NADPH氧化酶P22phox亞基C242T基因多態(tài)性與川崎病及冠狀動脈損傷的相關(guān)研究

發(fā)布時間：2020-09-08 10:09

　　目的:本研究以南充地區(qū)川崎病(Kawasaki disease,KD)患兒和對照組健康兒童外周血基因組DNA為研究對象,對煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶C242T位點進(jìn)行堿基分析,探討NADPH氧化酶p22phox亞基C242T基因多態(tài)性和川崎病發(fā)病以及并發(fā)冠狀動脈損害的的相關(guān)性,為川崎病及冠狀動脈損害并發(fā)癥的診斷及治療提供依據(jù)。方法:收集2017年12月至2018年12月期間川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院診治的75例川崎病患兒血液標(biāo)本;采用病例對照研究,選取同期于我院門診健康體檢兒童75例為對照組,其中根據(jù)有無并發(fā)冠狀動脈損害(coronary artery lesion,CAL)將KD患兒可分成無冠脈損害組(non coronary artery lesion,NCAL)和冠狀動脈損害組(CAL)。應(yīng)用多聚酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)與直接基因測序技術(shù)對研究對象的C242T基因多態(tài)性進(jìn)行檢測。比較KD組與對照組以及CAL組和NCAL組中C242T基因型和等位基因頻率。結(jié)果:p22phox亞基C242T基因基因型頻率(χ2=0.667,P=0.414)及等位基因型頻率(χ2=0.560,P=0.454)在川崎病組與健康對照組兩組間分布無顯著差異(P0.05)。p22phox亞基C242T基因基因型頻率(χ2=4.38,P=0.036)及等位基因頻率(χ2=4.509,P=0.034)在川崎病CAL組與NCAL兩組間分布差異顯著(P0.05);NCAL組等位基因T的頻率(17%)明顯低于等位基因C(83%)。結(jié)論:p22phox亞基C242T基因多態(tài)性可能與川崎病易感性無關(guān)。p22phox亞基C242T基因多態(tài)性可能與川崎病冠狀動脈損害發(fā)生相關(guān)。p22phox亞基C242T等位基因T可能對川崎病冠狀動脈損害具有保護(hù)作用。
【學(xué)位單位】：川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R725.4
【部分圖文】：

電泳圖,NADPH氧化酶,亞基,電泳

A 質(zhì)量的鑒定酸定量儀檢測血液標(biāo)本提取的 DNA，DNA 樣品 A260 之間，濃度在 30-50ng/μl 之間，滿足后續(xù)試驗要求。phox 亞基 C242T 基因 PCR 及酶切結(jié)果述條件進(jìn)行 PCR 模板擴(kuò)增，PCR 產(chǎn)物電泳出現(xiàn)一條。(圖 1)

酶切電泳,亞基,基因型,電泳

CR 擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行酶切后，CT 基因型電泳出現(xiàn)、160bp 和 19斷；CC 基因型電泳只出現(xiàn) 353bp 片斷；TT 基因型電泳出現(xiàn)3bp 兩條片斷。(圖 2)KD 組 CC 基因型 58 例 CT 基因型 16 例 TT 基因型 1 例。對照組 CC 基因型 62 例 CT 基因型 12 例 TT 基因型 1 例。

氧化酶,基因測序,亞基,波峰