【摘要】： 目的通過(guò)檢測(cè)Kiss-1mRNA在雌性性早熟大鼠不同時(shí)期(青春期早期青春期中期及正常青春前期正常青春期早期)下丘腦中的表達(dá),探討Kiss-1在中樞性性早熟發(fā)生發(fā)展中的作用。 方法1、建立動(dòng)物模型:正常5日齡清潔級(jí)Sprague-Dawley雌性大鼠40只,隨機(jī)分為4組,對(duì)照1組,對(duì)照2組,模型1組,模型2組,每組10只。模型1組、模型2組大鼠于5日齡每只皮下注射300μg達(dá)那唑以誘導(dǎo)中樞性性早熟。對(duì)照1組、對(duì)照2組大鼠每只皮下注射等體積的生理鹽水。出生后25天開(kāi)始每天檢查陰道開(kāi)口情況,如動(dòng)物在第一次檢查時(shí)陰門(mén)已經(jīng)開(kāi)口,則陰門(mén)開(kāi)口時(shí)間記為25天,直至大鼠建立正常的性周期。2、模型1組大鼠在陰道口開(kāi)放后第一個(gè)發(fā)情間期被處死,對(duì)照1組與其1:1比例同時(shí)處死,對(duì)照2組大鼠是在進(jìn)入青春期后(第一個(gè)發(fā)情間期)處死,模型2組在第二個(gè)發(fā)情間期處死;處死前大鼠稱重,處死后留取子宮和卵巢標(biāo)本并稱重,計(jì)算子宮指數(shù)和卵巢指數(shù);同時(shí)切取下丘腦組織100mg,冷藏備用;。3、化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)大鼠不同時(shí)期血清LH的濃度。5、采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)對(duì)照1組,對(duì)照2組,模型1組,模型2組下丘腦的Kiss-1和GnRH mRNA的表達(dá)。 結(jié)果1、模型1組,模型2組大鼠陰道口開(kāi)放時(shí)間和第一個(gè)發(fā)情間期時(shí)間較對(duì)照1組提前(P0.05),提示模型組大鼠青春期啟動(dòng)提前發(fā)生;模型1組,模型2組(D1)的LH水平及GnRH mRNA的水平與對(duì)照1組比較有顯著差異(P0.05),但與對(duì)照2組比較無(wú)顯著性;以上結(jié)果表明中樞性性早熟模型建立成功。2、模型1組大鼠血清LH、GnRHmRNA水平及卵巢、子宮的重量與對(duì)照2組比較差異均無(wú)顯著性,但均大于對(duì)照1組(P0.05),模型2組大鼠血清LH(D2)均大于模型1組,差異有顯著性(P0.05),結(jié)果提示LH及GnRH mRNA在青春前期組性早熟青春期早期組性早熟青春期中期組的水平逐漸增高。3、與對(duì)照1組(正常青春前期)相比,模型1組(性早熟青春期早期)和模型2組(性早熟青春期中期)的Kiss-1mRNA的水平分別增加1.39和2.77倍,差異具有顯著性意義(P0.05),對(duì)照2組(正常青春期早期)與模型1組(性早熟青春期早期)的Kiss-1mRNA的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論Kiss-1mRNA的表達(dá)與生長(zhǎng)發(fā)育的時(shí)期密切相關(guān),提示Kiss-1可能與中樞性性早熟的發(fā)生有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R725.8

【引證文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 堵吉;持續(xù)光照對(duì)雌性大鼠生殖內(nèi)分泌節(jié)律的影響及滋陰補(bǔ)陽(yáng)序貫中藥干預(yù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2012年

本文編號(hào)：2802624