【摘要】： 前言 膀胱出口梗阻(Bladder Outlet Obstruction，BOO)在臨床上比較常見，其主要危害在于常導(dǎo)致膀胱功能障礙，出現(xiàn)膀胱過(guò)度活動(dòng)癥(Overactive Bladder，OAB)。長(zhǎng)期的慢性梗阻對(duì)膀胱的影響很大，常常會(huì)引起尿頻、尿急、尿潴留、尿失禁，甚至上尿路損害。P2X嘌呤受體是近年新發(fā)現(xiàn)的一種嘌呤能ATP受體，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)有七種P2X受體亞型，廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)，在膀胱的感覺和運(yùn)動(dòng)方面起著重要作用。本研究通過(guò)手術(shù)方法部分結(jié)扎大鼠的膀胱出口，制作出膀胱出口梗阻的動(dòng)物模型，并根據(jù)梗阻時(shí)間不同進(jìn)行分組。應(yīng)用RT-PCR方法檢測(cè)P2X受體亞型mRNA在正常及BOO大鼠膀胱組織中的表達(dá)，以初步探討P2X受體在BOO時(shí)膀胱舒縮功能調(diào)節(jié)中的作用及其與膀胱功能障礙的關(guān)系，為臨床治療BOO所引起的膀胱功能障礙提供新的思路。 材料與方法 一、實(shí)驗(yàn)材料 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雌性Wistar大白鼠，3-4月齡，250克左右。 2、主要試劑、引物 總RNA分離試劑、RT-PCR試劑盒、DNA聚合酶、P2X_1～P2X_7受體亞型基因mRNA引物。 3、主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備 眼科手術(shù)器械、紫外分光光度計(jì)、PCR擴(kuò)增儀、臺(tái)式低溫高速離心機(jī)、水平電泳槽、電泳儀、自動(dòng)電泳凝膠成像分析儀。 二、實(shí)驗(yàn)方法 1、膀胱出口梗阻模型的建立。 2、采用RT-PCR方法檢測(cè)P2X受體各亞型mRNA在膀胱中的表達(dá)情況。 3、統(tǒng)計(jì)分析 所有數(shù)據(jù)均以x±s表示，采用SPSS統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 一、動(dòng)物模型結(jié)果 對(duì)照組10只大鼠全部存活，梗阻2周組和梗阻4周組分別存活7只。死亡大鼠均存在腎積水，存活大鼠中梗阻2周組和梗阻4周組發(fā)現(xiàn)腎積水分別為2只和5只。 二、RT-PCR結(jié)果 正常及BOO大鼠膀胱中都表達(dá)有7種P2X受體亞型。正常大鼠膀胱中P2X_1和P2X_4受體表達(dá)相對(duì)較高，而在BOO大鼠膀胱中P2X_1、P2X_4、P2X_6和P2X_7受體亞型mRNA表達(dá)降低，P2X_2和P2X_3表達(dá)升高，P2X_6在各組中表達(dá)均很低且無(wú)明顯變化。與正常組相比梗阻2周組P2X_1降低與P2X_2升高有顯著差異，其余各亞型變化均無(wú)顯著差異。正常組與梗阻4周組差別均具有顯著性。 討論 BOO是臨床上引起膀胱功能障礙的最重要原因之一。近年國(guó)外研究表明非膽堿能非腎上腺素能(non-adrenergic non-cholinergic，NANC)神經(jīng)是除膽堿能和腎上腺素能神經(jīng)之外的另一個(gè)參與膀胱功能調(diào)節(jié)的重要因素，但相關(guān)的研究報(bào)道還比較缺乏。 P2X受體是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一種嘌呤能受體，屬于ATP門控的離子通道型受體，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)有七種亞型為P2X_(1-7)。這些受體廣泛分布于全身各組織當(dāng)中，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)中均有表達(dá)，在多種生物活動(dòng)中發(fā)揮重要的生理和病理作用，主要參與平滑肌的舒張和收縮功能的調(diào)節(jié)。 本研究結(jié)果顯示BOO產(chǎn)生后，膀胱功能受到損害，P2X受體亞型發(fā)生變化，P2X_2和P2X_3受體有取代P2X_1和P2X_4成為主要的調(diào)節(jié)BOO膀胱功能的嘌呤能受體。隨著梗阻時(shí)間的增加，膀胱功能損害加重，上尿路損害亦加重，P2X受體亞型變化更為明顯，可推測(cè)P2X受體亞型變化可能是BOO后膀胱功能障礙產(chǎn)生的機(jī)制。 結(jié)論 BOO大鼠膀胱中P2X受體部分亞型mRNA表達(dá)發(fā)生變化，這些變化在BOO后膀胱功能障礙的發(fā)病機(jī)制中可能有重要作用。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R726.9
【圖文】：

圖1PZX受體亞型在正常大鼠膀膚中的表達(dá)M:DNAMarkerDL2000;1一7:PZX，~PZX7圖2PZX受體亞型在梗阻2周大鼠膀膚中的表達(dá)M:DNAMarkerDL2000;l一7:PZX，~PZX7234567

圖2PZX受體亞型在梗阻2周大鼠膀膚中的表達(dá)M:DNAMarkerDL2000;l一7:PZX，~PZX7234567圖3PZX受體亞型在梗阻4周大鼠膀膚中的表達(dá)M:DNAMarkerDL2000;1一7:PZX，~PZX7討論BOO是臨床上常見疾病之一，可導(dǎo)致許多嚴(yán)重的最常見原因。長(zhǎng)期的膀膚出口部分梗阻所繼發(fā)的膀

圖1PZX受體亞型在正常大鼠膀膚中的表達(dá)M:DNAMarkerDL2000;1一7:PZX，~PZX7圖2PZX受體亞型在梗阻2周大鼠膀膚中的表達(dá)M:DNAMarkerDL2000;l一7:PZX，~PZX7234567

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 楊昕,宋波,方強(qiáng),金錫御,李為兵;P2x受體亞型在大鼠逼尿肌不穩(wěn)定中的作用研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年08期

2 李永剛,鐘甘平;泌尿系統(tǒng)P2X受體的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).泌尿系統(tǒng)分冊(cè);2005年01期

本文編號(hào)：2791937