背景Wilson病(Wilson Disease, WD),又稱肝豆狀核變性病(Hepatolenticular degeneration,HLD),是由于ATP7B基因缺陷引起銅代謝異常的常染色體隱性遺傳病,以不同程度的肝損害、腦退行性變和角膜邊緣銅鹽沉著環(huán)為臨床特征,ATP7B基因位于13q14.3,含個21外顯子,編碼一種P型銅轉運ATP酶。肝豆狀核變性是由于ATP7B基因突變,使ATP酶功能喪失,多余的銅不能清除而在肝臟、大腦大量沉積而出現肝病和神經系統(tǒng)癥狀。本病臨床表現多種多樣,易造成漏診和誤診,早期診斷、早期治療可以在一定程度上預防和逆轉臨床癥狀。ATP7B基因突變分散在基因各個部位,迄今為止已發(fā)現500多種ATP7B基因外顯子突變類型。 目的探討肝豆狀核變性ATP7B基因診斷的方法和意義,以及肝豆狀核變性患者基因型和臨床表型之間的關系。 方法提取7例臨床診斷為肝豆狀核變性的患兒外周血基因組DNA,應用聚合酶鏈反應(PCR)對肝豆狀核變性ATP7B基因的21個外顯子進行擴增,運用DNA直接測序法檢測是否存在突變,并分析WD患者的臨床特點。 結果7例患者中,1例患者在第2外顯子檢測到918_919insC純合突變,以肝腎損害為主要表現,該突變未見報道;1例患者檢測到第8外顯子C2332T雜合突變,表現為嚴重肝損害和溶血性貧血,該突變未見國內報道;1例患者檢測到第12外顯子C2804T純合突變,以肝損害表現為主,癥狀較輕。6例者均發(fā)現存在基因多態(tài)現象,共四種:T1216G、G1366C、G2855A,T3419C。 結論C2332T與918_919insC突變與肝腎損害有關。C2804T是癥狀較輕的溫和突變。918_919insC在國內外未見報道。未見突變的患者不能排除WD,突變可能位于內含子或其他區(qū)域。DNA直接測序法可作為WD患者的基因診斷方法。
【學位單位】：廣州醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2009
【中圖分類】：R742.4
【部分圖文】：

離子到細胞膜的表面。（3）疏水區(qū)為 6 個跨膜螺旋區(qū)和 1 個親媒性區(qū)，穿插于整個多肽鏈中。ATP7B 蛋白位于反面高爾基網，主要功能是調節(jié)銅代謝平衡(1)將肝細胞內過多的銅轉運到分泌途徑，排入膽道;(2)轉運銅離子與前銅藍蛋白結合，使之成為成熟的全銅藍蛋白。ATP7B 的 6 個銅離子結合區(qū)接受銅伴侶蛋白傳遞的銅后，發(fā)生構 象 改 變 ， 此 時 該 酶 的 主 要 生 理 功 能 就 是 定 向 引 導 銅 與 銅 藍 蛋 白 前 體(apro-ceruloplasmin)結合，形成銅藍蛋白（holo-ceruloplasmin)，銅藍蛋白通過血漿分泌進入血循環(huán)，將銅運送到各組織臟器；如果銅經飲食吸收過多，結合到 ATP7B 銅結合區(qū)的銅數量增多，銅結合區(qū)的構象改變，導致 ATP7B 定位于另一個新的位置，進入高爾基體形成的大泡，然后該酶利用水解 ATP 釋放能量，促使銅離子完成跨膜轉運過程，將大泡腔內的銅經肝細胞膜排入膽汁，再通過膽汁由糞便排出多余的銅，這時 ATP7B 再回到高爾基體，這是銅排泄的正常生理途徑（見圖 2）[20]。因此 ATP7B 對維持細胞內銅離子平衡，維持正常的銅代謝具有重要作用。

離子到細胞膜的表面。（3）疏水區(qū)為 6 個跨膜螺旋區(qū)和 1 個親媒性區(qū)，穿插于整個多肽鏈中。ATP7B 蛋白位于反面高爾基網，主要功能是調節(jié)銅代謝平衡(1)將肝細胞內過多的銅轉運到分泌途徑，排入膽道;(2)轉運銅離子與前銅藍蛋白結合，使之成為成熟的全銅藍蛋白。ATP7B 的 6 個銅離子結合區(qū)接受銅伴侶蛋白傳遞的銅后，發(fā)生構 象 改 變 ， 此 時 該 酶 的 主 要 生 理 功 能 就 是 定 向 引 導 銅 與 銅 藍 蛋 白 前 體(apro-ceruloplasmin)結合，形成銅藍蛋白（holo-ceruloplasmin)，銅藍蛋白通過血漿分泌進入血循環(huán)，將銅運送到各組織臟器；如果銅經飲食吸收過多，結合到 ATP7B 銅結合區(qū)的銅數量增多，銅結合區(qū)的構象改變，導致 ATP7B 定位于另一個新的位置，進入高爾基體形成的大泡，然后該酶利用水解 ATP 釋放能量，促使銅離子完成跨膜轉運過程，將大泡腔內的銅經肝細胞膜排入膽汁，再通過膽汁由糞便排出多余的銅，這時 ATP7B 再回到高爾基體，這是銅排泄的正常生理途徑（見圖 2）[20]。因此 ATP7B 對維持細胞內銅離子平衡，維持正常的銅代謝具有重要作用。

ATP7B基因21個外顯子23個片段2%瓊脂糖凝膠電泳圖

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

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本文編號：2829016