【摘要】：目的:從基因和蛋白水平探討轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2(transglutaminase-2,TGM2)在過敏性紫癜腎損傷中的表達(dá)及其臨床意義,初步探討過敏性紫癜患兒腎損害可能的發(fā)病機(jī)制,從而為臨床對(duì)過敏性紫癜性腎炎的治療提供新的方法和理論依據(jù)。方法:納入2016年10月至2017年4月江西省兒童醫(yī)院住院的初發(fā)的過敏性紫癜患兒,從中隨機(jī)選取20例過敏性紫癜、20例腎性過敏性紫癜患兒作為實(shí)驗(yàn)組;從江西省兒童醫(yī)院兒童保健科隨機(jī)選取同期年齡、性別相匹配的20例健康體檢兒童作為對(duì)照組,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測過敏性紫癜組、腎型過敏性紫癜組和健康對(duì)照組外周血有核細(xì)胞TGM2 mRNA的表達(dá)。從江西省兒童醫(yī)院病理科隨機(jī)選取同期年齡和性別匹配的5例腎母細(xì)胞瘤患者手術(shù)切除組織,分離腫瘤組織遠(yuǎn)端的正常組織作為對(duì)照組,應(yīng)用免疫組化方法檢測腎型過敏性紫癜組和正常對(duì)照腎組織TGM2蛋白的表達(dá),并根據(jù)ISKDC分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)腎型過敏性紫癜組腎臟損害程度分組,分析TGM2的表達(dá)強(qiáng)度與腎臟病理損害程度的關(guān)系。結(jié)果:腎型過敏性紫癜組、過敏性紫癜組和健康對(duì)照組外周血有核細(xì)胞TGM2mRNA相對(duì)表達(dá)水平分別為(5.33±1.46)、(1.21±0.32)和(1.19±0.15),腎型過敏性紫癜組較過敏性紫癜組和健康對(duì)照組相對(duì)表達(dá)水平均高,且差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.031和0.035),過敏性紫癜組與健康對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。腎型過敏性紫癜組腎組織TGM2陽性表達(dá)評(píng)分四分位數(shù)(P_(25),P_(75))為2.25-3.00,正常對(duì)照組TGM2陽性表達(dá)評(píng)分四分位數(shù)為1.00-1.50,兩組差異具有顯著性(P=0.001);根據(jù)ISKDC分級(jí),20例腎型過敏性紫癜患兒中包括Ⅱ級(jí)4例,Ⅲ級(jí)12例,Ⅳ級(jí)4例,其TGM2陽性表達(dá)評(píng)分四分位數(shù)分別為2.00-2.75、3.00-3.00和3.00-4.00,三組表達(dá)水平具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,且其表達(dá)水平與腎型過敏性紫癜病理分級(jí)呈正相關(guān)(Kendall相關(guān)系數(shù)為0.659),即病理分級(jí)程度越重,TGM2表達(dá)水平越高。結(jié)論:TGM2的表達(dá)與過敏性紫癜腎臟受損有關(guān),且與腎臟病理損害程度有關(guān),TGM2可能參與了腎型過敏性紫癜的發(fā)病機(jī)制,其表達(dá)升高可能成為過敏性紫癜患兒腎臟損傷及損傷程度的一種反映指標(biāo)。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R725.5;R726.9
【圖文】：

14圖 1 RNA 瓊脂糖凝膠電泳性鑒定熔解曲線分析，內(nèi)參 GAPDH 基因和 TGM2 基因的擴(kuò)圖 2.3 和圖 2.4 所示：擴(kuò)增曲線中基線整體平行性良好，示各標(biāo)本擴(kuò)增效率在，Tm 值一致，提示擴(kuò)增產(chǎn)物特異性體）的產(chǎn)生。 2%瓊脂糖凝膠電泳分析后，可見條帶片段長度為 121bp，GAPDH 擴(kuò)增片段長度，提示擴(kuò)增片段的特異性良好（

第 3 章 結(jié)果3）測序?qū)?PCR 產(chǎn)物連接 pGEM -T Easy 載體（因目的片段較短，以提高測序的性）送檢上海生工公司測序，其結(jié)果完全符合 GenBank 中 TGM2 mRNA 序圖 4 所示。綜合以上 3 種方法可確認(rèn)擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性，即為實(shí)驗(yàn)?zāi)康漠a(chǎn)物。

性）送檢上海生工公司測序，其結(jié)果完全符合 GenBank 中 TGM2 mRNA 序圖 4 所示。綜合以上 3 種方法可確認(rèn)擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性，即為實(shí)驗(yàn)?zāi)康漠a(chǎn)物。圖 2.1 內(nèi)參基因 GAPDH 擴(kuò)增曲線

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

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本文編號(hào)：2787344