第一部分ISG15突變家系臨床及免疫特征目的:探討我國(guó)一ISG15基因突變家系中2例患兒的臨床與免疫學(xué)特征。方法:總結(jié)2例在重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院就診來(lái)自同一家系的ISG15基因突變患兒的臨床資料、實(shí)驗(yàn)室檢查,全外顯子結(jié)合Sanger測(cè)序分析患兒及其親緣ISG15基因序列,密度梯度離心法提取外周血中性粒細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)及免疫熒光法檢測(cè)其內(nèi)ISG15蛋白表達(dá),PCR法檢測(cè)IFN-γ-IL12軸功能,魯米諾化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)中性粒細(xì)胞產(chǎn)生活性氧簇功能。結(jié)果:患兒1,男,1歲9月,1月起病,表現(xiàn)為反復(fù)呼吸道感染,患兒2,女,3月,1月起病,表現(xiàn)為全身皮膚的化膿性感染。免疫球蛋白水平及淋巴細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、NBT檢測(cè)均正常。2例患兒來(lái)自同一家系(父母為近親結(jié)婚),ISG15基因c.420CA純合突變,父母均為雜合突變,為未報(bào)道新發(fā)突變。2例患兒中性粒細(xì)胞內(nèi)ISG15蛋白表達(dá)明顯降低,中性粒細(xì)胞產(chǎn)生外源性活性氧簇的功能受損,內(nèi)源性活性氧蔟無(wú)明顯差異,患兒2 IFN-γ-IL12軸功能基本正常。經(jīng)抗感染治療兩患兒臨床癥狀改善,患兒1現(xiàn)基本同健康同齡兒,患兒2皮膚破潰愈后形成較多菲薄瘢痕,1歲6月齡時(shí)因異物吸入意外死亡。結(jié)論:經(jīng)臨床分析、基因及蛋白檢測(cè),確診同一家系2例ISG15突變致免疫缺陷病患兒,為未報(bào)道新發(fā)突變。不同于既往報(bào)道病例較為一致的結(jié)核易感性及I型干擾素病表現(xiàn),該家系患兒臨床表現(xiàn)為以反復(fù)呼吸道和皮膚軟組織細(xì)菌感染為主的新表型,且同一基因型的表現(xiàn)型具有異質(zhì)性。免疫學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)IFN-γ-IL12軸功能基本正常,中性粒細(xì)胞產(chǎn)生外源性活性氧簇的功能受損,提示ISG15蛋白在中性粒細(xì)胞中起重要功能,其表達(dá)缺失可能與中性粒細(xì)胞產(chǎn)生胞外氧自由基障礙和反復(fù)細(xì)菌感染存在一定關(guān)系,其具體發(fā)病機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。第二部分CⅡTA突變致MHCⅡ類分子缺陷病的免疫學(xué)研究目的:探討1例CⅡTA基因突變所致MHCⅡ類分子缺陷病A組患兒臨床與分子特征。方法:總結(jié)1例在重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院就診的MHCⅡ類分子缺陷病患兒的臨床資料、實(shí)驗(yàn)室檢查,Sanger測(cè)序分析患兒CⅡTA基因序列、PCR法檢測(cè)T細(xì)胞受體長(zhǎng)度多樣性,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HLA-DR蛋白表達(dá)。結(jié)果:患兒男,2歲,3月起病,表現(xiàn)為反復(fù)腹瀉、呼吸道感染、持續(xù)CMV感染、卡介苗病、重度營(yíng)養(yǎng)不良,Ig G、Ig A下降、Ig M升高,CD4+T細(xì)胞比例下降但數(shù)量正常、CD4/CD8比例倒置。CⅡTA基因復(fù)合雜合突變,c.3223CT來(lái)源于父親;c.1240del C來(lái)源于母親,為未報(bào)道新發(fā)突變。患兒B細(xì)胞和單核細(xì)胞表面的HLA-DR表達(dá)明顯降低,T細(xì)胞功能輕度受損。確診后患兒行單倍體造血干細(xì)胞移植,因發(fā)生嚴(yán)重的移植物抗宿主病死亡。結(jié)論:經(jīng)臨床分析、免疫學(xué)篩查、基因及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè),確診MHCⅡ類分子缺陷患兒1例,其母源突變c.1240del C既往未見(jiàn)報(bào)道。反復(fù)多病原感染伴有CD4+細(xì)胞比例和(或)數(shù)量下降需警惕該病可能,綜合臨床與實(shí)驗(yàn)室檢查行MHCⅡ蛋白表達(dá)及基因測(cè)序可確診該病,造血干細(xì)胞移植是目前根治的唯一辦法,但成功率較其他聯(lián)合免疫缺陷病低。
【學(xué)位單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R725.9
【部分圖文】：

患兒家系系譜圖

患兒1TCR-Vβ多樣性a）與健康對(duì)照b）

圖 6 流式細(xì)胞術(shù) a）及免疫熒光法 b）檢測(cè)兩患兒及其父母 ISG15 蛋白表達(dá)水平與對(duì)照組比較Fig6 The levels of ISG15 expression of the 2 patients,their parents and healthy control
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 周麗娜;丁媛;李黎;唐文靜;趙曉東;;全血淋巴細(xì)胞流式細(xì)胞術(shù)精細(xì)免疫分型方法的建立[J];免疫學(xué)雜志;2015年06期

本文編號(hào)：2850139