Gilbert綜合征家系UGT1A1基因遺傳學(xué)分析

發(fā)布時(shí)間：2020-08-24 13:34

【摘要】： [目的]Gilbert綜合征為良性非結(jié)合性高膽紅素血癥,是臨床上常見的遺傳性膽紅素代謝障礙性疾病。國外報(bào)道發(fā)病率為3～10%。臨床表現(xiàn)為肝臟無器質(zhì)性病變的非溶血性間歇性非結(jié)合性高膽紅素血癥。一般預(yù)后良好,不需要治療或長期藥物監(jiān)測。由于臨床醫(yī)師對其認(rèn)識(shí)不足常被誤診為肝細(xì)胞性黃疸、梗阻性黃疸或溶血性黃疸而進(jìn)行長期不必要的治療,給患者及家屬帶來不必要的負(fù)擔(dān)。故臨床及時(shí)作出診斷極為重要。本研究通過對一個(gè)Gilbert綜合征遺傳家系致病基因突變位點(diǎn)的檢測,對明確診斷及與其它黃疸性疾病的鑒別有重要意義。 [方法]本研究對象為2007年5月住院于天津市兒童醫(yī)院一黃疸患兒,根據(jù)其病史、肝功能檢查及苯巴比妥治療試驗(yàn)結(jié)果臨床初步診斷為Gilbert綜合征,抽取該先證者及其4名家系成員外周靜脈血,提取基因組DNA,應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶UGT1A1基因的5個(gè)外顯子、啟動(dòng)子TATA盒及上游苯巴比妥增強(qiáng)元件,以瓊脂糖電泳鑒定PCR產(chǎn)物,純化后直接測序鑒定分析。同時(shí)對家系成員的血液標(biāo)本進(jìn)行生化指標(biāo)的檢測。 [結(jié)果]先證者基因測序結(jié)果顯示與血清膽紅素水平密切相關(guān)的尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶UGT1A1基因1號(hào)外顯子第211位的鳥嘌呤(G)突變?yōu)橄汆堰?A),為純合突變,導(dǎo)致編碼產(chǎn)物中第71位甘氨酸變?yōu)榫彼?Gly71Arg),而UGT1A1基因啟動(dòng)子區(qū)域和內(nèi)含子/外顯子剪接位點(diǎn)序列及苯巴比妥增強(qiáng)元件未檢測到突變。家系其他成員該基因的相應(yīng)位點(diǎn)檢測結(jié)果顯示其父、兄、祖母均存在Gly71Arg純合突變,其母為雜合突變。血液生化檢測結(jié)果該家系成員的血清非結(jié)合膽紅素水平均高于正常范圍,純合突變者血清非結(jié)合膽紅素水平高于雜合突變者,基因型與表型一致。 [結(jié)論]1.該Gilbert綜合征家系UGT1A1基因突變位點(diǎn)為第1外顯子第211位的鳥嘌呤(G)突變?yōu)橄汆堰?A),導(dǎo)致編碼產(chǎn)物中第71位甘氨酸變?yōu)榫彼?Gly71Arg),未發(fā)現(xiàn)其它突變點(diǎn)。2.遺傳方式為常染色體遺傳。3.黃疸是兒科重要的臨床癥狀之一,病因復(fù)雜多樣,基因診斷客觀、準(zhǔn)確,為早期明確診斷提供了新的方向,可以減少患者不必要的痛苦,具有很好的臨床應(yīng)用價(jià)值。4.尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶是生物轉(zhuǎn)化時(shí)重要的一種酶,UGT1A1基因表達(dá)減少會(huì)增加人體對某些藥物的敏感性,臨床確診Gilbert綜合征有助于及時(shí)發(fā)現(xiàn)處于藥物毒性危險(xiǎn)中的患者,及時(shí)采用個(gè)性化的給藥方式。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R722.1
【圖文】：

序列,先證者,號(hào)外,箭頭

測序結(jié)果與基因庫序列進(jìn)行對比分析顯示先證者 UGTIAl的1號(hào)外顯子 (exonl，Exl)第211位的鳥嗓吟(G)突變?yōu)橄汆暌?A)，為純合突變，導(dǎo)致編碼產(chǎn)物中第71位甘氨酸變?yōu)榫彼?Gly71Arg)，見圖2一6。TATA盒及其余區(qū)域均未檢測到序列差異，各內(nèi)含子/外顯子剪接位點(diǎn)序列都遵循GT/AG法則，未見突變，見圖7。因此，推斷先證者的病因?yàn)?UGTIAl編碼區(qū)突變，即此家系的致病基因突變可能定位于1號(hào)外顯子。為了明確該家系 UGTIAl基因突變的具體情況，進(jìn)一步對此家系的其他成員(患兒父親Gl一1、母親Gl一2、兄Gl一3、祖母Gl一4)的第1號(hào)外顯子進(jìn)行測序，發(fā)現(xiàn)Gl一1，Gl一3

基因,正常人