目的：觀察缺氧缺血腦損傷(HIBD)新生鼠腦組織Caspase-3活性、Caspase-3蛋白表達量變化，了解Caspase-3特異性肽類抑制劑AC-DEVD-CHO對新生鼠HIBD的治療效果、最佳治療劑量、以及對鼠的遠期學習記憶能力和運動能力影響。旨在為臨床治療新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)探索新的途徑。 方法：采用改良Levine法建立新生鼠HIBD模型后進行以下研究：(1)應(yīng)用四肽熒光底物法檢測HIBD后1h、12h、24h、48h新生鼠腦Caspase-3活性，應(yīng)用免疫組化法、TUNEL法半定量檢測上述各時間點新生鼠腦組織的活性Caspase-3蛋白表達量和細胞凋亡數(shù)。(2)分組給予HIBD后1h新生鼠不同劑量Ac-DEVD-CHO(50ng、100ng、200ng、300ng、400ng)腦室注射, 24h后檢測各組新生鼠患側(cè)腦組織Caspase-3活性的變化，選出最佳治療劑量；(3)采用選出的最佳治療劑量300ng腦室注射, 24h后處死動物作病理學觀察、TUNEL法檢測原位細胞凋亡，喂養(yǎng)鼠至1月齡時測試鼠學習記憶和運動能力。 結(jié)果:(1)HIBD后1h患側(cè)(左側(cè))腦組織Caspase-3活性已升高，HIBD后24h達高峰，48h后明顯下降。其顯著性檢驗如下：a、HIBD后各時間點之間比較左側(cè)腦組織Caspase-3活性有顯著性差異( p0.01)；b、HIBD后各時間點與假手術(shù)組比較左側(cè)腦組織Caspase-3活性有顯著性差異(p0.05)；c、HIBD后各時間點左側(cè)和右側(cè)比較Caspase-3活性有顯著性差異(p0.05)；d、HIBD后各時間點與假手術(shù)組比較右側(cè)腦組織Caspase-3活性稍有增加，但差異無顯著性。(2)HIBD新生鼠患側(cè)腦組織活性Caspase-3陽性細胞數(shù)明顯增多。假手術(shù)組左側(cè)腦組織陽性細胞占細胞總數(shù)的百分率為0.65±0.67％；HIBD24h組左側(cè)腦組織陽性細胞百分率為52.94±7.9％；HIBD48h組為41.5±5.7％。HIBD24、48h組較假手術(shù)組陽性細胞百分率均有顯著差異(p0.01)。(3)HE染色見HIBD組新生鼠患側(cè)皮質(zhì)海馬凋亡細胞呈彌散或小灶性分布，細胞體積縮小、核固縮、核碎裂。HIBD24、48h組凋亡細胞明顯增多。(4)HIBD組新生鼠患側(cè)腦組織TUNEL染色陽性細胞數(shù)隨時間增多，假手術(shù)組新生鼠左腦TUNEL陽性細胞數(shù)占細胞總數(shù)0.6±0.77％，HIBD1h組左側(cè)腦組織陽性細胞占細胞總數(shù)5.2±1.93 ％，HIBD12h組占18.5±6.23％；HIBD24h組占44.13±8.41％；HIBD48h組占30.8±9.58％；HIBD1W組占14.0±7.1％。HIBD各組的細胞凋亡百分率較對照組均有顯著差異 WP=7 (p0.01)，各組之間比較也均有顯著差異(p0.01)；(5)HIBD后1h分別予腦室注射Ac-DEVD-CHO50ng、100ng、200ng、300ng、400ng，24h 后檢測，患側(cè)腦組織Caspase-3活性隨注射Ac-DEVD-CHO劑量增加而遞減；(6)HIBD后24h檢測，Ac-DEVD-CHO300ng治療組新生鼠患側(cè)腦組織TUNEL陽性細胞百分率為30.2±11.2％，N.S.對照組為44.6±12.4％，差異顯著(P0.01)；(7)Ac-DEVD-CHO治療組新生鼠較N.S.對照組在穿梭箱實驗中受電擊時間顯著縮短(p0.05)；電擊次數(shù)亦減少，但差異不顯著；Ac-DEVD-CHO治療組較N.S.對照組自主活動次數(shù)、疲勞儀實驗潛伏期均無顯著差異。 結(jié)論：1、HIBD新生鼠患側(cè)腦組織中Caspase-3明顯被激活，提示Caspase-3在HIBD神經(jīng)細胞凋亡中起重要作用。2、HIBD新生鼠腦皮質(zhì)和海馬的神經(jīng)細胞凋亡隨時間先呈依從性增多，48h后逐漸下降。3、Ac-DEVD-CHO側(cè)腦室注射可顯著減少HIBD新生鼠腦細胞凋亡，提示其對HIBD有治療作用。4、Ac-DEVD-CHO能改善HIBD新生鼠的遠期學習記憶能力，但對其遠期運動能力無影響。
【學位單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2003
【中圖分類】：R722.121

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 祁巖超;劉振寰;柴鐵劬;唐純志;;針刺抑制幼鼠HIBD腦組織神經(jīng)細胞凋亡的實驗研究[J];中國實用神經(jīng)疾病雜志;2011年15期

2 欒佐;崔盈;楊印祥;王彩英;古桂雄;;粒細胞集落刺激因子對移植的人神經(jīng)干細胞體內(nèi)分化的影響[J];臨床兒科雜志;2011年09期

3 全裕鳳;張華;;HIF-1α和VEGF在高氧暴露早產(chǎn)鼠視網(wǎng)膜的表達及地塞米松的干預效應(yīng)[J];中國醫(yī)藥指南;2011年25期

4 譚挺;胡志奇;;端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶高表達新生鼠真皮細胞株的構(gòu)建及其生物學功能的初步研究[J];實用醫(yī)學雜志;2011年12期

5 張麗娟;鐘榮梅;吳星恒;;心脈隆對窒息新生鼠心肌NF-κB和TNF-α的影響[J];南昌大學學報(醫(yī)學版);2011年03期

6 王德健;李巧云;徐世軍;曾南;;人參皂苷Rg1對新生鼠HIBD后血管再生的影響[J];四川大學學報(醫(yī)學版);2011年04期

7 肖華平;肖金仿;陶濤;古妙寧;;丙泊酚對新生鼠神經(jīng)干細胞增殖及學習記憶的影響[J];臨床麻醉學雜志;2011年06期

8 顏小華;陳啟文;徐昕;李延成;嚴紹明;黃振剛;張麗娜;;臍血間充質(zhì)干細胞靜脈移植治療新生鼠腦血腫繼發(fā)腦水腫[J];中國組織工程研究與臨床康復;2011年32期

9 魏二霞;柯曉云;陳慧;劉子彬;吳偉;;不同吸氧濃度對新生鼠視網(wǎng)膜血管發(fā)育和血管內(nèi)皮生長因子表達的影響[J];中國組織工程研究與臨床康復;2011年24期

10 鄭奇輝;李國才;程靜;方芳;吳中海;;cAMP-PKA通路參與Ⅱ組代謝性谷氨酸受體對新生鼠離體延髓腦片呼吸節(jié)律性放電的調(diào)節(jié)[J];生理學報;2011年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 吳中海;潘秉興;王寧黔;史月;李自強;;新生鼠離體腦片吸氣神經(jīng)元的分布及非NMDA受體對呼吸的調(diào)制[A];第九次全國生物物理大會學術(shù)會議論文摘要集[C];2002年

2 劉超;陳璐;袁慶新;劉翠萍;茅曉東;;宮內(nèi)營養(yǎng)不良對新生鼠胰腺發(fā)育及功能影響的研究[A];第二屆全國妊娠糖尿病學術(shù)會議論文匯編[C];2008年

3 陳玉君;黃麗萍;龐玉生;陳克正;;內(nèi)皮素受體、內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶-1在新生鼠肺出血發(fā)生過程中肺內(nèi)的表達[A];中華醫(yī)學會第十五次全國兒科學術(shù)大會論文匯編（上冊）[C];2010年

4 吳中海;史月;王劍莉;李自強;;異丙酚對新生鼠離體延髓腦片吸氣神經(jīng)元放電的影響[A];中國生理學會第六屆應(yīng)用生理學委員會全國學術(shù)會議論文摘要匯編[C];2003年

5 潘麗;步軍;孫建華;薛辛東;;β-catenin在高氧致新生鼠BPD中的作用及其機制的研究[A];第六屆江浙滬兒科學術(shù)會議暨兒科學基礎(chǔ)與臨床研究進展學術(shù)班論文匯編[C];2009年

6 龐希寧;張海心;劉朝陽;楊立松;夏鯤;顧文佳;宋今丹;吳玉斌;李玉杰;;內(nèi)毒素誘導新生鼠產(chǎn)生一氧化氮與腎臟損傷的研究[A];中國細胞生物學學會醫(yī)學細胞生物學、免疫細胞生物學和發(fā)育生物學專業(yè)委員會學術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2002年

7 董倫;傅文燕;辛華;王曉靜;;絞股藍皂苷對酒精損傷的新生鼠腦內(nèi)神經(jīng)干細胞的保護作用研究[A];“細胞活動 生命活力”——中國細胞生物學學會全體會員代表大會暨第十二次學術(shù)大會論文摘要集[C];2011年

8 金海燕;胡智勇;吳亦棟;周晨;;氯胺酮對新生鼠海馬Tau蛋白mRNA及Ser396/404位點表達影響[A];2011年浙江省小兒外科學術(shù)年會論文匯編[C];2011年

9 沈哲旎;李麗華;屈藝;母德志;;新生大鼠缺血缺氧腦病模型中VEGF表達的改變[A];中華醫(yī)學會第十四次全國兒科學術(shù)會議論文匯編[C];2006年

10 蘆惠;薛辛東;;基質(zhì)金屬蛋白酶2，9在新生鼠腸損傷的動態(tài)表達及意義[A];浙江省醫(yī)學會圍產(chǎn)醫(yī)學分會成立大會暨“圍產(chǎn)醫(yī)學熱點問題”學術(shù)會議論文匯編[C];2008年

相關(guān)重要報紙文章 前7條

1 白毅;中科院生物物理所發(fā)現(xiàn)T細胞數(shù)目參與調(diào)節(jié)天然免疫反應(yīng)[N];中國醫(yī)藥報;2008年

2 北京大學基礎(chǔ)醫(yī)學院 周春燕;活體心臟帶給我們什么[N];健康報;2008年

3 ;2000～2001年度冶金科學技術(shù)獎二等獎介紹(04)[N];世界金屬導報;2002年

4 記者王俊鳴;用骨髓干細胞可使盲鼠復明[N];科技日報;2002年

5 齊繼成;褪黑激素風靡美國[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2001年

6 ;全反式維甲酸促進造血干／祖細胞植入的實驗研究[N];中國醫(yī)藥報;2003年

7 記者 顧鋼;實驗鼠睪丸細胞成功轉(zhuǎn)換為胚胎干細胞[N];科技日報;2009年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 金冬梅;新生SD大鼠實驗性缺氧缺血腦組織內(nèi)源性神經(jīng)干細胞增殖及BRCA1基因的調(diào)控作用研究[D];四川大學;2006年

2 嚴彩霞;腸三葉因子對新生鼠NEC模型PI3K/AKT信號通路的影響及意義[D];武漢大學;2011年

3 武輝;圍產(chǎn)期缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)細胞凋亡、膠質(zhì)細胞病理及妥泰對其腦保護作用的研究[D];吉林大學;2004年

4 何平;新生鼠窒息致心肌損傷及相關(guān)因素影響的實驗研究[D];昆明醫(yī)學院;2010年

5 于立君;亞低溫對新生鼠缺氧缺血腦損傷的能量代謝的作用[D];復旦大學;2003年

6 王菊莉;新生大鼠HIBD晚期神經(jīng)細胞凋亡及bFGF對其影響[D];中國醫(yī)科大學;2003年

7 王紀文;反復新生期大鼠癇性發(fā)作對神經(jīng)發(fā)生的影響及其遠期后果[D];山東大學;2005年

8 張素玲;高氧致新生鼠肺VEGF、VEGFRs、HIF-1α、ANG-1、TIE-2及PECAM-1動態(tài)改變的實驗研究[D];中國醫(yī)科大學;2005年

9 蘆惠;氧化應(yīng)激、一氧化氮合酶及表皮生長因子在新生鼠腸損傷中的動態(tài)變化及機制研究[D];中國醫(yī)科大學;2005年

10 馮雪;新生鼠實驗性缺氧缺血性損傷腦組織MCP-1及其受體CCR2的表達與小膠質(zhì)細胞活化規(guī)律的研究[D];四川大學;2005年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 張雨平;Caspase-3抑制劑抗新生鼠缺氧缺血腦損傷實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學;2003年

2 李維超;新生大鼠缺氧缺血腦損傷caspase-3mRNA的表達變化及1，6-二磷酸果糖的神經(jīng)保護機制研究[D];天津醫(yī)科大學;2004年

3 冀紅;血管內(nèi)皮生長因子基因治療新生鼠缺氧缺血性腦損傷的實驗研究[D];大連醫(yī)科大學;2003年

4 徐雅麗;維甲酸下調(diào)結(jié)締組織生長因子表達減輕新生鼠高氧肺損傷[D];重慶醫(yī)科大學;2011年

5 李潛;鋰劑對新生鼠缺氧缺血性腦損傷的神經(jīng)保護作用及其機制[D];鄭州大學;2010年

6 張巧鳳;AQP1及α-ENaC基因及蛋白在高氧致肺損傷新生鼠中動態(tài)變化[D];中國醫(yī)科大學;2010年

7 宋紀國;高氧誘導肺損傷新生鼠肺表面活性蛋白基因表達的研究[D];重慶醫(yī)科大學;2010年

8 周中成;雙歧桿菌對新生鼠壞死性小腸結(jié)腸炎模型腸損傷保護機制的研究[D];蘇州大學;2010年

9 徐洪濤;新生鼠高濃度氧肺損傷機制及臨界值的研究[D];第三軍醫(yī)大學;2003年

10 黃英;I～（125）-NGF在缺氧新生鼠腦內(nèi)的吸收分布[D];吉林大學;2005年

本文編號：2812049