負(fù)性調(diào)節(jié)靶mRNA的表達(dá),參與基因轉(zhuǎn)錄后調(diào)控。miRNA通過調(diào)控TGF-β信號(hào)通路在心臟發(fā)育及心血管疾病中的作用尚不明確,本研究旨在探討miR-193a-3p、miR-200a-3p、miR-141-3p對(duì)大鼠H9C2心肌細(xì)胞中TGF-β2表達(dá)的影響。方法1.生物信息學(xué)方法預(yù)測與TGF-β2基因可能存在靶向關(guān)系的miRNA。2.構(gòu)建野生型和突變型TGF-β2基因3’-UTR載體,分別與miR-193a-3p mimics、miR-200a-3p mimics、miR-141-3p mimics共轉(zhuǎn)染,采用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測熒光素酶活性。3.miR-193a-3p mimics、miR-200a-3p mimics、miR-141-3p mimics分別轉(zhuǎn)染至大鼠H9C2心肌細(xì)胞,RT-PCR檢測轉(zhuǎn)染效率及對(duì)TGF-β2 mRNA表達(dá)的影響,Western blot檢測對(duì)TGF-β2蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果1.生物信息學(xué)方法... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

pmiR-RB-REPORTTM報(bào)告基因載體結(jié)構(gòu)意圖

3' UGUAGCAAUGR5' ...CUGGAAGAA3' UGUAGCAA200a-3p、miR-141-3p 與 TGF示:iR-193a-3p mimics 組野生型其預(yù)測靶位點(diǎn)進(jìn)行突變后，(圖 3.1.2)。該結(jié)果表明，m點(diǎn)（第 1184-1191 位）結(jié)合**

.3 miR-141-3p 熒光素酶活性檢測結(jié)野生型載體；TGF-β2 MUT1：突變型載體體 2(314-319) ； TGF-β2 MUT3：突變型載陰性對(duì)照； miR-141-3p ： miR-141-3p 過iR-200a-3p 對(duì) TGF-β2WT 的報(bào)行突變后，突變型載體 TGF-β1 位）、TGF-β2 MUT3（第 97-1顯的回復(fù)(圖 3.1.4)。該結(jié)果表明點(diǎn)均沒有明顯的相互作用。


本文編號(hào)：3043597