小兒腸神經(jīng)元發(fā)育異常疾病臨床和病理診斷研究

發(fā)布時(shí)間：2020-10-22 16:32

　　目的:結(jié)合臨床和病理資料對(duì)比及回顧性研究,探討先天性巨結(jié)腸(Hirschsprung’s disease,HD)及其類源病(Hirschsprung allied diseases,HAD)的臨床和病理形態(tài)特點(diǎn),評(píng)價(jià)神經(jīng)細(xì)胞特異烯醇化酶( neuron-specific-enolase,NSE )和S100蛋白( soluble-protein 100 ,S100)兩種特異性抗體在HD和HAD的表達(dá)和臨床意義,以期加深對(duì)該類疾病的認(rèn)識(shí),提高術(shù)前及術(shù)后病理診斷準(zhǔn)確率。方法:對(duì)120例擬診為先天性巨結(jié)腸患兒的常規(guī)病理診斷進(jìn)行分組(診斷明確組、可疑組),用NSE和S100蛋白分別進(jìn)行免疫組化標(biāo)記,以明確診斷和評(píng)價(jià)兩種試劑對(duì)識(shí)別神經(jīng)叢和腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(Intestinal ganglion cells,IGCs)的作用;結(jié)合臨床資料,常規(guī)病理和免疫組化標(biāo)記結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析,以總結(jié)HD和HAD臨床和病理形態(tài)特點(diǎn);還通過年齡分組結(jié)合顯微圖像分析,研究年齡因素與IGCs成熟度的關(guān)系。結(jié)果:(1)所有患兒的臨床表現(xiàn)均以便秘為主;(2)NSE在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和神經(jīng)纖維有表達(dá),S100蛋白在神經(jīng)叢內(nèi)的神經(jīng)纖維、雪旺細(xì)胞及周圍細(xì)胞有表達(dá),對(duì)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞則無表達(dá)。(3)兩種免疫組化標(biāo)記可以提高病理診斷準(zhǔn)確程度。(4)年齡因素影響IGCs成熟度非常明顯,隨著年齡增加,成熟IGCs所占比例也逐漸增加(5)NSE在成熟和未成熟的IGCs中都有表達(dá),且表達(dá)模式不同,可以判定IGCs的成熟情況,S100對(duì)IGCs沒有表達(dá),但對(duì)周圍細(xì)胞有表達(dá),能幫助觀察IGCs。結(jié)論:結(jié)合臨床資料,HE病理常規(guī)和免疫組化NSE,S100蛋白染色,可以更加準(zhǔn)確地鑒別診斷巨結(jié)腸及其類源病,能提高臨床巨結(jié)腸類源病的確診率。同時(shí)免疫組化染色有助于了解IGCs成熟度,為臨床診斷HAD和治療提供依據(jù)。
【學(xué)位單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2006
【中圖分類】：R726.5
【部分圖文】：

示意圖,免疫組化,原理,示意圖

.2.2 免疫組化染色原理主要是根據(jù)免疫學(xué)中抗原抗體結(jié)合及組織化學(xué)的原理和技術(shù)，在組位顯示抗原成分。現(xiàn) 在常用的方法有 SP 法（ Streptaviderocidase,SP）、SABC 法（Streptavidin biotin Peroxidase ComplABC）、LSAB 法（Labelled Streptavidin Biotin,LSAB）等,都是將抗原體有效結(jié)合，再將此信號(hào)放大，最后用相應(yīng)的底物顯色。本課題用的免疫組化方法為 SP 法，具體原理如下：第一步，抗原抗合，經(jīng)特定抗原免疫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物得到的抗體即一抗與石蠟標(biāo)本上的特點(diǎn)原結(jié)合。第二步，已生物素化的二抗與一抗結(jié)合，生物素是一種水溶生素，其可用于標(biāo)記抗體而不影響抗體活性，而且和鏈霉卵白素有非的親和力。第三步，SP 與生物素結(jié)合。第四步，用辣根染色酶的底物色來放大信號(hào)。（見圖 1）

形態(tài)測(cè)量