發(fā)布時(shí)間：2020-10-31 19:31

　　 目的:研究間歇性缺氧條件下幼鼠下丘腦視上核ADH神經(jīng)元的變化,探討間歇性缺氧致遺尿與ADH神經(jīng)元變化之間的可能關(guān)系,為兒童原發(fā)性夜間遺尿癥(Primary nocturnal enuresis PNE)的臨床治療和藥物選擇提供理論依據(jù)。方法:36只SD雄性幼鼠(3周齡),體重50±2.7克,隨機(jī)分為對照組(unhandled control group,UC)和間歇性缺氧組(intermittent hypoxia group, IH)。UC組:在正常環(huán)境中以普通飼料、普通飲水飼養(yǎng)6周;IH組:每日間歇缺氧6小時(shí),于9:00AM-3:00PM入間歇性缺氧艙內(nèi),實(shí)驗(yàn)者向間歇性缺氧艙內(nèi)循環(huán)充入氮?dú)夂脱鯕?每次循環(huán)30秒,通過測氧儀監(jiān)測間歇性缺氧艙內(nèi)的氧濃度來程控輸氣和排氣裝置,使間歇性缺氧艙內(nèi)氧濃度在12%～21%之間循環(huán)。分別于缺氧的第2、4、6周三個(gè)時(shí)段,IH組各取6只、UC組各取2只實(shí)驗(yàn)動物,經(jīng)腹腔注射水合氯醛麻醉,4%多聚甲醛溶液灌注固定,完整取出大鼠腦組織,于4℃的30%蔗糖磷酸緩沖液中脫水。按照大鼠腦立體定向圖譜取下丘腦視上核層面,OCT包埋,冰凍切片機(jī)冠狀切片,片厚10um。每個(gè)大鼠切5張,分成兩套,一套用于HE染色(2張),另一套做免疫熒光染色(3張)。熒光顯微鏡下觀察并拍照,用圖像分析系統(tǒng)(IPP)計(jì)數(shù)下丘腦視上核ADH神經(jīng)元數(shù)目。結(jié)果:缺氧不同時(shí)段HE染色顯示,隨著缺氧時(shí)間延長,視上核層面細(xì)胞數(shù)逐漸減少,但未見細(xì)胞壞死和炎性細(xì)胞浸潤。缺氧2周時(shí)的大鼠下丘腦視上核ADH神經(jīng)元免疫熒光染色和計(jì)數(shù)與對照組差別不明顯,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差別無顯著性(P0.05);缺氧組4周和6周時(shí),下丘腦視上核ADH神經(jīng)元數(shù)目逐漸減少,與對照組比較,差異顯著,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。免疫熒光染色顯示:對照組視上核有大量ADH陽性神經(jīng)元分布,ADH免疫陽性物質(zhì)為深藍(lán)色,位于胞漿,胞核不著色,ADH陽性神經(jīng)元著色深淺不一。缺氧組大鼠視上核ADH陽性神經(jīng)元分布減少,淡藍(lán)色染色物質(zhì)明顯減少,染色淡,細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則。結(jié)論:1.間歇性缺氧可致幼鼠下丘腦視上核ADH神經(jīng)元數(shù)目明顯減少,間歇性缺氧時(shí)間越久,減少越明顯。2.間歇性缺氧導(dǎo)致遺尿可能與缺氧引起下丘腦分泌ADH神經(jīng)元減少有關(guān)。3.間歇性缺氧是否導(dǎo)致下丘腦分泌ADH的節(jié)律發(fā)生了變化,夜間血中ADH濃度高峰是否缺失,腎小管ADH受體是否因間歇性缺氧有所改變,尚需進(jìn)一步的研究證實(shí)。
【學(xué)位單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R726.9
【文章目錄】：
1 間歇性缺氧條件下幼鼠下丘腦視上核ADH 神經(jīng)元的變化
    1.1 中文摘要
    1.2 英文摘要
    1.3 前言
    1.4 材料與方法
    1.5 結(jié)果
    1.6 討論
    1.7 結(jié)論
    1.8 參考文獻(xiàn)
    1.9 英漢縮略詞對照表
2 致謝
3 抗利尿激素的研究現(xiàn)狀（綜述）
4 在讀書期間發(fā)表的文章

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本文編號：2864405