目的迄今高氧肺損傷發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明,多數(shù)學(xué)者認(rèn)為氧化應(yīng)激反應(yīng)在其發(fā)生發(fā)展中扮演重要角色。線粒體是細(xì)胞內(nèi)活性氧生產(chǎn)的主要場(chǎng)所和氧化損傷的主要靶細(xì)胞器。本課題旨在觀察85%高濃度氧暴露對(duì)早產(chǎn)新生大鼠肺組織中線粒體DNA編碼細(xì)胞色素氧化酶亞基(COXⅠ、COXⅡ、COXⅢ)動(dòng)態(tài)表達(dá)的影響,探討其在早產(chǎn)大鼠高氧肺損傷發(fā)生、發(fā)展中的可能作用。 方法早產(chǎn)SD大鼠生后1 d隨機(jī)分為空氣組、高氧組。高氧組持續(xù)暴露于85%氧氣中,空氣組置于同一室內(nèi)常壓空氣中。兩組分別于暴露滿1、4、7、10和14 d時(shí),每組取動(dòng)物8只,提取肺組織RNA,采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)測(cè)定COXⅠ、COXⅡ和COXⅢmRNA的表達(dá),凝膠電泳條帶用凝膠成像分析系統(tǒng)照相并進(jìn)行分析,比較COXⅠ、COXⅡ和COXⅢ與β-actin擴(kuò)增條帶灰度比值。同時(shí)采用免疫組化、免疫印跡(Western-blot)法檢測(cè)COXⅠ蛋白的表達(dá)。 結(jié)果(1)mRNA的表達(dá):與同時(shí)間點(diǎn)空氣組相比,高氧1 d和4 d時(shí),COXⅠmRNA的表達(dá)顯著增強(qiáng)(P﹤0.05和P﹤0.01),其后開始下降,7 d時(shí)二者無顯著性差異(P﹥0.05),10 d時(shí)較空氣組顯著降低(P﹤0.01),14 d時(shí)復(fù)又增高(P﹤0.01);COXⅡ和COXⅢmRNA的表達(dá)未見顯著性差異。(2)COXⅠ蛋白水平的表達(dá):與同時(shí)間點(diǎn)空氣組相比,高氧1 d和4 d時(shí),COXⅠ表達(dá)顯著增強(qiáng)(P﹤0.01和P﹤0.05),7 d時(shí)二者無顯著性差異(P﹥0.05),其后開始下降,10 d和14 d時(shí)較空氣組顯著降低(P﹤0.01和P﹤0.05)。 結(jié)論85﹪高濃度氧暴露誘導(dǎo)早產(chǎn)新生大鼠線粒體DNA編碼COXⅠ異常表達(dá),這種變化可能參與了高氧肺損傷的發(fā)生。
【學(xué)位單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2007
【中圖分類】：R722.6
【部分圖文】：

00.20.40.60.81 d 4 d 7 d 10 d 14 d空氣高氧圖 3 高氧對(duì) COXⅢ mRNA 動(dòng)態(tài)表達(dá)的影響（與空氣組相比，無顯著性差異）M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10C200900

圖 5 各時(shí)間點(diǎn) COXⅡ mRNA 的表達(dá)M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10圖 6 各時(shí)間點(diǎn) COXⅢ mRNA 的表達(dá)圖 4～6 中，M：Marker；1～10 分別代表： 高氧 1 d；空氣β-aCO1200900700500300100

M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10圖 5 各時(shí)間點(diǎn) COXⅡ mRNA 的表達(dá)M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10β-CO2009007005003001001200900
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2842937