目的： 研究前B細胞集落促進因子(Pre-B-cell colony-enhancing factor，PBEF)誘導(dǎo)正常人以及重型先天性中性粒細胞減少癥患者(severe congenital neutropenia，SCN)的CD34~+細胞向髓系細胞分化功能。 方法： 1、利用激光輔助骨髓涂片單個細胞采集技術(shù)及逆轉(zhuǎn)錄實時定量PCR方法檢測正常人骨髓中不同分化階段髓系細胞PBEF表達水平。 2、用逆轉(zhuǎn)錄實時定量PCR及ELISA方法檢測正常人的髓系細胞經(jīng)粒細胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor，G-CSF)體內(nèi)、外刺激后PBEF mRNA表達水平、細胞培養(yǎng)液或血漿中PBEF蛋白質(zhì)水平，同時檢測細胞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD~+)合成水平的變化，研究G-CSF刺激與PBEF表達、NAD~+合成的關(guān)系。 3、用人類重組PBEF體外刺激正常人的CD34~+細胞后，通過光學(xué)顯微鏡觀察細胞形態(tài)學(xué)的變化、流式細胞術(shù)檢測表面抗原CD11b、CD15的表達以及逆轉(zhuǎn)錄實時定量PCR檢測細胞C/EBPa、C/EBPe、PU．1和ELA2等基因mRNA的表達，研究PBEF胞外刺激與CD34~+細胞向髓系分化的關(guān)系。 4、正常人的CD34~+細胞經(jīng)由Lentivirus轉(zhuǎn)導(dǎo)PBEF基因后，光學(xué)顯微鏡觀察細胞形態(tài)學(xué)的變化、流式細胞術(shù)檢測表面抗原CD11b、CD15的表達變化以及逆轉(zhuǎn)錄實時定量PCR檢測細胞C/EBPa、C/EBPe、PU．1和ELA2等基因mRNA的表達變化，研究PBEF胞內(nèi)過度表達與CD34~+細胞向髓系分化的關(guān)系。 5、用逆轉(zhuǎn)錄實時定量PCR、ELISA方法以及共聚焦熒光顯微鏡斷層掃描技術(shù)檢測經(jīng)長期G-CSF治療的SCN病人髓系細胞的PBEF mRNA、胞內(nèi)蛋白質(zhì)水平以及血漿蛋白質(zhì)水平的變化，研究G-CSF治療后SCN病人髓系細胞“成熟障礙”的糾正與PBEF表達變化的關(guān)系
【學(xué)位單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2006
【中圖分類】：R725.5
【部分圖文】：

3.SCN的臨床特征SCN病人自生后就頻繁出現(xiàn)嚴(yán)重的細菌感染，首發(fā)癥狀多為口腔炎，但中耳炎、上呼吸道感染、肺炎、皮膚膿腫、肝膿腫也不少見。血培養(yǎng)常見格蘭氏陽性葡萄球菌或鏈球菌生長，假單胞菌和消化鏈球菌屬的細菌偶見，有時也可檢出真菌。SCN的ANC小于或等于.02xlo沉，有時伴有輕度的貧血和血小板增多以及單核細胞和嗜酸性細胞的增高。大多數(shù)病人的gIG水平稍增高，接種疫苗后產(chǎn)生的特殊免疫能力正常，血液生化檢查如電解質(zhì)、肝腎功能正�！�8’。所有SCN的骨髓形態(tài)學(xué)檢查都共有一個別于其他粒細胞減少癥的特征性表現(xiàn)，即粒細胞的前體細胞在早幼粒一中幼粒階段“成熟障礙”。骨髓中的早幼粒細胞輕度升高，嗜酸性細胞常增多，巨核細胞形態(tài)及數(shù)目正常如圖1、2所示。
【引證文獻】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 李潔;前B細胞克隆增強因子（PBEF）在急性胰腺炎肺損傷大鼠肺組織中的表達與功能及清胰湯干預(yù)的實驗研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2010年

本文編號：2881430