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巢式RT-PCR和FISH聯(lián)合應用檢測兒童ALL常見融合基因

發(fā)布時間:2020-09-01 20:12
   目的:建立巢式RT-PCR和FISH技術檢測融合基因的方法,檢測TEL-AML1、E2A/PBX1、MLL/AF4、BCR/ABL 4種融合基因在兒童急性淋巴細胞白血病中的陽性率,并對巢式RT-PCR和FISH技術在融合基因檢測方面的側(cè)重點進行初步比較。方法:采用巢式逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)和熒光原位雜交技術(FISH)檢測63例初診ALL患兒骨髓單核細胞中TEL-AML1、E2A/PBX1、BCR/ABL、MLL/AF4融合基因;純杭膊∵_到完全緩解后又用巢式RT-PCR和FISH技術檢測5例TEL-AML1陽性患兒骨髓中TEL-AML1融合基因。 結(jié)果: ①巢式RT-PCR技術在初診ALL患兒中檢測到14例TEL-AML1陽性、3例E2A/PBX1陽性、1例BCR/ABL陽性、2例MLL/AF4陽性。 ②FISH技術在初診ALL患兒中檢測到16例TEL-AML1陽性、3例E2A/PBX1陽性、1例BCR/ABL陽性、2例MLL/AF4陽性。 ③5例TEL-AML1陽性患兒完全緩解后,巢式RT-PCR檢測其中有2例TEL-AML1陽性。而FISH技術并未發(fā)現(xiàn)異常。 結(jié)論: ①兒童ALL染色體易位形成的融合基因需用巢式RT-PCR或FISH等分子生物學檢測方法加以證實。 ②在初發(fā)ALL兒童中的TEL-AML1陽性率為25.4%(16/63),E2A/PBX1陽性率為4.8%(3/63),BCR/ABL陽性率為1.6%(1/63),MLL/AF4陽性率為3.1%(2/63)。 ③FISH技術在初診ALL患兒檢測過程中較巢式RT-PCR更加準確和直觀。 ④巢式RT-PCR技術比FISH技術在MRD檢測方面更有優(yōu)勢。
【學位單位】:山西醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位年份】:2009
【中圖分類】:R733.7
【部分圖文】:

融合基因,信號,紅信號,同源染色體


注:2 紅 2 綠為正常細胞,1 個黃色信號為 TEL/AML1融合信號,1 個綠信號、1 個紅信號為同源染色體上的TEL 和 AML1 基因。TEL/AML1 陽性細胞個數(shù)>5.4%圖 6 BCR/ABL FISH 圖 7 MLL/AF4 FISH注:2 紅 2 綠為正常細胞,黃色信號為融合基因陽性細,E2A/PBX1 陽性細胞數(shù)>4.1%注:BCR/ABL 雙色標記單融合信號探針,BCR標記為綠色,ABL 標記為紅色,BCR/ABL 陽性注:2 紅 2 綠為正常細胞,黃色信號為融合基因陽性細胞,MLL/AF4 陽性細胞個數(shù)>4.8%

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本文編號:2810203


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