目的:研究新生期肺炎鏈球菌肺炎(S.pp)對維生素A(VA)水平的影響及其與肺部免疫及氣道反應(yīng)性的關(guān)系。方法:Balb/c小鼠出生后第7天經(jīng)鼻腔滴注2×10 ~7CFU肺炎鏈球菌5μl以建立新生期S.pp模型,Control組(對照組)滴注等量的PBS,新生期肺炎鏈球菌肺炎后VA補充組(S.pp+VA)感染后24小時內(nèi)口飼補充VA,每天一次,連續(xù)四天,對照組給予等量VA溶解溶質(zhì)菜籽油。收集感染后第2、5、7、14、21及28天肺組織、血清、肝臟組織標本,高效液相色譜儀(HPLC)監(jiān)測組織中的VA水平。感染五周后(小鼠第六周)時肺組織病理切片HE染色觀察肺組織病理改變,體積描記法檢測小鼠的肺功能,ELISA檢測支氣管肺泡灌洗液(BALF)上清IL-4、IL-5、IL-13、IL-17A、INF-γ水平,流式細胞術(shù)檢測肺組織中的CD4~+T細胞亞群Th1、Th2、Th17及Foxp3~+Treg。結(jié)果:S.pp組小鼠肺組織VA持續(xù)降低至感染后4周,血清VA降低直至感染后2周恢復(fù)正常,而肝臟中VA水平無統(tǒng)計學(xué)差異。S.pp+VA組小鼠肺組織炎性細胞浸潤情況較S.pp組顯著減輕,S.pp+VA組BALF中IL-4、IL-5、IL-13及IL-17A水平顯著低于S.pp組(P0.05),而IFN-γ則顯著增高(P0.01);Th1、Foxp3~+Treg顯著高于S.pp組(P0.01),Th2水平明顯降低(P0.01),且Th1/Th2、Th1/Th17及Foxp3~+Treg/Th17比值顯著增高(5.7 vs 1.7,P0.001,1.2vs 0.6,P0.001,2.7 vs 1.8,P0.01)。S.pp+VA組小鼠的氣道反應(yīng)性明顯低于S.pp組(P0.001)。結(jié)論:新生期肺炎鏈球菌肺炎可致肺部VA水平持續(xù)降低至小鼠成年早期,肺炎后補充VA能減輕新生期肺炎鏈球菌肺炎后小鼠肺組織炎性細胞浸潤,增加Th1及Foxp3~+Treg水平,糾正Th1/Th2、Th1/Th17及Foxp3~+Treg/Th17失衡,抑制成年期氣道高反應(yīng)性的形成。
【學(xué)位單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R722.135
【部分圖文】：

新生期肺炎鏈球菌肺炎后，小鼠肺組織VA水平持續(xù)下降至感染后4周，血漿VA水平于感染后1周顯著降低，感染后2周恢復(fù)正常，兩組肝臟VA水平無統(tǒng)計學(xué)差異，如圖1所示。*P< 0.05, **P< 0.01, ***P< 0.001. n=（4-7）/group圖1 新生期肺炎鏈球菌肺炎后2d、5d、7d、14d、21d、28d肺、血清及肝臟中VA水平比較Figure 1 Comparison of VAlevels in lung, serum and liver on 2, 7, 14, 21, 28 days post infection2.2 新生期肺炎鏈球菌肺炎后補充 VA 抑制新生期肺炎鏈球菌肺炎誘導(dǎo)的 BALF 中炎性細胞聚集新生期肺炎鏈球菌感染后五周,收集各組小鼠 BALF，檢測 BALF 中炎性細胞總數(shù)及分類計數(shù)。檢測發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，新生期肺炎鏈球菌肺炎組 BALF 中炎性細胞總數(shù)、中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、巨噬細胞及淋巴細胞數(shù)顯著增加（16.80±5.36 ×105cells/ml vs 4.21±0.77×105cells/ml,P <0.001,19.87±5.17×104cells/ml vs 6.85±1.04×104cells/ml , P <0.001, 1.10±0.42×104cells/ml vs 0.28±0.04×104cells/ml , P <0.001, 57.40±4.18×104cells/ml vs 32.23±4.74×104cells/ml , P<0.001, 33.46±11.81×104cells/ml vs 8.49±2.59×104cells/ml , P <0.001），而新生期

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文肺炎鏈球菌肺炎后補充 VA 能顯著降低新生期肺炎鏈球菌肺炎誘導(dǎo)的 BALF 中炎性細胞總數(shù)、中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、巨噬細胞及淋巴細胞聚集（6.24±1.15×105cells/ml vs 16.80±5.36×105cells/ml,P <0.001, 10.06±3.67×104cells/ml vs19.87±5.17×104cells/ml , P <0.001, 0.20±0.07×104cells/ml vs 1.10±0.42×104cells/ml , P <0.001, 37.93±4.03×104cells/ml vs 57.40±4.18×104cells/ml , P <0.001,14.18±4.13×104cells/ml vs 33.46±11.81×104cells/ml , P <0.001），如圖 2 所示。

圖 3 VA 補充對新生期肺炎鏈球菌肺炎小鼠成年期肺組織病理改變的影響Figure3 The effect of VAsupplementation on the pathological changes of lung tissue in admice after neonatal pneumococcal pneumoniaA）pathological changes of lung tissue in the three groups by HE staining (×200)；B）histolocgical scores of pulmonary perivascular inflammatory cell infiltration; C）histolocgscores of pulmonary peribronchiolar inflammatory cell infiltration; D）histolocgical score
【參考文獻】

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1 田琴琴;劉茹;陳云秀;陳明;孟慶清;任洛;羅征秀;;新生期肺炎鏈球菌肺炎對成年期肺組織免疫狀態(tài)及氣道高反應(yīng)的影響[J];免疫學(xué)雜志;2015年12期

2 顧志勇;余加林;;維生素A與新生兒肺炎、敗血癥及呼吸窘迫綜合征相關(guān)性的臨床研究[J];兒科藥學(xué)雜志;2015年06期

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4 劉曉斐;石云;鄒全明;郭剛;;Th17細胞及IL-17在病原微生物感染中的研究進展[J];中國免疫學(xué)雜志;2009年09期

本文編號：2853904