目的:建立巢式RT-PCR和FISH技術(shù)檢測(cè)融合基因的方法,檢測(cè)TEL-AML1、E2A/PBX1、MLL/AF4、BCR/ABL 4種融合基因在兒童急性淋巴細(xì)胞白血病中的陽(yáng)性率,并對(duì)巢式RT-PCR和FISH技術(shù)在融合基因檢測(cè)方面的側(cè)重點(diǎn)進(jìn)行初步比較。方法:采用巢式逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)和熒光原位雜交技術(shù)(FISH)檢測(cè)63例初診ALL患兒骨髓單核細(xì)胞中TEL-AML1、E2A/PBX1、BCR/ABL、MLL/AF4融合基因�；純杭膊∵_(dá)到完全緩解后又用巢式RT-PCR和FISH技術(shù)檢測(cè)5例TEL-AML1陽(yáng)性患兒骨髓中TEL-AML1融合基因。 結(jié)果: ①巢式RT-PCR技術(shù)在初診ALL患兒中檢測(cè)到14例TEL-AML1陽(yáng)性、3例E2A/PBX1陽(yáng)性、1例BCR/ABL陽(yáng)性、2例MLL/AF4陽(yáng)性。 ②FISH技術(shù)在初診ALL患兒中檢測(cè)到16例TEL-AML1陽(yáng)性、3例E2A/PBX1陽(yáng)性、1例BCR/ABL陽(yáng)性、2例MLL/AF4陽(yáng)性。 ③5例TEL-AML1陽(yáng)性患兒完全緩解后,巢式RT-PCR檢測(cè)其中有2例TEL-AML1陽(yáng)性。而FISH技術(shù)并未發(fā)現(xiàn)異常。 結(jié)論: ①兒童ALL染色體易位形成的融合基因需用巢式RT-PCR或FISH等分子生物學(xué)檢測(cè)方法加以證實(shí)。 ②在初發(fā)ALL兒童中的TEL-AML1陽(yáng)性率為25.4%(16/63),E2A/PBX1陽(yáng)性率為4.8%(3/63),BCR/ABL陽(yáng)性率為1.6%(1/63),MLL/AF4陽(yáng)性率為3.1%(2/63)。 ③FISH技術(shù)在初診ALL患兒檢測(cè)過程中較巢式RT-PCR更加準(zhǔn)確和直觀。 ④巢式RT-PCR技術(shù)比FISH技術(shù)在MRD檢測(cè)方面更有優(yōu)勢(shì)。
【學(xué)位單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R733.7
【部分圖文】：

注：2 紅 2 綠為正常細(xì)胞，1 個(gè)黃色信號(hào)為 TEL/AML1融合信號(hào)，1 個(gè)綠信號(hào)、1 個(gè)紅信號(hào)為同源染色體上的TEL 和 AML1 基因。TEL/AML1 陽(yáng)性細(xì)胞個(gè)數(shù)＞5.4%圖 6 BCR/ABL FISH 圖 7 MLL/AF4 FISH注:2 紅 2 綠為正常細(xì)胞，黃色信號(hào)為融合基因陽(yáng)性細(xì)，E2A/PBX1 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞4.1%注:BCR/ABL 雙色標(biāo)記單融合信號(hào)探針，BCR標(biāo)記為綠色，ABL 標(biāo)記為紅色，BCR/ABL 陽(yáng)性注:2 紅 2 綠為正常細(xì)胞，黃色信號(hào)為融合基因陽(yáng)性細(xì)胞，MLL/AF4 陽(yáng)性細(xì)胞個(gè)數(shù)＞4.8%

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本文編號(hào)：2810203