【摘要】： 支氣管哮喘是兒童時期最常見的呼吸道慢性疾病之一,也是一種世界性難治性疾病,隨著社會的發(fā)展,其發(fā)病率有越來越高的趨勢。哮喘嚴(yán)重危害個人健康,而且給家庭、社會造成巨大的負(fù)擔(dān),已成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題,引起世界各國的關(guān)注。目前西醫(yī)對于本病緩解期的治療尚缺乏理想的方法和藥物,而中醫(yī)藥具有獨(dú)特的優(yōu)勢。哮喘緩解期運(yùn)用中醫(yī)藥對全身進(jìn)行調(diào)節(jié),扶正固本,提高機(jī)體抵抗力,減少減輕哮喘發(fā)作,是防治哮喘的有效途徑。 固本防哮飲處方是來自我科全國著名兒科專家(全國首批500位名老中醫(yī)藥專家之一)江育仁教授經(jīng)驗(yàn)方,由炙黃芪、黨參、白術(shù)、茯苓、煅牡蠣、蟬蛻、陳皮、防風(fēng)、辛夷、五味子和生甘草組成,具有補(bǔ)肺固表,健脾化痰的功效,在江蘇省中醫(yī)院已經(jīng)應(yīng)用30多年,療效確切,臨床應(yīng)用可減少、減輕哮喘發(fā)作,增強(qiáng)患兒體質(zhì),提高患兒的生存質(zhì)量和哮喘緩解率。目前,就此處方申報并獲批的科技部“十一五”國家科技支撐計劃課題“固本防哮飲治療兒童哮喘緩解期肺脾氣虛證的臨床評價”正在試驗(yàn)中。本研究的臨床部分屬于該課題的一部分,實(shí)驗(yàn)部分從免疫及氣道病理的角度進(jìn)一步探討了該處方及其主要活性成分防治哮喘的作用機(jī)制。 臨床研究部分 2009年1月至2010年3月,遵循中心隨機(jī)、平行對照試驗(yàn)的原則,在南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院、北京中醫(yī)藥大學(xué)附屬東方醫(yī)院、山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院、湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,對中醫(yī)藥治療兒童哮喘緩解期肺脾氣虛證的有效性、安全性進(jìn)行了系統(tǒng)觀察,本研究目前仍在進(jìn)行中,現(xiàn)將至2010年3月為止療程滿6個月病例進(jìn)行統(tǒng)計分析,共100例,其中中藥組51例、西藥組49例。 目的 采用中心隨機(jī)、平行對照、多中心臨床研究方法,觀察中醫(yī)和西醫(yī)兩種不同治療方案的治療效果,客觀評價固本防哮飲用于哮喘緩解期,在減少哮喘發(fā)作次數(shù)、減輕哮喘發(fā)作程度等方面的有效性和安全性。 方法 采用多中心、隨機(jī)、平行對照的方法,對100例哮喘緩解期患兒進(jìn)行臨床研究,試驗(yàn)組采用固本防哮飲口服配合中藥穴位敷貼；對照組用普米克都保吸入,療程均為6個月。療程結(jié)束后對兩組患兒的疾病、證候(主、次癥)指標(biāo)進(jìn)行療效評價,兩組治療前后主要指標(biāo)、癥狀積分進(jìn)行比較。采用SPSS 13.0軟件對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析,包括卡方檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)、Ridit檢驗(yàn)分析。 結(jié)果 1.中藥組對主要療效指標(biāo)包括無喘息癥狀的天數(shù)、哮喘發(fā)作次數(shù)、哮喘發(fā)作嚴(yán)重度、上呼吸道感染次數(shù)、下呼吸道感染次數(shù)的影響 治療6個月的觀察周期中,兩組患兒無喘息癥狀天數(shù)、哮喘發(fā)作次數(shù)和下呼吸道感染次數(shù),經(jīng)t檢驗(yàn),無明顯差異。中藥組6個月的上呼吸道感染次數(shù)顯著低于西藥組,經(jīng)t檢驗(yàn),有統(tǒng)計學(xué)差異,p＜0.05。中藥組、西藥組在療程第1、3、6個月,上呼吸道感染次數(shù),3、6個月哮喘發(fā)作次數(shù)、下呼吸道感染次數(shù)均顯著低于基線狀態(tài),經(jīng)t檢驗(yàn),有統(tǒng)計學(xué)差異,p＜0.01,p＜0.05。兩組治療前后總有效率比較,中藥組顯著高于西藥組,經(jīng)Ridit檢驗(yàn),有統(tǒng)計學(xué)差異,p＜0.05。提示中藥組和西藥組均能減少哮喘患兒的哮喘發(fā)作次數(shù),上、下呼吸道感染次數(shù),但中藥組在減少呼吸道感染方面,療效更加顯著。 中、西藥組干預(yù)后,兩組患者均未出現(xiàn)Ⅳ級嚴(yán)重哮喘發(fā)作。兩組患兒在1、3個月時哮喘發(fā)作嚴(yán)重程度比較無明顯差異；6個月時經(jīng)Ridit分析,有顯著性差異,p＜0.01,中藥組Ⅱ級以上的哮喘發(fā)作明顯少于西藥組。 所以,固本防哮飲是治療兒童哮喘緩解期有效方劑,在維持哮喘患兒無癥狀的天數(shù)、控制哮喘發(fā)作次數(shù)方面,與普米克都保療效相近,但能更好地減輕哮喘發(fā)作的嚴(yán)重度,并能更好預(yù)防呼吸道感染的發(fā)生。 2.中藥組對患兒中醫(yī)證候?qū)W的影響 經(jīng)兩組證候療效比較,除3個月時的出汗癥狀,6個月時的出汗、食欲食量和舌象外,其余兩組證候?qū)W各時間點(diǎn)評分無顯著差異；3個月中藥組出汗評分顯著低于西藥組,6個月時的出汗、食欲食量和舌象評分顯著低于西藥組,經(jīng)t檢驗(yàn),有統(tǒng)計學(xué)差異p＜0.05,p＜0.01。提示中藥組較西藥組能夠更好地改善患兒的出汗多,食欲不振、食量少,舌象異常的癥狀。 中藥組1個月的鼻癢噴嚏、流涕、咳嗽、氣短、出汗、舌象和癥狀積分均顯著低于基線,有統(tǒng)計學(xué)差異,(p＜0.05,p＜0.01)；西藥組1個月的咳嗽、面色和癥狀積分均顯著低于基線(p＜0.05,p＜0.01)；中藥組3個月的鼻癢噴嚏、流涕、咳嗽、氣短、出汗、面色、乏力和癥狀積分均顯著低于基線(p＜0.05,p＜0.01);西藥組3個月的咳嗽、氣短和癥狀積分均顯著低于基線(p＜0.05,p＜0.01)；中藥組6個月的鼻癢噴嚏、流涕、咳嗽、氣短、出汗、面色、乏力、食欲食量、大便、舌象和癥狀積分均顯著低于基線(p＜0.01);西藥組6個月的鼻癢噴嚏、流涕、咳嗽、氣短、出汗、面色、乏力和癥狀積分均顯著低于基線(p＜0.05,p＜0.01)。 提示中藥組和西藥組均能改善患兒哮喘緩解期的臨床癥狀,而中藥組在改善患兒出汗、食欲食量、舌象方面更具優(yōu)勢。 3.中藥組對患兒合并用藥天數(shù)的影響 合并用藥次數(shù)兩組相比無顯著差異,觀察時點(diǎn)1個月、3個月合并用藥天數(shù)兩組相比,無顯著差異,6個月時及總合并用藥天數(shù)中藥組顯著低于西藥組。提示中藥組能夠縮短患兒合并用藥的天數(shù)。 4.中藥組安全性評價：臨床試驗(yàn)期間,未見患者血、尿、便常規(guī)、心電圖及肝腎功能有異常改變,未見患者有其他不良反應(yīng)發(fā)生,表明固本防哮飲臨床應(yīng)用安全。 結(jié)論 四個研究中心100例哮喘緩解期肺脾氣虛證患兒,治療期6個月療效和安全性評價。 1.治療前后療效比較,中藥組能顯著減少患兒哮喘發(fā)作次數(shù),減少上、下呼吸道感染次數(shù),并能使哮喘患兒臨床癥狀：鼻癢噴嚏、流涕、咳嗽、氣短、出汗、面色、乏力、食欲食量大便、舌象得以改善,使癥狀總積分顯著降低； 2.中藥組和西藥組療效比較,固本防哮飲在維持哮喘患兒無癥狀的天數(shù),控制哮喘發(fā)作次數(shù)方面,與普米克都保療效相近,但能更好地減輕哮喘發(fā)作的嚴(yán)重度,更好地預(yù)防呼吸道感染的發(fā)生,縮短患兒合并用藥的天數(shù)；中藥組和西藥組均能改善患兒哮喘緩解期的臨床癥狀,而中藥組在改善患兒出汗、食欲食量、舌象方面更具優(yōu)勢。 3.安全性評價表明中藥組臨床應(yīng)用安全。 本項(xiàng)研究說明,中醫(yī)治療方案用于兒童哮喘緩解期肺脾氣虛證有效。固本防哮飲是治療兒童哮喘緩解期肺脾氣虛證的有效方劑,臨床應(yīng)用安全。但由于觀察周期較短,尚不能確定其停藥后的遠(yuǎn)期療效,應(yīng)進(jìn)一步完成本研究的隨訪觀察期研究,并進(jìn)行患兒生存質(zhì)量分析,可以更為客觀地顯示中醫(yī)藥治療本病的優(yōu)勢,從而建立兒童哮喘緩解期的規(guī)范化中醫(yī)藥治療方案,形成可推廣的兒童哮喘緩解期治療指南。 實(shí)驗(yàn)研究部分 實(shí)驗(yàn)一固本防哮飲對哮喘緩解期小鼠的治療作用 目的初步探討固本防哮飲對哮喘緩解期小鼠的治療作用機(jī)制。 方法通過腹腔注射和霧化吸入卵蛋白(OVA)致敏,然后多次霧化吸入OVA激發(fā)的方法制備哮喘緩解期小鼠模型,在停止激發(fā)后給藥4周,將模型小鼠分為四組,即模型組、孟魯司特鈉組和固本防哮飲低、高劑量組,末次給藥后24h觀察藥物對小鼠氣道反應(yīng)性、肺泡灌洗液(BALF)細(xì)胞計數(shù)和細(xì)胞分類、BALF中白細(xì)胞介素4(IL-4)和γ-干擾素(IFN-γ)水平以及肺臟病理學(xué)變化的影響。 結(jié)果①模型組小鼠氣道反應(yīng)性顯著高于正常對照組,固本防哮飲可以劑量依賴性降低小鼠的氣道反應(yīng)性,降低氯化乙酰膽堿激發(fā)后小鼠肺阻力(RL)(p＜0.05,p＜0.01),改善肺功能狀態(tài)。②模型組小鼠細(xì)胞計數(shù)顯著高于正常對照組,且細(xì)胞分類計數(shù)中,嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞也顯著高于正常對照組(p＜0.01)。固本防哮飲可以降低BALF中細(xì)胞總數(shù)和嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞比例(p＜0.05,p＜0.01),提示給予固本防哮飲后,可以改善模型小鼠的氣道嗜酸性粒細(xì)胞及中性粒細(xì)胞浸潤,對于緩解哮喘及預(yù)防哮喘發(fā)作是有益的。③和模型組相比,固本防哮飲對小鼠BALF中IL-4無明顯影響,但是可以顯著增加BALF中IFN-γ,上調(diào)IFN-γ/IL-4的比值(p0.05, p0.01)。IFN-γ和IL-4分別代表體內(nèi)Thl和Th2的功能水平,提示固本防哮飲可以調(diào)節(jié)機(jī)體Thl和Th2的功能。④正常組小鼠肺臟未見炎細(xì)胞浸潤,支氣管壁完整,黏膜未見充血水腫,管壁和平滑肌厚度正常；而模型組小鼠肺臟可見支氣管壁及平滑肌增生、增厚。給予固本防哮飲后,小鼠肺臟病理改變顯著改善,支氣管壁和平滑肌厚度明顯減小,表明固本防哮飲可以改善哮喘小鼠的氣道病理進(jìn)展。 結(jié)論固本防哮飲可以降低模型小鼠的氣道高反應(yīng)性、降低BALF中細(xì)胞總數(shù),降低BALF中嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞比例,升高BALF中IFN-γ水平,改善支氣管周圍炎性細(xì)胞浸潤,減輕氣道重塑。 實(shí)驗(yàn)二黃芪甲苷對哮喘緩解期小鼠的氣道反應(yīng)性及氣道病理的影響 目的觀察黃芪甲苷對哮喘緩解期小鼠的治療作用及其作用機(jī)制,為確定黃芪甲苷是固本防哮飲的主要活性成分奠定基礎(chǔ)。 方法通過腹腔注射和霧化吸入OVA致敏,然后多次霧化吸入OVA激發(fā)的方法制備哮喘緩解期小鼠模型,末次激發(fā)后第二天,將模型小鼠分為四組,即模型組、孟魯司特鈉組和黃芪甲苷低、高劑量組,每日灌胃給藥28天,末次給藥后24h觀察藥物對小鼠氣道反應(yīng)性、BALF細(xì)胞計數(shù)和細(xì)胞分類、BALF中IL-4和IFN-γ水平以及肺臟病理學(xué)變化的影響。 結(jié)果①模型組小鼠氣道反應(yīng)性顯著高于正常對照組,黃芪甲苷可以劑量依賴性顯著降低氯化乙酰膽堿激發(fā)后小鼠肺阻力(RL)(p＜0.05,p＜0.01),改善肺功能狀態(tài)。②和正常對照組相比,模型組小鼠BALF中炎癥細(xì)胞顯著增加,細(xì)胞分類染色顯示嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞均顯著增加(p＜0.01)。黃芪甲苷可以降低BALF中炎癥細(xì)胞總數(shù),也可以降低BALF中嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞計數(shù),和模型組相比,有統(tǒng)計學(xué)差異(p＜0.05,p＜0.01)。③和正常對照組相比,模型組小鼠BALF中IL-4水平?jīng)]有明顯改變,這和一般的急性哮喘模型不同,但是小鼠BALF中IFN-γ水平顯著降低,導(dǎo)致IFN-γ／IL-4比值也降低(p＜0.05,p＜0．01)。黃芪甲苷50 mg/kg.150mg/kg均可以顯著升高模型小鼠BALF中IFN-γ水平,升高IFN-γ/IL-4比值,和模型組相比,有統(tǒng)計學(xué)差異(p＜0.05,p＜0.01)。④氣道病理顯示,正常小鼠肺臟幾乎沒有炎癥細(xì)胞,氣道壁也是完整的,模型組小鼠肺臟有少量的炎癥細(xì)胞浸潤,氣道壁明顯增厚。黃芪甲苷治療后小鼠肺臟炎癥細(xì)胞浸潤基本消失,氣道壁厚度顯著降低,接近正常水平。Masson染色結(jié)果顯示,正常組小鼠肺臟氣道上皮下僅有少量膠原沉積,表現(xiàn)為少量綠色區(qū)域。模型組氣道上皮下可見大量膠原沉積,經(jīng)統(tǒng)計后和正常對照組有顯著差異(p＜0.01)。黃芪甲苷可以降低模型小鼠氣道上皮下膠原沉積,和模型組相比,有統(tǒng)計學(xué)差異(p＜0.05,p＜0.01)。PAS染色結(jié)果顯示,正常組小鼠幾乎看不到PAS染色陽性細(xì)胞,模型組PAS染色陽性細(xì)胞顯著增加(p＜0.01),黃芪甲苷50、150mg／kg均可以降低模型小鼠PAS染色陽性細(xì)胞,和模型組相比,有統(tǒng)計學(xué)差異(p＜0.05,p＜0.01)。結(jié)論黃芪甲苷可以顯著升高BALF中IFN-γ水平,同時可以減少氣道上皮下膠原沉積及氣道內(nèi)黏液分泌。我們的研究表明黃芪甲苷對哮喘緩解期的治療是有益的,在哮喘緩解期的治療中,可以作為一個補(bǔ)充治療方法來彌補(bǔ)現(xiàn)有治療方法的不足。
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R272
【圖文】：

合并用藥次數(shù)兩組相比無顯著差異，經(jīng)X，檢驗(yàn)， p>0.05;1、3月合并用藥天數(shù)兩組相比，無顯著差異， p>0.05，6個月時及總用藥天數(shù)中藥組顯著低于西藥組，經(jīng)t檢驗(yàn)， p(0.05。結(jié)果見表2一12、圖2一6。

Masson三色染色，用于觀察膠原沉積，另外一片用于 periodicacidschiff(PAS)染色，用于觀察杯狀細(xì)胞分泌的粘液情況。由專業(yè)的病理學(xué)人員盲法作出病理學(xué)評價。Masson染色的陽性區(qū)域?yàn)樗{(lán)色區(qū)域，其病理學(xué)統(tǒng)計方法見圖3一2一3。鬢鬢鬢圖3一2一 3Masson染色的病理統(tǒng)計的示意圖。Fig.3一2一 3StatistiemethodofMasson， 5Triehromestain.對于Masson染色的病理統(tǒng)計，采用IPP軟件。用正P打開圖片后，首先選取一個支氣管(見A一B)，然后沿著支氣管壁緊挨著陽性染色區(qū)域劃一條線，不能將陽性染色區(qū)域劃到線的另外一邊，然后計算機(jī)畫出另外一條線，這條線和手動劃的那條線平行，距離20娜(C一D)。因?yàn)镸asson染色的膠原沉積的表達(dá)均在支氣管壁下20卿之內(nèi)，這樣選擇后可以盡量假陽性染色導(dǎo)致誤差。選擇好需要統(tǒng)計的區(qū)域后，用IPP軟件計算陽性染色區(qū)域占總選擇區(qū)域的百分比

第三部分實(shí)驗(yàn)研究胞計數(shù)，和模型組相比，由統(tǒng)計學(xué)差異勿<0.05， P<0.01)。結(jié)果見圖3一2一5。tota!Cel怡0O42月Jl1..︵1.省 00000642OUn︸ 6842月.性X︶的11。。Jo習(xí)工招日呂‘祠10oo.擴(kuò)圖3一2一5黃蔑甲昔對哮喘緩解期小鼠肺泡灌洗液細(xì)胞計數(shù)及細(xì)胞分類的影響。Fig.3一2一 5Totalinfi田衛(wèi)們 natoryeellsandeelldifferentiationinBALFinast知 叮atiemiee. ValuesareexPressedasmean土SEM:six耐 malswereassessedPergrouP.51加fieantdi價 reneebetVveenovAandeontrol腳即 areshownas##P<0.01:betweenovA耐AsT ormontelukasttreated90即 5ares加wnas’P<0.05，”P<0.01.2.3黃茂甲昔對哮喘緩解期小鼠肺泡灌洗液工L一4和IFN一Y的影響我們測定了肺泡灌洗液中IL一4和IFN一Y水平。結(jié)果表明，和正常對照組相比，模型組小鼠肺泡灌洗液中IL一4水平?jīng)]有明顯改變，這和一般的急性哮喘模型不同，但是小鼠肺泡灌洗液中IFN一Y水平顯著降低，導(dǎo)致工FN一Y/IL一4比值也降低勿<0.05， P<0.01)。黃茂甲昔50、150mg/kg均可以顯著升高模型小鼠肺泡灌洗液中工FN一Y水平，升高工FN-丫/IL一4比值，和模型組相比，有統(tǒng)計學(xué)差異勿<0.05
【引證文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉文;哮喘患兒體質(zhì)分型及中醫(yī)干預(yù)方案問卷調(diào)查研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2011年

2 羅卉;固本防哮飲對哮喘緩解期小鼠模型肺泡灌洗液IL-4、IL-5調(diào)控作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

本文編號：2884189